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基本情報
| 登録情報 | ![]() | ||||||||||||
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| タイトル | mouse hippocampal CA1-sr synapse tomogram: CA1-sr dataset 2 | ||||||||||||
マップデータ | mouse hippocampal CA1-sr synapse from CA1-sr dataset 2. Isonet deconvolve only. | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | synapse / vesicles / cell adhesion molecules / CELL ADHESION | ||||||||||||
| 生物種 | ![]() | ||||||||||||
| 手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | ||||||||||||
データ登録者 | Glynn C / Smith JLR | ||||||||||||
| 資金援助 | 英国, 3件
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引用 | ジャーナル: Cell Rep Methods / 年: 2025タイトル: A generalizable and targeted molecular biopsy approach for in situ cryogenic electron tomography of vitreous brain tissue. 著者: Calina Glynn / Jake L R Smith / Matthew Case / Rebecca Csöndör / Ana Katsini / Maria E Sanita / Thomas S Glen / Avery Pennington / Michael Grange / ![]() 要旨: Cellular cryogenic electron tomography (cryo-ET) enables the capture of detailed structural information within a biologically relevant environment. However, information in more complex samples, such ...Cellular cryogenic electron tomography (cryo-ET) enables the capture of detailed structural information within a biologically relevant environment. However, information in more complex samples, such as multicellular specimens and tissues, is lacking. Importantly, these observations need to be set in the context of populations. Currently, imaging on the molecular scale is limited to a few observations in situ that struggle to be generalized. This is due to limitations in throughput and versatility employed by current instrumentation. Here, we utilize plasma focused ion beam milling to examine the molecular landscape of mouse hippocampus by cryo-ET. We reveal the complex organization of macromolecules in targeted regions across CA1 stratum pyramidale (sp) to radiatum (sr), representing a molecular atlas of hippocampal architecture in adult mice. The combination of instrumentation and application of technical advancements provides a framework to explore specific structural questions within other tissues in a targeted manner. | ||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_55442.map.gz | 171.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-55442-v30.xml emd-55442.xml | 12.5 KB 12.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_55442.png | 217.4 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-55442.cif.gz | 4.7 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-55442 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-55442 | HTTPS FTP |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_55442.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 200 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | mouse hippocampal CA1-sr synapse from CA1-sr dataset 2. Isonet deconvolve only. | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 15.84 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : mouse hippocampal CA1 stratum radiatum
| 全体 | 名称: mouse hippocampal CA1 stratum radiatum |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1: mouse hippocampal CA1 stratum radiatum
| 超分子 | 名称: mouse hippocampal CA1 stratum radiatum / タイプ: tissue / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: synapse from hippocampal layer CA1-sr from the right hemisphere of a 172 day old female mouse |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 電子線トモグラフィー法 |
| 試料の集合状態 | tissue |
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試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 92 mM NMDG, 2.5 mM KCl, 1.25 mM NaH2PO4, 30 mM NaHCO3, 20 mM HEPES, 25 mM glucose, 2 mM thiourea, 5 mM Na-ascorbate, 3 mM Na-pyruvate, 0.5 mM CaCl2 2H2O, and 10 mM MgSO4 7H2O |
|---|---|
| グリッド | 材質: COPPER |
| 凍結 | 凍結剤: NITROGEN / 詳細: Leica EM Ice HPF. |
| 詳細 | synapse from the right hemisphere of a 172 day old female mouse hippocampus CA1 stratum radiatum. |
| 加圧凍結法 | 装置: OTHER 詳細: 3 mm x 0.5 mm gold plated copper high pressure freezing carriers with 0.1 mm recess. Carriers were coated with hexadecene > 45 minutes prior to use.. The value given for _em_high_pressure_ ...詳細: 3 mm x 0.5 mm gold plated copper high pressure freezing carriers with 0.1 mm recess. Carriers were coated with hexadecene > 45 minutes prior to use.. The value given for _em_high_pressure_freezing.instrument is Leica EM Ice. This is not in a list of allowed values {'LEICA EM PACT2', 'LEICA EM PACT', 'OTHER', 'BAL-TEC HPM 010', 'LEICA EM HPM100', 'EMS-002 RAPID IMMERSION FREEZER'} so OTHER is written into the XML file. |
| Cryo protectant | 10% dextran 10% sucrose in NMDG buffer pH 7.4 |
| 切片作成 | 集束イオンビーム - 装置: OTHER / 集束イオンビーム - イオン: OTHER / 集束イオンビーム - 電圧: 30 / 集束イオンビーム - 電流: 0.001 / 集束イオンビーム - 時間: 3600 / 集束イオンビーム - 温度: 100 K / 集束イオンビーム - Initial thickness: 100000 / 集束イオンビーム - 最終 厚さ: 177 集束イオンビーム - 詳細: Lamella were prepared starting from 100 micron thick tissue sections in high pressure freezing carriers using the serial lift-out method on a Helios Hydra plasma ...集束イオンビーム - 詳細: Lamella were prepared starting from 100 micron thick tissue sections in high pressure freezing carriers using the serial lift-out method on a Helios Hydra plasma FIB. Milling and serial sectioning was carried out using xenon gas and currents ranging from 1 nA to 60 nA depending on step. Thinning was then carried out on an Arctis pFIB starting with xenon gas and progressively lower currents from 4 nA to 100 pA. Once the lamella reached 400-600 nm thickness, argon was used for polishing with currents of 60 pA followed by 20 pA to the final thickness.. The value given for _em_focused_ion_beam.instrument is helios hydra and Arctis. This is not in a list of allowed values {'OTHER', 'DB235'} so OTHER is written into the XML file. |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | TFS KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 130.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 64000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 詳細 | preprocessing carried out in warp. reconstruction carried out in aretomo2 with SART reconstruction at bin8. |
|---|---|
| 最終 再構成 | アルゴリズム: ALGEBRAIC (ARTS) / ソフトウェア - 名称: Warp / ソフトウェア - 詳細: aretomo2, not warp / 使用した粒子像数: 41 |
| CTF補正 | ソフトウェア - 名称: Warp (ver. 1.0.9) / タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
ムービー
コントローラー
万見について




キーワード
データ登録者
英国, 3件
引用
Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)
















FIELD EMISSION GUN
