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- PDB-5vxy: Cryo-EM reconstruction of PAK pilus from Pseudomonas aeruginosa -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 5vxy
タイトルCryo-EM reconstruction of PAK pilus from Pseudomonas aeruginosa
要素Fimbrial protein
キーワードPROTEIN FIBRIL / Melted helix / type IV pili
機能・相同性
機能・相同性情報


pilus / cell adhesion / membrane
類似検索 - 分子機能
Fimbrial protein pilin / Pilin (bacterial filament) / : / Prokaryotic N-terminal methylation site. / Prokaryotic N-terminal methylation motif / Prokaryotic N-terminal methylation site / Pilin-like
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Pseudomonas aeruginosa PAK (緑膿菌)
手法電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8 Å
データ登録者Wang, F. / Osinksi, T. / Orlova, A. / Altindal, T. / Craig, L. / Egelman, E.H.
資金援助 米国, カナダ, フランス, 4件
組織認可番号
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)AI114902 米国
Canadian Institutes of Health Research (CIHR)MOP125959 カナダ
French National Research AgencyANR14CE14001002 フランス
Fondation pour la Recherche Medicale フランス
引用ジャーナル: Structure / : 2017
タイトル: Cryoelectron Microscopy Reconstructions of the Pseudomonas aeruginosa and Neisseria gonorrhoeae Type IV Pili at Sub-nanometer Resolution.
著者: Fengbin Wang / Mathieu Coureuil / Tomasz Osinski / Albina Orlova / Tuba Altindal / Gaël Gesbert / Xavier Nassif / Edward H Egelman / Lisa Craig /
要旨: We report here cryoelectron microscopy reconstructions of type IV pili (T4P) from two important human pathogens, Pseudomonas aeruginosa and Neisseria gonorrhoeae, at ∼ 8 and 5 Å resolution, ...We report here cryoelectron microscopy reconstructions of type IV pili (T4P) from two important human pathogens, Pseudomonas aeruginosa and Neisseria gonorrhoeae, at ∼ 8 and 5 Å resolution, respectively. The two structures reveal distinct arrangements of the pilin globular domains on the pilus surfaces, which impart different helical parameters, but similar packing of the conserved N-terminal α helices, α1, in the filament core. In contrast to the continuous α helix seen in the X-ray crystal structures of the P. aeruginosa and N. gonorrhoeae pilin subunits, α1 in the pilus filaments has a melted segment located between conserved helix-breaking residues Gly14 and Pro22, as seen for the Neisseria meningitidis T4P. Using mutagenesis we show that Pro22 is critical for pilus assembly, as are Thr2 and Glu5, which are positioned to interact in the hydrophobic filament core. These structures provide a framework for understanding T4P assembly, function, and biophysical properties.
履歴
登録2017年5月24日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02017年7月12日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12017年9月13日Group: Author supporting evidence / Data collection / カテゴリ: em_software / pdbx_audit_support
Item: _em_software.name / _pdbx_audit_support.funding_organization
改定 1.22017年9月20日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_ASTM / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year
改定 1.32017年10月4日Group: Author supporting evidence / カテゴリ: pdbx_audit_support / Item: _pdbx_audit_support.funding_organization
改定 1.42018年7月18日Group: Data collection / カテゴリ: em_software / Item: _em_software.name
改定 1.52019年10月2日Group: Author supporting evidence / Data collection ...Author supporting evidence / Data collection / Derived calculations / Experimental preparation
カテゴリ: em_helical_entity / em_sample_support / pdbx_helical_symmetry
Item: _em_helical_entity.axial_rise_per_subunit
改定 1.62019年12月11日Group: Author supporting evidence / カテゴリ: pdbx_audit_support / Item: _pdbx_audit_support.funding_organization

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-8740
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-8740
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Fimbrial protein
B: Fimbrial protein
C: Fimbrial protein
D: Fimbrial protein
E: Fimbrial protein
F: Fimbrial protein
G: Fimbrial protein
H: Fimbrial protein
I: Fimbrial protein
J: Fimbrial protein
K: Fimbrial protein
L: Fimbrial protein
M: Fimbrial protein
N: Fimbrial protein
O: Fimbrial protein
P: Fimbrial protein
Q: Fimbrial protein
R: Fimbrial protein
S: Fimbrial protein
T: Fimbrial protein
U: Fimbrial protein


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)315,44521
ポリマ-315,44521
非ポリマー00
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: microscopy, helical filament was observed by negative staining and Cryo-EM
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551
Buried area75120 Å2
ΔGint-557 kcal/mol
Surface area99100 Å2
対称性らせん対称: (回転対称性: 1 / Dyad axis: no / N subunits divisor: 1 / Num. of operations: 21 / Rise per n subunits: 10.5 Å / Rotation per n subunits: 87.3 °)
詳細The full assembly is a helical filament. Only a finite portion of the full filament is represented here.

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要素

#1: タンパク質 ...
Fimbrial protein / Type IV pilin / Pilin


分子量: 15021.180 Da / 分子数: 21 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Pseudomonas aeruginosa PAK (緑膿菌) / : PAK/2pfs / 参照: UniProt: P02973

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法

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試料調製

構成要素名称: Pseudomonas aeruginosa Type IV pilin filament / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa PAK (緑膿菌) / : PAK/2pfs
緩衝液pH: 9 / 詳細: 50 mM CHES buffer
試料濃度: 0.1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持詳細: unspecified
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 %

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD
撮影平均露光時間: 2 sec. / 電子線照射量: 20 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
詳細: Images were stored containing seven parts, where each part represented a set of frames corresponding to a dose of ~20 electrons per Angstrom^2. The full dose image stack was used for the ...詳細: Images were stored containing seven parts, where each part represented a set of frames corresponding to a dose of ~20 electrons per Angstrom^2. The full dose image stack was used for the estimation of the CTF as well as for boxing filaments. Only the first two parts were used for the reconstruction (~5 electrons per Angstrom^2)
画像スキャン動画フレーム数/画像: 7

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: dev_2471: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称カテゴリ
1EMAN2粒子像選択
2EPU画像取得
4CTFFIND3CTF補正
7Rosettaモデルフィッティング
8UCSF Chimeraモデルフィッティング
10SPIDER初期オイラー角割当
11SPIDER最終オイラー角割当
13SPIDER3次元再構成
14PHENIXモデル精密化
15Cootモデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
らせん対称回転角度/サブユニット: 87.3 ° / 軸方向距離/サブユニット: 10.5 Å / らせん対称軸の対称性: C1
3次元再構成解像度: 8 Å / 解像度の算出法: OTHER / 粒子像の数: 31231 / 詳細: model-map FSC 0.38 cut-off / 対称性のタイプ: HELICAL
原子モデル構築空間: REAL
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0145234
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d1.35982509
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d6.62717556
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0633717
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0066909

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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