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万見
- EMDB-8410: Ca2+ bound aplysia Slo1 -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-8410
タイトルCa2+ bound aplysia Slo1
マップデータMg and Ca-bound aplysia Slo1
試料
  • 細胞器官・細胞要素: Ca2+ bound aplysia Slo1
    • タンパク質・ペプチド: High conductance calcium-activated potassium channel
  • リガンド: POTASSIUM ION
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: CALCIUM ION
  • リガンド: (1R)-2-{[(S)-{[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]oxy}(hydroxy)phosphoryl]oxy}-1-[(hexadecanoyloxy)methyl]ethyl (9Z)-octadec-9-enoate
キーワードion channel / K+ channel / Ca2+ bound / high conductance / MEMBRANE PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


large conductance calcium-activated potassium channel activity / postsynaptic membrane
類似検索 - 分子機能
: / Ca2+-activated K+ channel Slowpoke, TrkA_C like domain / Calcium-activated potassium channel BK, alpha subunit / : / Calcium-activated BK potassium channel alpha subunit / Calcium-activated potassium channel slowpoke-like RCK domain / Voltage-dependent channel domain superfamily / Ion transport domain / Ion transport protein / NAD(P)-binding domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Aplysia californica (無脊椎動物)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å
データ登録者MacKinnon R / Tao X
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM43949 米国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: Nature / 年: 2017
タイトル: Cryo-EM structure of the open high-conductance Ca-activated K channel.
著者: Xiao Tao / Richard K Hite / Roderick MacKinnon /
要旨: The Ca-activated K channel, Slo1, has an unusually large conductance and contains a voltage sensor and multiple chemical sensors. Dual activation by membrane voltage and Ca renders Slo1 central to ...The Ca-activated K channel, Slo1, has an unusually large conductance and contains a voltage sensor and multiple chemical sensors. Dual activation by membrane voltage and Ca renders Slo1 central to processes that couple electrical signalling to Ca-mediated events such as muscle contraction and neuronal excitability. Here we present the cryo-electron microscopy structure of a full-length Slo1 channel from Aplysia californica in the presence of Ca and Mg at a resolution of 3.5 Å. The channel adopts an open conformation. Its voltage-sensor domain adopts a non-domain-swapped attachment to the pore and contacts the cytoplasmic Ca-binding domain from a neighbouring subunit. Unique structural features of the Slo1 voltage sensor suggest that it undergoes different conformational changes than other known voltage sensors. The structure reveals the molecular details of three distinct divalent cation-binding sites identified through electrophysiological studies of mutant Slo1 channels.
履歴
登録2016年10月3日-
ヘッダ(付随情報) 公開2016年11月16日-
マップ公開2017年1月11日-
更新2024年3月13日-
現状2024年3月13日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.014
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.014
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-5tj6
  • 表面レベル: 0.014
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_8410.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_8410.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Mg and Ca-bound aplysia Slo1
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.3 Å/pix.
x 256 pix.
= 332.8 Å		1.3 Å/pix.
x 256 pix.
= 332.8 Å		1.3 Å/pix.
x 256 pix.
= 332.8 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.3 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.014 / ムービー #1: 0.014
最小 - 最大-0.018576425 - 0.049764723
平均 (標準偏差)-0.00023435285 (±0.002291491)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 332.8 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.31.31.3
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z332.800332.800332.800
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-190-190-190
NX/NY/NZ380380380
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.0190.050-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Ca2+ bound aplysia Slo1

全体名称: Ca2+ bound aplysia Slo1
要素
  • 細胞器官・細胞要素: Ca2+ bound aplysia Slo1
    • タンパク質・ペプチド: High conductance calcium-activated potassium channel
  • リガンド: POTASSIUM ION
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: CALCIUM ION
  • リガンド: (1R)-2-{[(S)-{[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]oxy}(hydroxy)phosphoryl]oxy}-1-[(hexadecanoyloxy)methyl]ethyl (9Z)-octadec-9-enoate

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超分子 #1: Ca2+ bound aplysia Slo1

超分子名称: Ca2+ bound aplysia Slo1 / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Aplysia californica (無脊椎動物)
分子量理論値: 400 KDa

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分子 #1: High conductance calcium-activated potassium channel

