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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4v3p | ||||||
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タイトル | The molecular structure of the left-handed supra-molecular helix of eukaryotic polyribosomes | ||||||
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![]() | RIBOSOME | ||||||
機能・相同性 | ![]() cytoplasmic translational elongation / protein kinase activator activity / translational elongation / ribonucleoprotein complex binding / cytosolic ribosome / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / large ribosomal subunit / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding ...cytoplasmic translational elongation / protein kinase activator activity / translational elongation / ribonucleoprotein complex binding / cytosolic ribosome / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / large ribosomal subunit / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / negative regulation of translation / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / mRNA binding / signal transduction / RNA binding / zinc ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 34 Å | ||||||
![]() | Myasnikov, A.G. / Afonina, Z.A. / Menetret, J.F. / Shirokov, V.A. / Spirin, A.S. / Klaholz, B.P. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: The molecular structure of the left-handed supra-molecular helix of eukaryotic polyribosomes. 著者: Alexander G Myasnikov / Zhanna A Afonina / Jean-François Ménétret / Vladimir A Shirokov / Alexander S Spirin / Bruno P Klaholz / ![]() ![]() 要旨: During protein synthesis, several ribosomes bind to a single messenger RNA (mRNA) forming large macromolecular assemblies called polyribosomes. Here we report the detailed molecular structure of a ...During protein synthesis, several ribosomes bind to a single messenger RNA (mRNA) forming large macromolecular assemblies called polyribosomes. Here we report the detailed molecular structure of a 100 MDa eukaryotic poly-ribosome complex derived from cryo electron tomography, sub-tomogram averaging and pseudo-atomic modelling by crystal structure fitting. The structure allowed the visualization of the three functional parts of the polysome assembly, the central core region that forms a rather compact left-handed supra-molecular helix, and the more open regions that harbour the initiation and termination sites at either ends. The helical region forms a continuous mRNA channel where the mRNA strand bridges neighbouring exit and entry sites of the ribosomes and prevents mRNA looping between ribosomes. This structure provides unprecedented insights into protein- and RNA-mediated inter-ribosome contacts that involve conserved sites through 40S subunits and long protruding RNA expansion segments, suggesting a role in stabilizing the overall polyribosomal assembly. | ||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.6 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 4.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 585.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 911.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 | ![]()
| x 23
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要素
+タンパク質 , 5種, 5分子 SaSBLALMLh
+40S ribosomal protein ... , 21種, 21分子 SASDSESFSISJSKSLSMSOSQSPSSSRSVSYSZSXSCSNST
+40S WHEAT GERM ... , 2種, 2分子 SWS3
+Unknown 40S wheat germ ribosome protein ... , 4種, 4分子 ScSbSUSG
+Ribosomal protein ... , 12種, 13分子 SHLELPLTLlLoLiLjLtLuLeLCLK
+RNA鎖 , 5種, 5分子 S2S1L1L3L2
+60S ribosomal protein ... , 27種, 27分子 LBLFLHLOLRLQLULVLXLZLYLbLdLfLgLnLrLGLSLWLaLkLJLcLDLmLI
+Unknown 60S wheat germ ribosome protein ... , 5種, 6分子 LqLyLxLzLLLN
+タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 Lp
+60S acidic ribosomal protein ... , 2種, 3分子 LvLwLs
+詳細
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: サブトモグラム平均法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: POLY-RIBOSOME FROM IN VITRO WHEAT GERM SYSTEM / タイプ: RIBOSOME |
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緩衝液 | 名称: 25MM HEPES-KOH, 3MM MG(OAC)2, 85MM KOAC,1.6MM DTT, 0.25MM SPERMIDINE pH: 7.6 詳細: 25MM HEPES-KOH, 3MM MG(OAC)2, 85MM KOAC,1.6MM DTT, 0.25MM SPERMIDINE |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE 詳細: VITRIFICATION 1 --CRYOGEN- ETHANE, HUMIDITY-95, TEMPERATURE- 120,INSTRUMENT- FEI VITROBOT MARK IV, METHOD- 3UL OF SAMPLE APPLIED ON 300 MESH HOLY CARBON QUANTIFOIL GRID. BLOTTING WAS DONE IN ...詳細: VITRIFICATION 1 --CRYOGEN- ETHANE, HUMIDITY-95, TEMPERATURE- 120,INSTRUMENT- FEI VITROBOT MARK IV, METHOD- 3UL OF SAMPLE APPLIED ON 300 MESH HOLY CARBON QUANTIFOIL GRID. BLOTTING WAS DONE IN VITROBOT MARK IV, BLOT TIME 0.5 SEC, BLOT FORCE 5 |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F30 / 日付: 2013年1月1日 |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 39000 X / 倍率(補正後): 41176 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2000 nm / Cs: 2 mm |
試料ホルダ | 温度: 90 K / 傾斜角・最大: 70 ° / 傾斜角・最小: -70 ° |
撮影 | 電子線照射量: 30 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON I (4k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア |
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3次元再構成 | 手法: MAXIMUM LIKELIHOOD / 解像度: 34 Å / 粒子像の数: 106 / ピクセルサイズ(実測値): 6.8 Å / 詳細: SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA / 対称性のタイプ: HELICAL | |||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / 詳細: METHOD--RIGID BODY REFINEMENT PROTOCOL--X-RAY | |||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 3IZ6![]() 3iz6 Accession code: 3IZ6 / Source name: PDB / タイプ: experimental model | |||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 34 Å |