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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-12256 | |||||||||
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タイトル | Structure of the autoinducer-2 exporter TqsA from E. coli | |||||||||
マップデータ | C5 symmetry imposed final map for TqsA | |||||||||
試料 |
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キーワード | cryo-EM / membrane protein / autoinducer-2 exporter / quorum sensing / pentamer / protein oligomerization / STRUCTURAL PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | autoinducer AI-2 transmembrane transport / Transmembrane protein TqsA-like / AI-2E family transporter / quorum sensing / efflux transmembrane transporter activity / transmembrane transport / plasma membrane / AI-2 transport protein TqsA 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Khera R / Xie H | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2022 タイトル: Cryo-EM structures of pentameric autoinducer-2 exporter from Escherichia coli reveal its transport mechanism. 著者: Radhika Khera / Ahmad R Mehdipour / Jani R Bolla / Joerg Kahnt / Sonja Welsch / Ulrich Ermler / Cornelia Muenke / Carol V Robinson / Gerhard Hummer / Hao Xie / Hartmut Michel / 要旨: Bacteria utilize small extracellular molecules to communicate in order to collectively coordinate their behaviors in response to the population density. Autoinducer-2 (AI-2), a universal molecule for ...Bacteria utilize small extracellular molecules to communicate in order to collectively coordinate their behaviors in response to the population density. Autoinducer-2 (AI-2), a universal molecule for both intra- and inter-species communication, is involved in the regulation of biofilm formation, virulence, motility, chemotaxis, and antibiotic resistance. While many studies have been devoted to understanding the biosynthesis and sensing of AI-2, very little information is available on its export. The protein TqsA from Escherichia coli, which belongs to the AI-2 exporter superfamily, has been shown to export AI-2. Here, we report the cryogenic electron microscopic structures of two AI-2 exporters (TqsA and YdiK) from E. coli at 3.35 Å and 2.80 Å resolutions, respectively. Our structures suggest that the AI-2 exporter exists as a homo-pentameric complex. In silico molecular docking and native mass spectrometry experiments were employed to demonstrate the interaction between AI-2 and TqsA, and the results highlight the functional importance of two helical hairpins in substrate binding. We propose that each monomer works as an independent functional unit utilizing an elevator-type transport mechanism. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_12256.map.gz | 11.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-12256-v30.xml emd-12256.xml | 19 KB 19 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_12256_fsc.xml | 11.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_12256.png | 107 KB | ||
マスクデータ | emd_12256_msk_1.map | 125 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-12256.cif.gz | 5.9 KB | ||
その他 | emd_12256_additional_1.map.gz emd_12256_half_map_1.map.gz emd_12256_half_map_2.map.gz | 13.5 MB 98.3 MB 98.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12256 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12256 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_12256_validation.pdf.gz | 765 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_12256_full_validation.pdf.gz | 764.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_12256_validation.xml.gz | 18.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_12256_validation.cif.gz | 24.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12256 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12256 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7nb6MC 7ot9C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_12256.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | C5 symmetry imposed final map for TqsA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.837 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_12256_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: C1 symmetry map
ファイル | emd_12256_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | C1 symmetry map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map2
ファイル | emd_12256_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map1
ファイル | emd_12256_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Pentameric TqsA
全体 | 名称: Pentameric TqsA |
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要素 |
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-超分子 #1: Pentameric TqsA
超分子 | 名称: Pentameric TqsA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 187 KDa |
-分子 #1: AI-2 transport protein TqsA
分子 | 名称: AI-2 transport protein TqsA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: K12 |
分子量 | 理論値: 37.563543 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MAKPIITLNG LKIVIMLGML VIILCGIRFA AEIIVPFILA LFIAVILNPL VQHMVRWRVP RVLAVSILMT IIVMAMVLLL AYLGSALNE LTRTLPQYRN SIMTPLQALE PLLQRVGIDV SVDQLAHYID PNAAMTLLTN LLTQLSNAMS SIFLLLLTVL F MLLEVPQL ...文字列: MAKPIITLNG LKIVIMLGML VIILCGIRFA AEIIVPFILA LFIAVILNPL VQHMVRWRVP RVLAVSILMT IIVMAMVLLL AYLGSALNE LTRTLPQYRN SIMTPLQALE PLLQRVGIDV SVDQLAHYID PNAAMTLLTN LLTQLSNAMS SIFLLLLTVL F MLLEVPQL PGKFQQMMAR PVEGMAAIQR AIDSVSHYLV LKTAISIITG LVAWAMLAAL DVRFAFVWGL LAFALNYIPN IG SVLAAIP PIAQVLVFNG FYEALLVLAG YLLINLVFGN ILEPRIMGRG LGLSTLVVFL SLIFWGWLLG PVGMLLSVPL TII VKIALE QTAGGQSIAV LLSDLNKE UniProtKB: AI-2 transport protein TqsA |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 3.4 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 50 mM Tris (pH 7.5), 150 mM NaCl and 0.006% GDN |
グリッド | モデル: C-flat-1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III / 詳細: blot time 4 s, blot force +20. |
詳細 | Its a membrane protein and for purification, glyco-diosgenin was used. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 5452 / 平均電子線量: 80.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / Cs: 2.7 mm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |