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- PDB-7jm7: Structure of human CLC-7/OSTM1 complex -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7jm7
タイトルStructure of human CLC-7/OSTM1 complex
要素
  • H(+)/Cl(-) exchange transporter 7
  • Osteopetrosis-associated transmembrane protein 1
キーワードMEMBRANE PROTEIN / Lysosomal / chloride-proton antiporter / chloride transport / ion transport / proton transport / complex / glycosylated
機能・相同性
機能・相同性情報


transepithelial chloride transport / voltage-gated chloride channel activity / antiporter activity / chloride transmembrane transporter activity / chloride channel activity / chloride channel complex / osteoclast differentiation / Stimuli-sensing channels / lysosomal membrane / intracellular membrane-bounded organelle ...transepithelial chloride transport / voltage-gated chloride channel activity / antiporter activity / chloride transmembrane transporter activity / chloride channel activity / chloride channel complex / osteoclast differentiation / Stimuli-sensing channels / lysosomal membrane / intracellular membrane-bounded organelle / ATP binding / membrane / cytosol
類似検索 - 分子機能
Osteopetrosis-associated transmembrane protein 1 precursor / Osteopetrosis-associated transmembrane protein 1 precursor / Chloride channel ClC-7 / Chloride channel, voltage gated / Chloride channel, core / Voltage gated chloride channel / CBS domain superfamily / Domain in cystathionine beta-synthase and other proteins. / CBS domain / CBS domain / CBS domain profile.
類似検索 - ドメイン・相同性
Chem-0J1 / ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / H(+)/Cl(-) exchange transporter 7 / Osteopetrosis-associated transmembrane protein 1
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.82 Å
データ登録者Schrecker, M. / Hite, R.
資金援助 米国, 2件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM103310 米国
National Institutes of Health/National Cancer Institute (NIH/NCI)P30 CA008748 米国
引用ジャーナル: Elife / 年: 2020
タイトル: Cryo-EM structure of the lysosomal chloride-proton exchanger CLC-7 in complex with OSTM1.
著者: Marina Schrecker / Julia Korobenko / Richard K Hite /
要旨: The chloride-proton exchanger CLC-7 plays critical roles in lysosomal homeostasis and bone regeneration and its mutation can lead to osteopetrosis, lysosomal storage disease and neurological ...The chloride-proton exchanger CLC-7 plays critical roles in lysosomal homeostasis and bone regeneration and its mutation can lead to osteopetrosis, lysosomal storage disease and neurological disorders. In lysosomes and the ruffled border of osteoclasts, CLC-7 requires a β-subunit, OSTM1, for stability and activity. Here, we present electron cryomicroscopy structures of CLC-7 in occluded states by itself and in complex with OSTM1, determined at resolutions up to 2.8 Å. In the complex, the luminal surface of CLC-7 is entirely covered by a dimer of the heavily glycosylated and disulfide-bonded OSTM1, which serves to protect CLC-7 from the degradative environment of the lysosomal lumen. OSTM1 binding does not induce large-scale rearrangements of CLC-7, but does have minor effects on the conformation of the ion-conduction pathway, potentially contributing to its regulatory role. These studies provide insights into the role of OSTM1 and serve as a foundation for understanding the mechanisms of CLC-7 regulation.
履歴
登録2020年7月31日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02020年9月2日Provider: repository / タイプ: Initial release

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-22389
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
B: Osteopetrosis-associated transmembrane protein 1
A: H(+)/Cl(-) exchange transporter 7
D: Osteopetrosis-associated transmembrane protein 1
C: H(+)/Cl(-) exchange transporter 7
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)260,08330
ポリマ－252,1294
非ポリマー7,95426
水64936
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: microscopy
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
非結晶学的対称性 (NCS)NCSドメイン:
IDEns-ID詳細
d_1ens_1chain "A"
d_2ens_1chain "C"
d_1ens_2chain "D"
d_2ens_2chain "B"

NCSアンサンブル:
ID
ens_1
ens_2

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要素

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タンパク質 , 2種, 4分子 BDAC

#1: タンパク質 Osteopetrosis-associated transmembrane protein 1 / Chloride channel 7 beta subunit


分子量: 37290.570 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: OSTM1, GL, HSPC019, UNQ6098/PRO21201 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q86WC4
#2: タンパク質 H(+)/Cl(-) exchange transporter 7 / Chloride channel 7 alpha subunit / Chloride channel protein 7 / ClC-7


分子量: 88773.875 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CLCN7 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P51798

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糖 , 3種, 14分子

#3: 多糖 alpha-D-mannopyranose-(1-3)-[alpha-D-mannopyranose-(1-6)]beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2- ...alpha-D-mannopyranose-(1-3)-[alpha-D-mannopyranose-(1-6)]beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose


タイプ: oligosaccharide / 分子量: 910.823 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
記述子タイププログラム
DManpa1-3[DManpa1-6]DManpb1-4DGlcpNAcb1-4DGlcpNAcb1-ROHGlycam Condensed SequenceGMML 1.0
WURCS=2.0/3,5,4/[a2122h-1b_1-5_2*NCC/3=O][a1122h-1b_1-5][a1122h-1a_1-5]/1-1-2-3-3/a4-b1_b4-c1_c3-d1_c6-e1WURCSPDB2Glycan 1.1.0
[][D-1-deoxy-GlcpNAc]{[(4+1)][b-D-GlcpNAc]{[(4+1)][b-D-Manp]{[(3+1)][a-D-Manp]{}[(6+1)][a-D-Manp]{}}}}LINUCSPDB-CARE
#4: 多糖
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose


タイプ: oligosaccharide / 分子量: 424.401 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現
記述子タイププログラム
DGlcpNAcb1-4DGlcpNAcb1-ROHGlycam Condensed SequenceGMML 1.0
WURCS=2.0/1,2,1/[a2122h-1b_1-5_2*NCC/3=O]/1-1/a4-b1WURCSPDB2Glycan 1.1.0
[][D-1-deoxy-GlcpNAc]{[(4+1)][b-D-GlcpNAc]{}}LINUCSPDB-CARE
#5: 糖
ChemComp-NAG / 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / N-acetyl-beta-D-glucosamine / 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucose / 2-acetamido-2-deoxy-D-glucose / 2-acetamido-2-deoxy-glucose / N-ACETYL-D-GLUCOSAMINE / N-アセチル-β-D-グルコサミン


タイプ: D-saccharide, beta linking / 分子量: 221.208 Da / 分子数: 8 / 由来タイプ: 合成 / 式: C8H15NO6 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
識別子タイププログラム
DGlcpNAcbCONDENSED IUPAC CARBOHYDRATE SYMBOLGMML 1.0
N-acetyl-b-D-glucopyranosamineCOMMON NAMEGMML 1.0
b-D-GlcpNAcIUPAC CARBOHYDRATE SYMBOLPDB-CARE 1.0
GlcNAcSNFG CARBOHYDRATE SYMBOLGMML 1.0

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非ポリマー , 5種, 48分子

#6: 化合物 ChemComp-ATP / ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP


分子量: 507.181 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H16N5O13P3 / コメント: ATP, エネルギー貯蔵分子*YM
#7: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
#8: 化合物
ChemComp-CL / CHLORIDE ION / クロリド


分子量: 35.453 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 合成 / 式: Cl
#9: 化合物 ChemComp-0J1 / (2R)-3-{[(R)-hydroxy{[(1S,2R,3S,4S,5R,6R)-2,3,4,6-tetrahydroxy-5-(phosphonooxy)cyclohexyl]oxy}phosphoryl]oxy}propane-1,2-diyl dinonanoate


分子量: 694.640 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: C27H52O16P2 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#10: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 36 / 由来タイプ: 天然 / 式: H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Human CLC-7/OSTM1 complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Homo (哺乳類)
由来(組換発現)生物種: Homo sapiens (ヒト)
緩衝液pH: 8
緩衝液成分
ID濃度式Buffer-ID
1150 mMKCL1
250 mMTris1
32 mMDTT1
40.1 %LMNG1
51 mMATP1
試料濃度: 2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: OTHER / 倍率（公称値）: 22500 X / 最大 デフォーカス（公称値）: -2700 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: -1200 nm / Cs: 2.7 mm
撮影平均露光時間: 8 sec. / 電子線照射量: 44 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
phenix.real_space_refine1.18_3861精密化
PHENIX1.18_3861精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2SerialEM画像取得
4CTFFINDCTF補正
9PHENIXモデル精密化
11cryoSPARCV2.15.0最終オイラー角割当
12cryoSPARCV2.15.0分類
13cryoSPARC３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C2 (2回回転対称)
3次元再構成解像度: 2.82 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 327619 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: OTHER / 空間: REAL
精密化交差検証法: NONE
立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
原子変位パラメータBiso mean: 48.22 Å2
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.003914810
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.711220124
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.11792412
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.00462474
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d20.03075360

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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