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基本情報
登録情報 | ![]() | ||||||||||||||||||
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タイトル | Asymmetric reconstruction of averaged ribosomes from Saccharomyces cerevisiae | ||||||||||||||||||
![]() | Asymmetric reconstruction of averaged ribosomes from Saccharomyces cerevisiae | ||||||||||||||||||
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![]() | ribosome / replication / active translation / ribosomal states / polysomes | ||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.1 Å | ||||||||||||||||||
![]() | Schmidt L / Tueting C / Kyrilis F / Hamdi F / Semchonok DA / Kastritis PL | ||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Delineating organizational principles of the endogenous L-A virus by cryo-EM and computational analysis of native cell extracts. 著者: Lisa Schmidt / Christian Tüting / Fotis L Kyrilis / Farzad Hamdi / Dmitry A Semchonok / Gerd Hause / Annette Meister / Christian Ihling / Milton T Stubbs / Andrea Sinz / Panagiotis L Kastritis / ![]() ![]() 要旨: The high abundance of most viruses in infected host cells benefits their structural characterization. However, endogenous viruses are present in low copy numbers and are therefore challenging to ...The high abundance of most viruses in infected host cells benefits their structural characterization. However, endogenous viruses are present in low copy numbers and are therefore challenging to investigate. Here, we retrieve cell extracts enriched with an endogenous virus, the yeast L-A virus. The determined cryo-EM structure discloses capsid-stabilizing cation-π stacking, widespread across viruses and within the Totiviridae, and an interplay of non-covalent interactions from ten distinct capsomere interfaces. The capsid-embedded mRNA decapping active site trench is supported by a constricting movement of two flexible opposite-facing loops. tRNA-loaded polysomes and other biomacromolecules, presumably mRNA, are found in virus proximity within the cell extract. Mature viruses participate in larger viral communities resembling their rare in-cell equivalents in terms of size, composition, and inter-virus distances. Our results collectively describe a 3D-architecture of a viral milieu, opening the door to cell-extract-based high-resolution structural virology. #1: ![]() タイトル: Delineating organizational principles of the endogenous L-A virus by cryo-EM and computational analysis of native cell extracts 著者: Schmidt L / Tuting C / Kyrilis FL / Hamdi F / Semchonok DA / Hause G / Meister A / Ihling C / Shah PNM / Stubbs MT / Sinz A / Stuart DI / Kastritis PL | ||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 7.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 31.5 KB 31.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 5.9 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 182.7 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 5.1 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | 7.5 MB 7.5 MB 7.5 MB 7.5 MB 7.5 MB 7.5 MB 7.3 MB 7.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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マップ
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注釈 | Asymmetric reconstruction of averaged ribosomes from Saccharomyces cerevisiae | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.177 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Reconstructed map of a ribosome after variability analysis...
ファイル | emd_15215_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Reconstructed map of a ribosome after variability analysis showing tRNA occupation at sites A/A P/P | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Reconstructed map of a ribosome after variability analysis...
ファイル | emd_15215_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Reconstructed map of a ribosome after variability analysis showing tRNA occupation at sites P/P E/E | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Reconstructed map of a ribosome after variability analysis...
ファイル | emd_15215_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | Reconstructed map of a ribosome after variability analysis showing tRNA occupation at sites P/E E/- | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Reconstructed map of a ribosome after variability analysis...
ファイル | emd_15215_additional_4.map | ||||||||||||
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注釈 | Reconstructed map of a ribosome after variability analysis showing tRNA occupation at sites A/P P/E | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Reconstructed map of a ribosome after variability analysis...
ファイル | emd_15215_additional_5.map | ||||||||||||
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注釈 | Reconstructed map of a ribosome after variability analysis showing tRNA occupation at site A/P | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Reconstructed map of a ribosome after variability analysis...
ファイル | emd_15215_additional_6.map | ||||||||||||
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注釈 | Reconstructed map of a ribosome after variability analysis showing tRNA occupation at site A/A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Asymmetric reconstruction of averaged ribosomes from Saccharomyces cerevisiae...
ファイル | emd_15215_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Asymmetric reconstruction of averaged ribosomes from Saccharomyces cerevisiae - Half Map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Asymmetric reconstruction of averaged ribosomes from Saccharomyces cerevisiae...
ファイル | emd_15215_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Asymmetric reconstruction of averaged ribosomes from Saccharomyces cerevisiae - Half Map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Saccharomyces cerevisiae ribosomes
全体 | 名称: Saccharomyces cerevisiae ribosomes |
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要素 |
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-超分子 #1: Saccharomyces cerevisiae ribosomes
超分子 | 名称: Saccharomyces cerevisiae ribosomes / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.3 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 構成要素 - 濃度: 200.0 mM / 構成要素 - 式: CH3COONH4 / 構成要素 - 名称: Ammoniumacetate 詳細: pH of the buffer was adjusted with NaOH buffer was filtered and sonicated |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 15 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.04 kPa |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot force 2 and blot time 6 before plunging. |
詳細 | heterogenous cell extract |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS GLACIOS |
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温度 | 最低: 77.0 K / 最高: 118.0 K |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 7 / 実像数: 2728 / 平均露光時間: 3.61 sec. / 平均電子線量: 30.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 倍率(補正後): 44067 / 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 45000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |