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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-9212 | |||||||||
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タイトル | 12-meric ClyA pore complex | |||||||||
マップデータ | Dodecamer | |||||||||
試料 |
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キーワード | Pore-forming toxin / MEMBRANE PROTEIN / Toxin | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 modulation of apoptotic process in another organism / hemolysis in another organism / toxin activity / periplasmic space / host cell plasma membrane / extracellular region / identical protein binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Peng W / de Souza Santos M | |||||||||
引用 | ジャーナル: PLoS One / 年: 2019 タイトル: High-resolution cryo-EM structures of the E. coli hemolysin ClyA oligomers. 著者: Wei Peng / Marcela de Souza Santos / Yang Li / Diana R Tomchick / Kim Orth / 要旨: Pore-forming proteins (PFPs) represent a functionally important protein family, that are found in organisms from viruses to humans. As a major branch of PFPs, bacteria pore-forming toxins (PFTs) ...Pore-forming proteins (PFPs) represent a functionally important protein family, that are found in organisms from viruses to humans. As a major branch of PFPs, bacteria pore-forming toxins (PFTs) permeabilize membranes and usually cause the death of target cells. E. coli hemolysin ClyA is the first member with the pore complex structure solved among α-PFTs, employing α-helices as transmembrane elements. ClyA is proposed to form pores composed of various numbers of protomers. With high-resolution cryo-EM structures, we observe that ClyA pore complexes can exist as newly confirmed oligomers of a tridecamer and a tetradecamer, at estimated resolutions of 3.2 Å and 4.3 Å, respectively. The 2.8 Å cryo-EM structure of a dodecamer dramatically improves the existing structural model. Structural analysis indicates that protomers from distinct oligomers resemble each other and neighboring protomers adopt a conserved interaction mode. We also show a stabilized intermediate state of ClyA during the transition process from soluble monomers to pore complexes. Unexpectedly, even without the formation of mature pore complexes, ClyA can permeabilize membranes and allow leakage of particles less than ~400 Daltons. In addition, we are the first to show that ClyA forms pore complexes in the presence of cholesterol within artificial liposomes. These findings provide new mechanistic insights into the dynamic process of pore assembly for the prototypical α-PFT ClyA. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_9212.map.gz | 77.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-9212-v30.xml emd-9212.xml | 8.8 KB 8.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_9212.png | 40.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-9212.cif.gz | 5.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9212 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9212 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_9212_validation.pdf.gz | 594.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_9212_full_validation.pdf.gz | 594.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_9212_validation.xml.gz | 6.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_9212_validation.cif.gz | 7.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9212 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9212 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_9212.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Dodecamer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : 12-meric ClyA pore complex
全体 | 名称: 12-meric ClyA pore complex |
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要素 |
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-超分子 #1: 12-meric ClyA pore complex
超分子 | 名称: 12-meric ClyA pore complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 410 KDa |
-分子 #1: Hemolysin E, chromosomal
分子 | 名称: Hemolysin E, chromosomal / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 12 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: K12 |
分子量 | 理論値: 36.131816 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SQDLDEVDAG SMTEIVADKT VEVVKNAIET ADGALDLYNK YLDQVIPWQT FDETIKELSR FKQEYSQAAS VLVGDIKTL LMDSQDKYFE ATQTVYEWCG VATQLLAAYI LLFDEYNEKK ASAQKDILIK VLDDGITKLN EAQKSLLVSS Q SFNNASGK ...文字列: MGSSHHHHHH SQDLDEVDAG SMTEIVADKT VEVVKNAIET ADGALDLYNK YLDQVIPWQT FDETIKELSR FKQEYSQAAS VLVGDIKTL LMDSQDKYFE ATQTVYEWCG VATQLLAAYI LLFDEYNEKK ASAQKDILIK VLDDGITKLN EAQKSLLVSS Q SFNNASGK LLALDSQLTN DFSEKSSYFQ SQVDKIRKEA YAGAAAGVVA GPFGLIISYS IAAGVVEGKL IPELKNKLKS VQ NFFTTLS NTVKQANKDI DAAKLKLTTE IVAIGEIKTE TETTRFYVDY DDLMLSLLKE AAKKMINTCN EYQKRHGKKT LFE VPEV UniProtKB: Hemolysin E, chromosomal |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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グリッド | 詳細: unspecified |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 482946 |
初期 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |
最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |