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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7epp | ||||||
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タイトル | Recombinant Alfalfa Mosaic virus coat protein virus-like particle (rAMV-CP VLP) | ||||||
![]() | Capsid protein | ||||||
![]() | VIRUS LIKE PARTICLE / alfalfa mosaic virus / virus-like particle | ||||||
機能・相同性 | Coat protein, Ilarvirus / Ilarvirus coat protein / T=3 icosahedral viral capsid / translational initiation / viral nucleocapsid / RNA binding / Capsid protein![]() | ||||||
生物種 | Alfalfa mosaic virus | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.4 Å | ||||||
![]() | Jeong, H. / Lee, S. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Characterization of alfalfa mosaic virus capsid protein using Cryo-EM. 著者: Hyeongseop Jeong / Youngmin Park / Sooji Song / Kyungmin Min / Jae-Sung Woo / Young-Ho Lee / Eun-Ju Sohn / Sangmin Lee / ![]() 要旨: VLPs are virus-like particles that comprise viral capsid proteins that can self-assemble and mimic the shape and size of real viral particles; however, because they do not contain genetic material ...VLPs are virus-like particles that comprise viral capsid proteins that can self-assemble and mimic the shape and size of real viral particles; however, because they do not contain genetic material they cannot infect host cells. VLPs have great potential as safe drug/vehicle candidates; therefore, they are gaining popularity in the field of preventive medicine and therapeutics. Indeed, extensive studies are underway to examine their role as carriers for immunization and as vehicles for delivery of therapeutic agents. Here, we examined the possibility of developing VLP-utilizing technology based on an efficient VLP production process and high-resolution structural analysis. Nicotiana benthamiana was used as an expression platform to produce the coat protein of the alfalfa mosaic virus (AMV-CP). About 250 mg/kg of rAMV-CP was produced from Nicotiana benthamiana leaves. Structural analysis revealed that the oligomeric status of rAMV-CP changed according to the composition and pH of the buffer. Size exclusion chromatography and electron microscopy analysis confirmed the optimal conditions for rAMV-CP VLP formation, and a 2.4 Å resolution structure was confirmed by cryo-EM analysis. Based on the efficient protein production, VLP manufacturing technology, and high-resolution structure presented herein, we suggest that rAMV-CP VLP is a useful platform for development of various new drugs. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 44.9 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 29.9 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 | ![]()
| x 60
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3 | ![]()
| x 5
4 | ![]()
| x 6
5 | ![]()
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対称性 | 点対称性: (シェーンフリース記号: I (正20面体型対称)) |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 28373.334 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: ORF3b / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#2: 水 | ChemComp-HOH / |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Alfalfa mosaic virus / タイプ: VIRUS / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
ウイルスについての詳細 | 中空か: YES / エンベロープを持つか: NO / 単離: OTHER / タイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE |
緩衝液 | pH: 7 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
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解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成 | 解像度: 2.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 279755 / 対称性のタイプ: POINT |