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- EMDB-9732: Cryo-EM structure of Flock House Virus puffed particle -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-9732
タイトルCryo-EM structure of Flock House Virus puffed particle
マップデータCryo-EM structure of Flock House Virus puffed particle
試料
  • ウイルス: Flock house virus (ウイルス)
機能・相同性
機能・相同性情報


nodavirus endopeptidase / permeabilization of host organelle membrane involved in viral entry into host cell / symbiont entry into host cell via permeabilization of inner membrane / T=3 icosahedral viral capsid / aspartic-type endopeptidase activity / proteolysis / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Peptidase A6, nodavirus coat protein / Peptidase A6 family / Viral coat protein subunit
類似検索 - ドメイン・相同性
Capsid protein alpha
類似検索 - 構成要素
生物種Flock house virus (ウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 26.2 Å
データ登録者Banerjee M / Azad K
引用ジャーナル: J Virol / 年: 2019
タイトル: Structural Dynamics of Nonenveloped Virus Disassembly Intermediates.
著者: Kimi Azad / Manidipa Banerjee /
要旨: The stability of icosahedral viruses is crucial for protecting the viral genome during transit; however, successful infection requires eventual disassembly of the capsid. A comprehensive ...The stability of icosahedral viruses is crucial for protecting the viral genome during transit; however, successful infection requires eventual disassembly of the capsid. A comprehensive understanding of how stable, uniform icosahedrons disassemble remains elusive, mainly due to the complexities involved in isolating transient intermediates. We utilized incremental heating to systematically characterize the disassembly pathway of a model nonenveloped virus and identified an intriguing link between virus maturation and disassembly. Further, we isolated and characterized two intermediates by cryo-electron microscopy and three-dimensional reconstruction, without imposing icosahedral symmetry. The first intermediate displayed a series of major, asymmetric alterations, whereas the second showed that the act of genome release, through the 2-fold axis, is actually confined to a small section on the capsid. Our study thus presents a comprehensive structural analysis of nonenveloped virus disassembly and emphasizes the asymmetric nature of programmed conformational changes. Disassembly or uncoating of an icosahedral capsid is a crucial step during infection by nonenveloped viruses. However, the dynamic and transient nature of the disassembly process makes it challenging to isolate intermediates in a temporal, stepwise manner for structural characterization. Using controlled, incremental heating, we isolated two disassembly intermediates: "eluted particles" and "puffed particles" of an insect nodavirus, Flock House virus (FHV). Cryo-electron microscopy and three-dimensional reconstruction of the FHV disassembly intermediates indicated that disassembly-related conformational alterations are minimally global and largely local, leading to asymmetry in the particle and eventual genome release without complete disintegration of the icosahedron.
履歴
登録2018年11月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年8月28日-
マップ公開2019年8月28日-
更新2020年3月11日-
現状2020年3月11日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0335
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0335
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_9732.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_9732.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Cryo-EM structure of Flock House Virus puffed particle
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.74 Å/pix.
x 256 pix.
= 445.619 Å		1.74 Å/pix.
x 256 pix.
= 445.619 Å		1.74 Å/pix.
x 256 pix.
= 445.619 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.7407 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.0335 / ムービー #1: 0.0335
最小 - 最大-0.07117947 - 0.12239158
平均 (標準偏差)0.011305979 (±0.024154158)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 445.6192 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.740699218751.740699218751.74069921875
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z445.619445.619445.619
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ400400400
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.0710.1220.011

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Flock house virus

全体名称: Flock house virus (ウイルス)
要素
  • ウイルス: Flock house virus (ウイルス)

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超分子 #1: Flock house virus

超分子名称: Flock house virus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0
詳細: Purified wild type Flock House Virus heated to 70 degC
NCBI-ID: 12287 / 生物種: Flock house virus / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: SPECIES / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No
宿主生物種: Costelytra zealandica (甲虫)
Host system生物種: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ)
分子量実験値: 9 MDa
ウイルス殻Shell ID: 1 / 直径: 300.0 Å / T番号(三角分割数): 3

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度1.5 mg/mL
緩衝液pH: 7 / 構成要素 - 濃度: 50.0 mM / 構成要素 - 式: C8H18N2O4S / 構成要素 - 名称: HEPES
グリッドモデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 284 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot for 3 seconds before plunging.
詳細Purified wild type Flock House Virus heated to 70 degC

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 2835 / 平均露光時間: 5.0 sec. / 平均電子線量: 20.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 3.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.5 µm / 倍率（公称値）: 81000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 1301 / 詳細: Manual selection
CTF補正ソフトウェア - 名称: CTFFIND (ver. 4.1.8)
初期モデルモデルのタイプ: OTHER
詳細: 3D initial model was generated de novo from the 2D particles in RELION
最終 再構成使用したクラス数: 15 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 26.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1) / 使用した粒子像数: 1293
初期 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION
最終 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION
最終 3次元分類クラス数: 20
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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