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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7322 | |||||||||
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タイトル | Mycobacterium tuberculosis RNAP Holo/RbpA in relaxed state | |||||||||
マップデータ | primary map | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 bacterial-type RNA polymerase holo enzyme binding / response to water / Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / peptidoglycan-based cell wall / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity ...bacterial-type RNA polymerase holo enzyme binding / response to water / Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / peptidoglycan-based cell wall / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / nucleic acid binding / protein dimerization activity / response to antibiotic / DNA-templated transcription / positive regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycobacterium tuberculosis (結核菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.15 Å | |||||||||
データ登録者 | Darst SA / Campbell EA / Boyaci Selcuk H / Chen J / Lilic M | |||||||||
引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2018 タイトル: Fidaxomicin jams RNA polymerase motions needed for initiation via RbpA contacts. 著者: Hande Boyaci / James Chen / Mirjana Lilic / Margaret Palka / Rachel Anne Mooney / Robert Landick / Seth A Darst / Elizabeth A Campbell / 要旨: Fidaxomicin (Fdx) is an antimicrobial RNA polymerase (RNAP) inhibitor highly effective against RNAP in vitro, but clinical use of Fdx is limited to treating intestinal infections due to poor ...Fidaxomicin (Fdx) is an antimicrobial RNA polymerase (RNAP) inhibitor highly effective against RNAP in vitro, but clinical use of Fdx is limited to treating intestinal infections due to poor absorption. To identify the structural determinants of Fdx binding to RNAP, we determined the 3.4 Å cryo-electron microscopy structure of a complete RNAP holoenzyme in complex with Fdx. We find that the actinobacteria general transcription factor RbpA contacts fidaxomycin, explaining its strong effect on . Additional structures define conformational states of RNAP between the free apo-holoenzyme and the promoter-engaged open complex ready for transcription. The results establish that Fdx acts like a doorstop to jam the enzyme in an open state, preventing the motions necessary to secure promoter DNA in the active site. Our results provide a structural platform to guide development of anti-tuberculosis antimicrobials based on the Fdx binding pocket. #1: ジャーナル: To Be Published タイトル: Structure of Mycobacterium Tuberculosis RNAP Holo Enzyme/RbpA in closed clamp conformation 著者: Darst SA / Campbell EA / Boyaci Selcuk H / Chen J / Lilic M | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7322.map.gz | 37.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7322-v30.xml emd-7322.xml | 18.7 KB 18.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7322.png | 144.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7322 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7322 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7322_validation.pdf.gz | 467.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7322_full_validation.pdf.gz | 467.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7322_validation.xml.gz | 5.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_7322_validation.cif.gz | 5.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7322 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7322 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7322.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 40.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | primary map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.5 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Mycobacterium tuberculosis RNAP Holo with RbpA
全体 | 名称: Mycobacterium tuberculosis RNAP Holo with RbpA |
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要素 |
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-超分子 #1: Mycobacterium tuberculosis RNAP Holo with RbpA
超分子 | 名称: Mycobacterium tuberculosis RNAP Holo with RbpA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6 |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
分子量 | 理論値: 37.745328 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLISQRPTLS EDVLTDNRSQ FVIEPLEPGF GYTLGNSLRR TLLSSIPGAA VTSIRIDGVL HEFTTVPGVK EDVTEIILNL KSLVVSSEE DEPVTMYLRK QGPGEVTAGD IVPPAGVTVH NPGMHIATLN DKGKLEVELV VERGRGYVPA VQNRASGAEI G RIPVDSIY ...文字列: MLISQRPTLS EDVLTDNRSQ FVIEPLEPGF GYTLGNSLRR TLLSSIPGAA VTSIRIDGVL HEFTTVPGVK EDVTEIILNL KSLVVSSEE DEPVTMYLRK QGPGEVTAGD IVPPAGVTVH NPGMHIATLN DKGKLEVELV VERGRGYVPA VQNRASGAEI G RIPVDSIY SPVLKVTYKV DATRVEQRTD FDKLILDVET KNSISPRDAL ASAGKTLVEL FGLARELNVE AEGIEIGPSP AE ADHIASF ALPIDDLDLT VRSYNCLKRE GVHTVGELVA RTESDLLDIR NFGQKSIDEV KIKLHQLGLS LKDSPPSFDP SEV AGYDVA TGTWSTEGAY DEQDYAETEQ L |
-分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
分子量 | 理論値: 130.198922 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MADSRQSKTA ASPSPSRPQS SSNNSVPGAP NRVSFAKLRE PLEVPGLLDV QTDSFEWLIG SPRWRESAAE RGDVNPVGGL EEVLYELSP IEDFSGSMSL SFSDPRFDDV KAPVDECKDK DMTYAAPLFV TAEFINNNTG EIKSQTVFMG DFPMMTEKGT F IINGTERV ...文字列: MADSRQSKTA ASPSPSRPQS SSNNSVPGAP NRVSFAKLRE PLEVPGLLDV QTDSFEWLIG SPRWRESAAE RGDVNPVGGL EEVLYELSP IEDFSGSMSL SFSDPRFDDV KAPVDECKDK DMTYAAPLFV TAEFINNNTG EIKSQTVFMG DFPMMTEKGT F IINGTERV VVSQLVRSPG VYFDETIDKS TDKTLHSVKV IPSRGAWLEF DVDKRDTVGV RIDRKRRQPV TVLLKALGWT SE QIVERFG FSEIMRSTLE KDNTVGTDEA LLDIYRKLRP GEPPTKESAQ TLLENLFFKE KRYDLARVGR YKVNKKLGLH VGE PITSST LTEEDVVATI EYLVRLHEGQ TTMTVPGGVE VPVETDDIDH FGNRRLRTVG ELIQNQIRVG MSRMERVVRE RMTT QDVEA ITPQTLINIR PVVAAIKEFF GTSQLSQFMD QNNPLSGLTH KRRLSALGPG GLSRERAGLE VRDVHPSHYG RMCPI ETPE GPNIGLIGSL SVYARVNPFG FIETPYRKVV DGVVSDEIVY LTADEEDRHV VAQANSPIDA DGRFVEPRVL VRRKAG EVE YVPSSEVDYM DVSPRQMVSV ATAMIPFLEH DDANRALMGA NMQRQAVPLV RSEAPLVGTG MELRAAIDAG DVVVAEE SG VIEEVSADYI TVMHDNGTRR TYRMRKFARS NHGTCANQCP IVDAGDRVEA GQVIADGPCT DDGEMALGKN LLVAIMPW E GHNYEDAIIL SNRLVEEDVL TSIHIEEHEI DARDTKLGAE EITRDIPNIS DEVLADLDER GIVRIGAEVR DGDILVGKV TPKGETELTP EERLLRAIFG EKAREVRDTS LKVPHGESGK VIGIRVFSRE DEDELPAGVN ELVRVYVAQK RKISDGDKLA GRHGNKGVI GKILPVEDMP FLADGTPVDI ILNTHGVPRR MNIGQILETH LGWCAHSGWK VDAAKGVPDW AARLPDELLE A QPNAIVST PVFDGAQEAE LQGLLSCTLP NRDGDVLVDA DGKAMLFDGR SGEPFPYPVT VGYMYIMKLH HLVDDKIHAR ST GPYSMIT QQPLGGKAQF GGQRFGEMEC WAMQAYGAAY TLQELLTIKS DDTVGRVKVY EAIVKGENIP EPGIPESFKV LLK ELQSLC LNVEVLSSDG AAIELREGED EDLERAAANL GINLSRNESA SVEDLALARH GGSGA |
-分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
分子量 | 理論値: 148.074094 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLDVNFFDEL RIGLATAEDI RQWSYGEVKK PETINYRTLK PEKDGLFCEK IFGPTRDWEC YCGKYKRVRF KGIICERCGV EVTRAKVRR ERMGHIELAA PVTHIWYFKG VPSRLGYLLD LAPKDLEKII YFAAYVITSV DEEMRHNELS TLEAEMAVER K AVEDQRDG ...文字列: MLDVNFFDEL RIGLATAEDI RQWSYGEVKK PETINYRTLK PEKDGLFCEK IFGPTRDWEC YCGKYKRVRF KGIICERCGV EVTRAKVRR ERMGHIELAA PVTHIWYFKG VPSRLGYLLD LAPKDLEKII YFAAYVITSV DEEMRHNELS TLEAEMAVER K AVEDQRDG ELEARAQKLE ADLAELEAEG AKADARRKVR DGGEREMRQI RDRAQRELDR LEDIWSTFTK LAPKQLIVDE NL YRELVDR YGEYFTGAMG AESIQKLIEN FDIDAEAESL RDVIRNGKGQ KKLRALKRLK VVAAFQQSGN SPMGMVLDAV PVI PPELRP MVQLDGGRFA TSDLNDLYRR VINRNNRLKR LIDLGAPEII VNNEKRMLQE SVDALFDNGR RGRPVTGPGN RPLK SLSDL LKGKQGRFRQ NLLGKRVDYS GRSVIVVGPQ LKLHQCGLPK LMALELFKPF VMKRLVDLNH AQNIKSAKRM VERQR PQVW DVLEEVIAEH PVLLNRAPTL HRLGIQAFEP MLVEGKAIQL HPLVCEAFNA DFDGDQMAVH LPLSAEAQAE ARILML SSN NILSPASGRP LAMPRLDMVT GLYYLTTEVP GDTGEYQPAS GDHPETGVYS SPAEAIMAAD RGVLSVRAKI KVRLTQL RP PVEIEAELFG HSGWQPGDAW MAETTLGRVM FNELLPLGYP FVNKQMHKKV QAAIINDLAE RYPMIVVAQT VDKLKDAG F YWATRSGVTV SMADVLVPPR KKEILDHYEE RADKVEKQFQ RGALNHDERN EALVEIWKEA TDEVGQALRE HYPDDNPII TIVDSGATGN FTQTRTLAGM KGLVTNPKGE FIPRPVKSSF REGLTVLEYF INTHGARKGL ADTALRTADS GYLTRRLVDV SQDVIVREH DCQTERGIVV ELAERAPDGT LIRDPYIETS AYARTLGTDA VDEAGNVIVE RGQDLGDPEI DALLAAGITQ V KVRSVLTC ATSTGVCATC YGRSMATGKL VDIGEAVGIV AAQSIGEPGT QLTMRTFHQG GVGEDITGGL PRVQELFEAR VP RGKAPIA DVTGRVRLED GERFYKITIV PDDGGEEVVY DKISKRQRLR VFKHEDGSER VLSDGDHVEV GQQLMEGSAD PHE VLRVQG PREVQIHLVR EVQEVYRAQG VSIHDKHIEV IVRQMLRRVT IIDSGSTEFL PGSLIDRAEF EAENRRVVAE GGEP AAGRP VLMGITKASL ATDSWLSAAS FQETTRVLTD AAINCRSDKL NGLKENVIIG KLIPAGTGIN RYRNIAVQPT EEARA AAYT IPSYEDQYYS PDFGAATGAA VPLDDYGYSD YRHHHHHHHH |
-分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit omega / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
分子量 | 理論値: 11.776996 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: GSISQSDASL AAVPAVDQFD PSSGASGGYD TPLGITNPPI DELLDRVSSK YALVIYAAKR ARQINDYYNQ LGEGILEYVG PLVEPGLQE KPLSIALREI HADLLEHTEG E |
-分子 #5: RNA polymerase sigma factor SigA
分子 | 名称: RNA polymerase sigma factor SigA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
分子量 | 理論値: 58.169477 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: GPHMAATKAS TATDEPVKRT ATKSPAASAS GAKTGAKRTA AKSASGSPPA KRATKPAARS VKPASAPQDT TTSTIPKRKT RAAAKSAAA KAPSARGHAT KPRAPKDAQH EAATDPEDAL DSVEELDAEP DLDVEPGEDL DLDAADLNLD DLEDDVAPDA D DDLDSGDD ...文字列: GPHMAATKAS TATDEPVKRT ATKSPAASAS GAKTGAKRTA AKSASGSPPA KRATKPAARS VKPASAPQDT TTSTIPKRKT RAAAKSAAA KAPSARGHAT KPRAPKDAQH EAATDPEDAL DSVEELDAEP DLDVEPGEDL DLDAADLNLD DLEDDVAPDA D DDLDSGDD EDHEDLEAEA AVAPGQTADD DEEIAEPTEK DKASGDFVWD EDESEALRQA RKDAELTASA DSVRAYLKQI GK VALLNAE EEVELAKRIE AGLYATQLMT ELSERGEKLP AAQRRDMMWI CRDGDRAKNH LLEANLRLVV SLAKRYTGRG MAF LDLIQE GNLGLIRAVE KFDYTKGYKF STYATWWIRQ AITRAMADQA RTIRIPVHMV EVINKLGRIQ RELLQDLGRE PTPE ELAKE MDITPEKVLE IQQYAREPIS LDQTIGDEGD SQLGDFIEDS EAVVAVDAVS FTLLQDQLQS VLDTLSEREA GVVRL RFGL TDGQPRTLDE IGQVYGVTRE RIRQIESKTM SKLRHPSRSQ VLRDYLD |
-分子 #6: RNA polymerase-binding protein RbpA
分子 | 名称: RNA polymerase-binding protein RbpA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
分子量 | 理論値: 12.993695 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MADRVLRGSR LGAVSYETDR NHDLAPRQIA RYRTDNGEEF EVPFADDAEI PGTWLCRNGM EGTLIEGDLP EPKKVKPPRT HWDMLLERR SIEELEELLK ERLELIRSRR RG |
-分子 #7: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 2 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-分子 #8: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 1 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 6.7 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.15 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 171547 |
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初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |