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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6bbj | ||||||||||||
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タイトル | Xenopus Tropicalis TRPV4 | ||||||||||||
要素 | Transient receptor potential cation channel, subfamily V, member 4 | ||||||||||||
キーワード | METAL TRANSPORT / Ion Channel / TRP channel | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 TRP channels / osmosensory signaling pathway / calcium ion import across plasma membrane / plasma membrane => GO:0005886 / actin filament organization / calcium channel activity / cilium / monoatomic ion channel activity 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Xenopus tropicalis (ネッタイツメガエル) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Deng, Z. / Hite, R.K. / Yuan, P. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2018 タイトル: Cryo-EM and X-ray structures of TRPV4 reveal insight into ion permeation and gating mechanisms. 著者: Zengqin Deng / Navid Paknejad / Grigory Maksaev / Monica Sala-Rabanal / Colin G Nichols / Richard K Hite / Peng Yuan / 要旨: The transient receptor potential (TRP) channel TRPV4 participates in multiple biological processes, and numerous TRPV4 mutations underlie several distinct and devastating diseases. Here we present ...The transient receptor potential (TRP) channel TRPV4 participates in multiple biological processes, and numerous TRPV4 mutations underlie several distinct and devastating diseases. Here we present the cryo-EM structure of Xenopus tropicalis TRPV4 at 3.8-Å resolution. The ion-conduction pore contains an intracellular gate formed by the inner helices, but lacks any extracellular gate in the selectivity filter, as observed in other TRPV channels. Anomalous X-ray diffraction analyses identify a single ion-binding site in the selectivity filter, thus explaining TRPV4 nonselectivity. Structural comparisons with other TRP channels and distantly related voltage-gated cation channels reveal an unprecedented, unique packing interface between the voltage-sensor-like domain and the pore domain, suggesting distinct gating mechanisms. Moreover, our structure begins to provide mechanistic insights to the large set of pathogenic mutations, offering potential opportunities for drug development. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6bbj.cif.gz | 439.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6bbj.ent.gz | 350.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6bbj.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bb/6bbj ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bb/6bbj | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 99087.852 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Xenopus tropicalis (ネッタイツメガエル) 遺伝子: trpv4 / 発現宿主: Pichia (菌類) / 参照: UniProt: F7BWY7 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: TRPV4 / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / 詳細: Xenopis tropicalis TRPV4 purified in DDM and lipids / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: .30 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Xenopus tropicalis (ネッタイツメガエル) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Pichia (菌類) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 4.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: TRPV4 in DDM and lipids | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 298 K / 詳細: 2 second blot time |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 22500 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Calibrated defocus min: 800 nm / 最大 デフォーカス(補正後): 2500 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 4 sec. / 電子線照射量: 27 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1604 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 7420 / 縦: 7676 / 動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 2-20 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.11.1_2575: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 85253 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C4 (4回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 72684 詳細: Refined using Frealign with reference map low-pass filtered to 6 Angstroms クラス平均像の数: 4 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL / Target criteria: FSC | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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