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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the ZBTB5 BTB domain filament | |||||||||
![]() | primary map | |||||||||
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![]() | BTB domain / transcription factor / ZBTB protein / TRANSCRIPTION | |||||||||
機能・相同性 | ![]() RNA polymerase II transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / DNA-binding transcription repressor activity, RNA polymerase II-specific / DNA-binding transcription factor activity, RNA polymerase II-specific / chromatin / regulation of transcription by RNA polymerase II / negative regulation of transcription by RNA polymerase II / nucleus / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
![]() | Park J / Hunkeler M / Fischer ES | |||||||||
資金援助 | 1件
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![]() | ![]() タイトル: Polymerization of ZBTB transcription factors regulates chromatin occupancy. 著者: Paul M C Park / Jiho Park / Jared Brown / Moritz Hunkeler / Shourya S Roy Burman / Katherine A Donovan / Hojong Yoon / Radosław P Nowak / Mikołaj Słabicki / Benjamin L Ebert / Eric S Fischer / ![]() 要旨: BCL6, an oncogenic transcription factor (TF), forms polymers in the presence of a small-molecule molecular glue that stabilizes a complementary interface between homodimers of BCL6's broad-complex, ...BCL6, an oncogenic transcription factor (TF), forms polymers in the presence of a small-molecule molecular glue that stabilizes a complementary interface between homodimers of BCL6's broad-complex, tramtrack, and bric-à-brac (BTB) domain. The BTB domains of other proteins, including a large class of TFs, have similar architectures and symmetries, raising the possibility that additional BTB proteins self-assemble into higher-order structures. Here, we surveyed 189 human BTB proteins with a cellular fluorescent reporter assay and identified 18 ZBTB TFs that show evidence of polymerization. Through biochemical and cryoelectron microscopy (cryo-EM) studies, we demonstrate that these ZBTB TFs polymerize into filaments. We found that BTB-domain-mediated polymerization of ZBTB TFs enhances chromatin occupancy within regions containing homotypic clusters of TF binding sites, leading to repression of target genes. Our results reveal a role of higher-order structures in regulating ZBTB TFs and suggest an underappreciated role for TF polymerization in modulating gene expression. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 14.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 18.7 KB 18.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 6.4 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 64.6 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.2 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 26.7 MB 26.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9b9rMC ![]() 9b9vC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||
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注釈 | primary map | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.35 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_44389_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_44389_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : ZBTB5 BTB domain filament
全体 | 名称: ZBTB5 BTB domain filament |
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要素 |
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-超分子 #1: ZBTB5 BTB domain filament
超分子 | 名称: ZBTB5 BTB domain filament / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-分子 #1: Zinc finger and BTB domain-containing protein 5
分子 | 名称: Zinc finger and BTB domain-containing protein 5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 18.786326 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MDWSHPQFEK SAVGLNDIFE AQKIEWHEGG GGSGENLYFQ GGGRMDFPGH FEQIFQQLNY QRLHGQLCDC VIVVGNRHFK AHRSVLAAC STHFRALFSV AEGDQTMNMI QLDSEVVTAE AFAALIDMMY TSTLMLGESN VMDVLLAASH LHLNSVVKAC K HYLTTRTL UniProtKB: Zinc finger and BTB domain-containing protein 5 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
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試料調製
濃度 | 1.00 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
詳細: 50 mM HEPES/NaOH pH 7.4, 200 mM NaCl, 1 mM CHAPSO, 1 mM TCEP | |||||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - Film thickness: 12 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.039 kPa 詳細: Grids were glow-discharged for 60 s at 15-20 mA and 39 Pa. | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: LEICA EM GP 詳細: Grids were vitrified using a Leica EM GP plunge freezer operated at 90% humidity and 10 C with 10 s pre-blot, 3 s blot, 3 s post-blot.. | |||||||||||||||
詳細 | Elution fractions from Strep-tag affinity chromatography were dialyzed overnight against 50 mM HEPES/NaOH pH 7.4, 200 mM NaCl, 1 mM TCEP and concentrated by centrifugation. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 10854 / 平均露光時間: 2.1 sec. / 平均電子線量: 50.7 e/Å2 詳細: 2 movies (46 frames) were acquired per hole with 9 holes per stage position. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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詳細 | Real-space refinement without local grid search |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: OTHER / 温度因子: 194 |
得られたモデル | ![]() PDB-9b9r: |