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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-15793 | |||||||||||||||
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タイトル | Translating 70S ribosome in the unrotated state (P and E, tRNAs) | |||||||||||||||
マップデータ | Post-processed (localfilter from cryoSPARC) map from Homogeneous Refinement | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | 70S / bacterial / translation / high-resolution / RIBOSOME | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation ...ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Escherichia coli B (大腸菌) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 1.55 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Fromm SA / O'Connor KM / Purdy M / Bhatt PR / Loughran G / Atkins JF / Jomaa A / Mattei S | |||||||||||||||
資金援助 | アイルランド, European Union, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: The translating bacterial ribosome at 1.55 Å resolution generated by cryo-EM imaging services. 著者: Simon A Fromm / Kate M O'Connor / Michael Purdy / Pramod R Bhatt / Gary Loughran / John F Atkins / Ahmad Jomaa / Simone Mattei / 要旨: Our understanding of protein synthesis has been conceptualised around the structure and function of the bacterial ribosome. This complex macromolecular machine is the target of important ...Our understanding of protein synthesis has been conceptualised around the structure and function of the bacterial ribosome. This complex macromolecular machine is the target of important antimicrobial drugs, an integral line of defence against infectious diseases. Here, we describe how open access to cryo-electron microscopy facilities combined with bespoke user support enabled structural determination of the translating ribosome from Escherichia coli at 1.55 Å resolution. The obtained structures allow for direct determination of the rRNA sequence to identify ribosome polymorphism sites in the E. coli strain used in this study and enable interpretation of the ribosomal active and peripheral sites at unprecedented resolution. This includes scarcely populated chimeric hybrid states of the ribosome engaged in several tRNA translocation steps resolved at ~2 Å resolution. The current map not only improves our understanding of protein synthesis but also allows for more precise structure-based drug design of antibiotics to tackle rising bacterial resistance. #1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2022 タイトル: The translating bacterial ribosome at 1.55 angstrom resolution by open access cryo-EM 著者: Fromm SA / O'Connor KM / Purdy M / Bhatt PR / Loughran G / Atkins JF / Jomaa A / Mattei S | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_15793.map.gz | 55 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-15793-v30.xml emd-15793.xml | 77.8 KB 77.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_15793_fsc.xml | 18.2 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_15793.png | 245.2 KB | ||
マスクデータ | emd_15793_msk_1.map emd_15793_msk_2.map | 669.9 MB 669.9 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-15793.cif.gz | 15.3 KB | ||
その他 | emd_15793_half_map_1.map.gz emd_15793_half_map_2.map.gz | 621.3 MB 621.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15793 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15793 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_15793_validation.pdf.gz | 931.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_15793_full_validation.pdf.gz | 930.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_15793_validation.xml.gz | 28.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_15793_validation.cif.gz | 37.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15793 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15793 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_15793.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 669.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Post-processed (localfilter from cryoSPARC) map from Homogeneous Refinement | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.731 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_15793_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | emd_15793_msk_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map A
ファイル | emd_15793_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map B
ファイル | emd_15793_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : 70S ribosome
+超分子 #1: 70S ribosome
+分子 #1: 50S ribosomal protein L33
+分子 #2: 50S ribosomal protein L34
+分子 #3: 50S ribosomal protein L35
+分子 #4: 50S ribosomal protein L36
+分子 #6: 30S ribosomal protein S2
+分子 #7: 30S ribosomal protein S3
+分子 #8: 30S ribosomal protein S4
+分子 #9: 30S ribosomal protein S5
+分子 #10: 30S ribosomal protein S6
+分子 #11: 30S ribosomal protein S7
+分子 #12: 30S ribosomal protein S8
+分子 #13: 30S ribosomal protein S9
+分子 #14: 30S ribosomal protein S10
+分子 #15: 30S ribosomal protein S11
+分子 #16: 30S ribosomal protein S12
+分子 #17: 30S ribosomal protein S13
+分子 #18: 30S ribosomal protein S14
+分子 #19: 30S ribosomal protein S15
+分子 #20: 30S ribosomal protein S16
+分子 #21: 30S ribosomal protein S17
+分子 #22: 30S ribosomal protein S18
+分子 #23: 30S ribosomal protein S19
+分子 #24: 30S ribosomal protein S20
+分子 #25: 30S ribosomal protein S21
+分子 #30: 50S ribosomal protein L2
+分子 #31: 50S ribosomal protein L3
+分子 #32: 50S ribosomal protein L4
+分子 #33: 50S ribosomal protein L5
+分子 #34: 50S ribosomal protein L6
+分子 #35: 50S ribosomal protein L9
+分子 #36: 50S ribosomal protein L13
+分子 #37: 50S ribosomal protein L14
+分子 #38: 50S ribosomal protein L15
+分子 #39: 50S ribosomal protein L16
+分子 #40: 50S ribosomal protein L17
+分子 #41: 50S ribosomal protein L18
+分子 #42: 50S ribosomal protein L19
+分子 #43: 50S ribosomal protein L20
+分子 #44: 50S ribosomal protein L21
+分子 #45: 50S ribosomal protein L22
+分子 #46: 50S ribosomal protein L23
+分子 #47: 50S ribosomal protein L24
+分子 #48: 50S ribosomal protein L25
+分子 #49: 50S ribosomal protein L27
+分子 #50: 50S ribosomal protein L28
+分子 #51: 50S ribosomal protein L29
+分子 #52: 50S ribosomal protein L30
+分子 #53: 50S ribosomal protein L32
+分子 #5: 16S rRNA
+分子 #26: mRNA
+分子 #27: P-site tRNA
+分子 #28: 23S rRNA
+分子 #29: 5S rRNA
+分子 #54: ZINC ION
+分子 #55: POTASSIUM ION
+分子 #56: MAGNESIUM ION
+分子 #57: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL | ||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 0.2 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER / 詳細: Fischione 1070 | ||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 279 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris X / エネルギーフィルター - スリット幅: 10 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 19449 / 平均露光時間: 5.2 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 詳細: saved in EER format; 16 exposures per hole/stage movement. 11 in outer ring around the hole edge, 5 in inner ring around the hole center. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 165000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |