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- PDB-6oj5: In situ structure of rotavirus VP1 RNA-dependent RNA polymerase (... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 6oj5
タイトルIn situ structure of rotavirus VP1 RNA-dependent RNA polymerase (TLP_RNA)
要素
  • Inner capsid protein VP2
  • RNA-directed RNA polymerase
キーワードVIRAL PROTEIN/TRANSFERASE / Rotavirus / RNA-dependent RNA polymerase / VP1 / VP2 / VIRAL PROTEIN-TRANSFERASE complex
機能・相同性
機能・相同性情報


T=2 icosahedral viral capsid / viral inner capsid / viral genome replication / virion component / viral nucleocapsid / RNA-directed RNA polymerase / RNA-dependent RNA polymerase activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription / RNA binding
類似検索 - 分子機能
Rotavirus VP1 RNA-directed RNA polymerase, C-terminal / Viral RNA-directed RNA polymerase, 4-helical domain / Rotavirus VP1 C-terminal domain / RNA-directed RNA polymerase, luteovirus / Rotavirus VP2 / Viral RNA-directed RNA-polymerase / Rotavirus VP2 protein / RNA-directed RNA polymerase, reovirus / RdRp of Reoviridae dsRNA viruses catalytic domain profile. / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA-directed RNA polymerase / Inner capsid protein VP2
類似検索 - 構成要素
生物種Rotavirus A (ロタウイルス A)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.2 Å
データ登録者Jenni, S. / Salgado, E.N. / Herrmann, T. / Li, Z. / Grant, T. / Grigorieff, N. / Trapani, S. / Estrozi, L.F. / Harrison, S.C.
資金援助 米国, 2件
組織認可番号
National Institutes of Health/National Human Genome Research Institute (NIH/NHGRI)CA-13202 米国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: J Mol Biol / : 2019
タイトル: In situ Structure of Rotavirus VP1 RNA-Dependent RNA Polymerase.
著者: Simon Jenni / Eric N Salgado / Tobias Herrmann / Zongli Li / Timothy Grant / Nikolaus Grigorieff / Stefano Trapani / Leandro F Estrozi / Stephen C Harrison /
要旨: Rotaviruses, like other non-enveloped, double-strand RNA viruses, package an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) with each duplex of their segmented genomes. Rotavirus cell entry results in loss of ...Rotaviruses, like other non-enveloped, double-strand RNA viruses, package an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) with each duplex of their segmented genomes. Rotavirus cell entry results in loss of an outer protein layer and delivery into the cytosol of an intact, inner capsid particle (the "double-layer particle," or DLP). The RdRp, designated VP1, is active inside the DLP; each VP1 achieves many rounds of mRNA transcription from its associated genome segment. Previous work has shown that one VP1 molecule lies close to each 5-fold axis of the icosahedrally symmetric DLP, just beneath the inner surface of its protein shell, embedded in tightly packed RNA. We have determined a high-resolution structure for the rotavirus VP1 RdRp in situ, by local reconstruction of density around individual 5-fold positions. We have analyzed intact virions ("triple-layer particles"), non-transcribing DLPs and transcribing DLPs. Outer layer dissociation enables the DLP to synthesize RNA, in vitro as well as in vivo, but appears not to induce any detectable structural change in the RdRp. Addition of NTPs, Mg, and S-adenosylmethionine, which allows active transcription, results in conformational rearrangements, in both VP1 and the DLP capsid shell protein, that allow a transcript to exit the polymerase and the particle. The position of VP1 (among the five symmetrically related alternatives) at one vertex does not correlate with its position at other vertices. This stochastic distribution of site occupancies limits long-range order in the 11-segment, double-strand RNA genome.
履歴
登録2019年4月10日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02019年4月24日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12019年7月10日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_ASTM / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID
改定 1.22019年8月28日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last
改定 1.32019年11月20日Group: Author supporting evidence / カテゴリ: pdbx_audit_support / Item: _pdbx_audit_support.funding_organization
改定 1.42019年11月27日Group: Data collection / カテゴリ: em_software / Item: _em_software.name
改定 1.52024年3月20日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-20088
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Inner capsid protein VP2
B: Inner capsid protein VP2
C: Inner capsid protein VP2
D: Inner capsid protein VP2
E: Inner capsid protein VP2
F: Inner capsid protein VP2
G: Inner capsid protein VP2
H: Inner capsid protein VP2
I: Inner capsid protein VP2
J: Inner capsid protein VP2
P: RNA-directed RNA polymerase


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)1,159,53611
ポリマ-1,159,53611
非ポリマー00
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551
Buried area69880 Å2
ΔGint-124 kcal/mol
Surface area386710 Å2

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要素

#1: タンパク質
Inner capsid protein VP2 / VP2A


分子量: 103425.992 Da / 分子数: 10 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
細胞株: MA104 / : RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3] / 参照: UniProt: B3F2X3
#2: タンパク質 RNA-directed RNA polymerase / Protein VP1


分子量: 125276.305 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
細胞株: MA104 / : RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3] / 参照: UniProt: B3F2X2, RNA-directed RNA polymerase

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Rhesus rotavirus / タイプ: VIRUS / 詳細: TLP_RNA / Entity ID: all / 由来: NATURAL
由来(天然)生物種: Rotavirus A (strain RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]) (ウイルス)
: RVA/Monkey/United States/RRV/1975/G3P5B[3]
ウイルスについての詳細中空か: NO / エンベロープを持つか: NO / 単離: SEROTYPE / タイプ: VIRION
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持詳細: unspecified
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI POLARA 300
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD
撮影電子線照射量: 64 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: cisTEM / バージョン: 1.01 / カテゴリ: 3次元再構成 / 詳細: FrealignX
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 5.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 82008 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: AB INITIO MODEL

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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