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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7jzx | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of CRISPR-Cas surveillance complex with AcrIF7 | ||||||
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![]() | HYDROLASE/RNA / CRISPR / HYDROLASE-RNA complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() maintenance of CRISPR repeat elements / endonuclease activity / defense response to virus / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / RNA binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||
![]() | Chang, L. / Li, Z. / Gabel, C. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural basis for inhibition of the type I-F CRISPR-Cas surveillance complex by AcrIF4, AcrIF7 and AcrIF14. 著者: Clinton Gabel / Zhuang Li / Heng Zhang / Leifu Chang / ![]() 要旨: CRISPR-Cas systems are adaptive immune systems in bacteria and archaea to defend against mobile genetic elements (MGEs) and have been repurposed as genome editing tools. Anti-CRISPR (Acr) proteins ...CRISPR-Cas systems are adaptive immune systems in bacteria and archaea to defend against mobile genetic elements (MGEs) and have been repurposed as genome editing tools. Anti-CRISPR (Acr) proteins are produced by MGEs to counteract CRISPR-Cas systems and can be used to regulate genome editing by CRISPR techniques. Here, we report the cryo-EM structures of three type I-F Acr proteins, AcrIF4, AcrIF7 and AcrIF14, bound to the type I-F CRISPR-Cas surveillance complex (the Csy complex) from Pseudomonas aeruginosa. AcrIF4 binds to an unprecedented site on the C-terminal helical bundle of Cas8f subunit, precluding conformational changes required for activation of the Csy complex. AcrIF7 mimics the PAM duplex of target DNA and is bound to the N-terminal DNA vise of Cas8f. Two copies of AcrIF14 bind to the thumb domains of Cas7.4f and Cas7.6f, preventing hybridization between target DNA and the crRNA. Our results reveal structural detail of three AcrIF proteins, each binding to a different site on the Csy complex for inhibiting degradation of MGEs. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 529.2 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 431.5 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 819.5 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 841.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 74.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 119.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-CRISPR-associated ... , 2種, 2分子 CA
#1: タンパク質 | 分子量: 21427.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: Q02MM2, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 49194.168 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-タンパク質 , 3種, 8分子 BEDFGHIJ
#2: タンパク質 | 分子量: 36244.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: csy2, ALP65_00953, EQH76_13810, FCG96_17775, PACL_0128 発現宿主: ![]() ![]() | ||
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#3: タンパク質 | 分子量: 37579.273 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: EQH76_13805, F7O93_18150, NCTC13437_01527, NCTC13619_03982 発現宿主: ![]() ![]() #6: タンパク質 | | 分子量: 9051.780 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 M
#5: RNA鎖 | 分子量: 19538.586 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: CRISPR-Cas complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 54 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.18.2_3874: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 502177 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 3.4 Å | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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