+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10710 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Yeast Tomogram Collected on Lamella Generated by Fully Automated FIB Milling | |||||||||
マップデータ | Yeast Tomogram Collected on a Lamella Generated by Fully Automated FIB Milling | |||||||||
試料 |
| |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Zachs T / Pilhofer M | |||||||||
資金援助 | スイス, European Union, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Fully automated, sequential focused ion beam milling for cryo-electron tomography. 著者: Tobias Zachs / Andreas Schertel / João Medeiros / Gregor L Weiss / Jannik Hugener / Joao Matos / Martin Pilhofer / 要旨: Cryo-electron tomography (cryoET) has become a powerful technique at the interface of structural biology and cell biology, due to its unique ability for imaging cells in their native state and ...Cryo-electron tomography (cryoET) has become a powerful technique at the interface of structural biology and cell biology, due to its unique ability for imaging cells in their native state and determining structures of macromolecular complexes in their cellular context. A limitation of cryoET is its restriction to relatively thin samples. Sample thinning by cryo-focused ion beam (cryoFIB) milling has significantly expanded the range of samples that can be analyzed by cryoET. Unfortunately, cryoFIB milling is low-throughput, time-consuming and manual. Here, we report a method for fully automated sequential cryoFIB preparation of high-quality lamellae, including rough milling and polishing. We reproducibly applied this method to eukaryotic and bacterial model organisms, and show that the resulting lamellae are suitable for cryoET imaging and subtomogram averaging. Since our method reduces the time required for lamella preparation and minimizes the need for user input, we envision the technique will render previously inaccessible projects feasible. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10710.map.gz | 263.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-10710-v30.xml emd-10710.xml | 8.3 KB 8.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_10710.png | 147.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10710 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10710 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10710_validation.pdf.gz | 145.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_10710_full_validation.pdf.gz | 145 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10710_validation.xml.gz | 8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10710 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10710 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10376 (タイトル: Yeast Tilt Series Collected on Lamella Generated by Fully Automated FIB Milling Data size: 2.6 Data #1: Yeast Tilt Series Collected on Lamella Generated by Fully Automated FIB Milling [tilt series]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10710.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 571.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS SIGNED INTEGER (2 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Yeast Tomogram Collected on a Lamella Generated by Fully Automated FIB Milling | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 18.28 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Yeast strain SK1
全体 | 名称: Yeast strain SK1 |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Yeast strain SK1
超分子 | 名称: Yeast strain SK1 / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 株: SK1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
---|---|
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
切片作成 | 集束イオンビーム - 装置: OTHER / 集束イオンビーム - イオン: OTHER / 集束イオンビーム - 電圧: 30 kV / 集束イオンビーム - 電流: 0.005 nA / 集束イオンビーム - 時間: 1545 sec. / 集束イオンビーム - 温度: 121 K / 集束イオンビーム - Initial thickness: 2000 nm / 集束イオンビーム - 最終 厚さ: 243 nm 集束イオンビーム - 詳細: The value given for _emd_sectioning_focused_ion_beam.instrument is Zeiss CrossBeam 550. This is not in a list of allowed values set(['DB235', 'OTHER']) so OTHER is ...集束イオンビーム - 詳細: The value given for _emd_sectioning_focused_ion_beam.instrument is Zeiss CrossBeam 550. This is not in a list of allowed values set(['DB235', 'OTHER']) so OTHER is written into the XML file. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 1.96 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 使用した粒子像数: 61 |
---|