分子名称: High conductance calcium-activated potassium channel
タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Aplysia californica (無脊椎動物)
分子量理論値: 120.308 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MASSSSTSCE PGDRQWYSFL ASSLVTFGSG LVVIIIYRIV LWLCCRKKKC IQVSNPVPTA RTTSLDQKSF MKNSDPEIGW MTEAKDWAG ELISGQTTTG RILVGLVFLL SIASLIIYFI DASTNTSVET CLPWSSSTTQ QVDLAFNVFF MIYFFIRFVA A NDKLWFWV ...文字列:
MASSSSTSCE PGDRQWYSFL ASSLVTFGSG LVVIIIYRIV LWLCCRKKKC IQVSNPVPTA RTTSLDQKSF MKNSDPEIGW MTEAKDWAG ELISGQTTTG RILVGLVFLL SIASLIIYFI DASTNTSVET CLPWSSSTTQ QVDLAFNVFF MIYFFIRFVA A NDKLWFWV ELFSFVDYFT IPPSFVAIYL DRNWLGLRFL RALRLMSIPD ILTYLNVLKT STLIRLVQLV VSFVSLWLTA AG FLHLLEN SGDPFFDFGN AQHLTYWECL YFLMVTMSTV GFGDIFATTV LGRTFVVIFI MIFIGLFASF IPEIAEILGK RQK YGGSYK KERGKRHVVV CGYITFDSVS NFLKDFLHKD REDVDVEIVF LHKGLPGLEL EGLLKRHFTQ VEYFWGSVMD ANDL ERVKI QEADACLVLA NKYCQDPDQE DAANIMRVIS IKNYHSDIKV IVQLLQYHNK AYLLNIPSWD WKRGDDAVCV AELKL GFIA QSCLAPGFST LMANLFTMRS YKPTPEMSQW QTDYMRGTGM EMYTEYLSSA FNALTFPEAA ELCFSKLKLL LLAIEV RQE DTRESTLAIN PGPKVKIENA TQGFFIAESA EEVKRAFYYC KNCHANVSDV RQIKKCKCRP LAMFKKGAAA VLALQRT PG LAVEPDGEAN DKDKSRGTST SKAVTSFPEK RKPQSRRKPS TTLKSKSPSE DSVPPPPPPV DEPRKFDSTG MFHWCPDR P LNDCLQDRSQ ASASGLRNHV VVCLFADAAS PLIGLRNLVM PLRASNFHYH ELKPTIIVGN LDYLHREWKT LQNFPKLSI LPGSPLNRAN LRAVNINLCD MCVIVSAKDR NMEDPNLVDK EAILCSLNIK AMTFDDTMGL IQSSNFVPGG FSPLHENKRS QAGANVPLI TELANDSNVQ FLDQDDDDDP DTELYMTQPF ACGTAFAVSV LDSLMSTSYF NDNALTLIRT LITGGATPEL E QILAEGAG MRGGYCSPAV LANRDRCRVA QISLFDGPLA QFGQGGHYGE LFVYALRHFG ILCIGLYRFR DTNESVRSPS SK RYVITNP PEDFPLLPTD QVYVLTYKQI TNH

UniProtKB: BK channel

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分子 #2: POTASSIUM ION

分子名称: POTASSIUM ION / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 5 / 式: K
分子量理論値: 39.098 Da

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分子 #3: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 1 / 式: MG
分子量理論値: 24.305 Da

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分子 #4: CALCIUM ION

分子名称: CALCIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 2 / 式: CA
分子量理論値: 40.078 Da

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分子 #5: (1R)-2-{[(S)-{[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]oxy}(hydroxy)phosphoryl]o...

分子名称: (1R)-2-{[(S)-{[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]oxy}(hydroxy)phosphoryl]oxy}-1-[(hexadecanoyloxy)methyl]ethyl (9Z)-octadec-9-enoate
タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 15 / 式: PGW
分子量理論値: 749.007 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度7 mg/mL
緩衝液pH: 8
構成要素:
濃度式名称
20.0 mMTrisTris
320.0 mMKClKCl
10.0 mMCaCl2CaCl2
10.0 mMMgCl2MgCl2
20.0 mMDTTDTT
2.0 mMTCEPTCEP
0.025 %DDMDDM
0.005 %CHSCHS
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 85 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 7420 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 7676 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-50 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2000 / 平均露光時間: 0.3 sec. / 平均電子線量: 1.8 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm / 倍率（公称値）: 22500
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 233000
初期モデルモデルのタイプ: OTHER
詳細: An initial model generated from 2D class averages in EMAN2
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C4 (4回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: FREALIGN / 使用した粒子像数: 115000
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: FREALIGN
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: RELION

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原子モデル構築 1

精密化空間: RECIPROCAL / プロトコル: AB INITIO MODEL / 温度因子: 100
得られたモデル

PDB-5tj6:
Ca2+ bound aplysia Slo1

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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