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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-26334 | |||||||||
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タイトル | Human V-ATPase in state 2 with SidK and mEAK-7 | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | V-ATPase / mEAK-7 / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of cellular response to oxidative stress / proton-transporting two-sector ATPase complex / Blockage of phagosome acidification / Ion channel transport / Regulation of MITF-M-dependent genes involved in lysosome biogenesis and autophagy / positive regulation of protein localization to lysosome / intracellular pH reduction / eye pigmentation / central nervous system maturation / Nef Mediated CD8 Down-regulation ...negative regulation of cellular response to oxidative stress / proton-transporting two-sector ATPase complex / Blockage of phagosome acidification / Ion channel transport / Regulation of MITF-M-dependent genes involved in lysosome biogenesis and autophagy / positive regulation of protein localization to lysosome / intracellular pH reduction / eye pigmentation / central nervous system maturation / Nef Mediated CD8 Down-regulation / ATPase-coupled ion transmembrane transporter activity / transporter activator activity / plasma membrane proton-transporting V-type ATPase complex / rostrocaudal neural tube patterning / positive regulation of transforming growth factor beta1 production / cellular response to increased oxygen levels / Golgi lumen acidification / proton-transporting V-type ATPase, V0 domain / synaptic vesicle lumen acidification / Transferrin endocytosis and recycling / extrinsic component of synaptic vesicle membrane / lysosomal lumen acidification / clathrin-coated vesicle membrane / endosome to plasma membrane protein transport / vacuolar transport / endosomal lumen acidification / vacuolar proton-transporting V-type ATPase, V0 domain / vacuolar proton-transporting V-type ATPase, V1 domain / XBP1(S) activates chaperone genes / vacuolar proton-transporting V-type ATPase complex / Amino acids regulate mTORC1 / proton-transporting V-type ATPase complex / head morphogenesis / vacuolar acidification / ROS and RNS production in phagocytes / osteoclast development / protein localization to cilium / Nef Mediated CD4 Down-regulation / dendritic spine membrane / regulation of cellular pH / azurophil granule membrane / regulation of MAPK cascade / microvillus / proton transmembrane transporter activity / tertiary granule membrane / ATPase activator activity / autophagosome membrane / positive regulation of Wnt signaling pathway / ficolin-1-rich granule membrane / cilium assembly / RHOA GTPase cycle / response to amino acid / TOR signaling / regulation of macroautophagy / angiotensin maturation / Metabolism of Angiotensinogen to Angiotensins / specific granule membrane / enzyme regulator activity / H+-transporting two-sector ATPase / ATP metabolic process / axon terminus / Insulin receptor recycling / ruffle / endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment membrane / proton-transporting ATPase activity, rotational mechanism / RNA endonuclease activity / regulation of cell migration / proton-transporting ATP synthase activity, rotational mechanism / receptor-mediated endocytosis / proton transmembrane transport / response to nutrient levels / secretory granule membrane / secretory granule / response to insulin / transmembrane transport / cilium / small GTPase binding / synaptic vesicle membrane / endocytosis / phagocytic vesicle membrane / positive regulation of canonical Wnt signaling pathway / melanosome / apical part of cell / signaling receptor activity / regulation of cell population proliferation / ATPase binding / postsynaptic membrane / intracellular iron ion homeostasis / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / lysosome / early endosome / endosome membrane / endosome / nuclear speck / apical plasma membrane / lysosomal membrane / Golgi membrane / axon / external side of plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / Legionella pneumophila (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Wang L / Fu TM | |||||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2022 タイトル: Identification of mEAK-7 as a human V-ATPase regulator via cryo-EM data mining. 著者: Longfei Wang / Di Wu / Carol V Robinson / Tian-Min Fu / 要旨: Vacuolar-type adenosine triphosphatases (V-ATPases) not only function as rotary proton pumps in cellular organelles but also serve as signaling hubs. To identify the endogenous binding partners of V- ...Vacuolar-type adenosine triphosphatases (V-ATPases) not only function as rotary proton pumps in cellular organelles but also serve as signaling hubs. To identify the endogenous binding partners of V-ATPase, we collected a large dataset of human V-ATPases and did extensive classification and focused refinement of human V-ATPases. Unexpectedly, about 17% of particles in state 2 of human V-ATPases display additional density with an overall resolution of 3.3 Å. Structural analysis combined with artificial intelligence modeling enables us to identify this additional density as mEAK-7, a protein involved in mechanistic target of rapamycin (mTOR) signaling in mammals. Our structure shows that mEAK-7 interacts with subunits A, B, D, and E of V-ATPases in state 2. Thus, we propose that mEAK-7 may regulate V-ATPase function through binding to V-ATPases in state 2 as well as mediate mTOR signaling. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_26334.map.gz | 168.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-26334-v30.xml emd-26334.xml | 38 KB 38 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_26334.png | 156.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-26334.cif.gz | 10.3 KB | ||
その他 | emd_26334_additional_1.map.gz emd_26334_additional_2.map.gz emd_26334_half_map_1.map.gz emd_26334_half_map_2.map.gz | 168.2 MB 158.8 MB 165.4 MB 165.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26334 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26334 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_26334_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_26334_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_26334_validation.xml.gz | 15.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_26334_validation.cif.gz | 18 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26334 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26334 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7u4tMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-11132 (タイトル: Cryo-EM structures of human V-ATPase / Data size: 8.4 TB Data #1: Unaligned multi frame micrographs of human V-ATPase in complex with SidK [micrographs - multiframe]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_26334.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.08 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Local refinement map of mEAK-7 and nearby subunits
ファイル | emd_26334_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Local refinement map of mEAK-7 and nearby subunits | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Composite map
ファイル | emd_26334_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Composite map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_26334_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_26334_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : V-ATPase with SidK and mEAK-7
+超分子 #1: V-ATPase with SidK and mEAK-7
+分子 #1: V-type proton ATPase 116 kDa subunit a isoform 1
+分子 #2: V-type proton ATPase subunit C 1
+分子 #3: V-type proton ATPase subunit E 1
+分子 #4: V-type proton ATPase subunit G 1
+分子 #5: V-type proton ATPase subunit e 1
+分子 #6: Ribonuclease kappa
+分子 #7: V-type proton ATPase subunit S1
+分子 #8: Renin receptor
+分子 #9: V-type proton ATPase 21 kDa proteolipid subunit
+分子 #10: V-type proton ATPase 16 kDa proteolipid subunit
+分子 #11: V-type proton ATPase subunit d 1
+分子 #12: V-type proton ATPase catalytic subunit A
+分子 #13: V-type proton ATPase subunit B, brain isoform
+分子 #14: SidK
+分子 #15: V-type proton ATPase subunit D
+分子 #16: V-type proton ATPase subunit F
+分子 #17: V-type proton ATPase subunit H
+分子 #18: MTOR-associated protein MEAK7
+分子 #19: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
+分子 #20: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 170000 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |