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- PDB-6po2: In situ structure of BTV RNA-dependent RNA polymerase in BTV core -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 6po2
タイトルIn situ structure of BTV RNA-dependent RNA polymerase in BTV core
要素
  • Inner core structural protein VP3
  • RNA-directed RNA polymerase
キーワードVIRAL PROTEIN / TRANSFERASE / RNA dependent RNA polymerase
機能・相同性
機能・相同性情報


viral genome replication / RNA-directed RNA polymerase / RNA-dependent RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / nucleotide binding / structural molecule activity / RNA binding
類似検索 - 分子機能
RNA-dependent RNA polymerase, orbiviral / Orbivirus RNA-dependent RNA polymerase (VP1) / Inner layer core protein VP3, Orbivirus / Orbivirus VP3 (T2) protein / Inner layer core protein VP3, Reovirus / RNA-directed RNA polymerase, reovirus / RdRp of Reoviridae dsRNA viruses catalytic domain profile. / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Core protein VP3 / RNA-directed RNA polymerase
類似検索 - 構成要素
生物種Bluetongue virus 1 (ウイルス)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å
データ登録者He, Y. / Shivakoti, S. / Ding, K. / Cui, Y. / Roy, P. / Zhou, Z.H.
資金援助 米国, 英国, 7件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)AI094386 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)AI045000 米国
Wellcome Trust100218 英国
National Institutes of Health/Office of the Director1S10OD018111 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)1U24GM116792 米国
National Science Foundation (NSF, United States)DBI-1338135 米国
National Science Foundation (NSF, United States)DMR-1548924 米国
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2019
タイトル: In situ structures of RNA-dependent RNA polymerase inside bluetongue virus before and after uncoating.
著者: Yao He / Sakar Shivakoti / Ke Ding / Yanxiang Cui / Polly Roy / Z Hong Zhou /
要旨: Bluetongue virus (BTV), a major threat to livestock, is a multilayered, nonturreted member of the , a family of segmented dsRNA viruses characterized by endogenous RNA transcription through an RNA- ...Bluetongue virus (BTV), a major threat to livestock, is a multilayered, nonturreted member of the , a family of segmented dsRNA viruses characterized by endogenous RNA transcription through an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp). To date, the structure of BTV RdRp has been unknown, limiting our mechanistic understanding of BTV transcription and hindering rational drug design effort targeting this essential enzyme. Here, we report the in situ structures of BTV RdRp VP1 in both the triple-layered virion and double-layered core, as determined by cryo-electron microscopy (cryoEM) and subparticle reconstruction. BTV RdRp has 2 unique motifs not found in other viral RdRps: a fingernail, attached to the conserved fingers subdomain, and a bundle of 3 helices: 1 from the palm subdomain and 2 from the N-terminal domain. BTV RdRp VP1 is anchored to the inner surface of the capsid shell via 5 asymmetrically arranged N termini of the inner capsid shell protein VP3A around the 5-fold axis. The structural changes of RdRp VP1 and associated capsid shell proteins between BTV virions and cores suggest that the detachment of the outer capsid proteins VP2 and VP5 during viral entry induces both global movements of the inner capsid shell and local conformational changes of the N-terminal latch helix (residues 34 to 51) of 1 inner capsid shell protein VP3A, priming RdRp VP1 within the capsid for transcription. Understanding this mechanism in BTV also provides general insights into RdRp activation and regulation during viral entry of other multilayered, nonturreted dsRNA viruses.
履歴
登録2019年7月3日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02019年8月7日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12019年8月28日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation_author.identifier_ORCID
改定 1.22019年11月27日Group: Author supporting evidence / カテゴリ: pdbx_audit_support / Item: _pdbx_audit_support.funding_organization
改定 1.32024年3月20日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-20407
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-20407
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: RNA-directed RNA polymerase
B: Inner core structural protein VP3
C: Inner core structural protein VP3
D: Inner core structural protein VP3
E: Inner core structural protein VP3
F: Inner core structural protein VP3
G: Inner core structural protein VP3
H: Inner core structural protein VP3
I: Inner core structural protein VP3
J: Inner core structural protein VP3
K: Inner core structural protein VP3


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)1,184,03111
ポリマ－1,184,03111
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: microscopy
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area80590 Å2
ΔGint-347 kcal/mol
Surface area398650 Å2

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要素

#1: タンパク質 RNA-directed RNA polymerase


分子量: 149926.281 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bluetongue virus 1 (ウイルス) / 参照: UniProt: W0G557, RNA-directed RNA polymerase
#2: タンパク質
Inner core structural protein VP3 / Inner capsid protein VP3


分子量: 103410.508 Da / 分子数: 10 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Bluetongue virus 1 (ウイルス) / 遺伝子: VP3 / 発現宿主: Bluetongue virus 1 (ウイルス) / 参照: UniProt: Q1AE73

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Bluetongue virus 1 / タイプ: VIRUS / Entity ID: all / 由来: NATURAL
由来(天然)生物種: Bluetongue virus 1 (ウイルス)
ウイルスについての詳細中空か: NO / エンベロープを持つか: NO / 単離: SPECIES / タイプ: VIRION
緩衝液pH: 8.8
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持詳細: unspecified
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm
撮影電子線照射量: 32 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.14_3260: / 分類: 精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 150346 / 対称性のタイプ: POINT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlc1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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