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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-42792 | |||||||||
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タイトル | Acinetobacter baumannii Tse15 Rhs effector | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Rhs-effector / Rhs cargo effector / Type 6 secretion system effector / Acinetobacter baumannii toxin / Type VI secretion system / YD-repeat protein / T6SS. / TOXIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Acinetobacter baumannii AB307-0294 (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.08 Å | |||||||||
データ登録者 | Hayes BK / Venugopal H / McGowan S | |||||||||
資金援助 | オーストラリア, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Structure of a Rhs effector clade domain provides mechanistic insights into type VI secretion system toxin delivery. 著者: Brooke K Hayes / Marina Harper / Hariprasad Venugopal / Jessica M Lewis / Amy Wright / Han-Chung Lee / Joel R Steele / David L Steer / Ralf B Schittenhelm / John D Boyce / Sheena McGowan / 要旨: The type VI secretion system (T6SS) is a molecular machine utilised by many Gram-negative bacteria to deliver antibacterial toxins into adjacent cells. Here we present the structure of Tse15, a T6SS ...The type VI secretion system (T6SS) is a molecular machine utilised by many Gram-negative bacteria to deliver antibacterial toxins into adjacent cells. Here we present the structure of Tse15, a T6SS Rhs effector from the nosocomial pathogen Acinetobacter baumannii. Tse15 forms a triple layered β-cocoon Rhs domain with an N-terminal α-helical clade domain and an unfolded C-terminal toxin domain inside the Rhs cage. Tse15 is cleaved into three domains, through independent auto-cleavage events involving aspartyl protease activity for toxin self-cleavage and a nucleophilic glutamic acid for N-terminal clade cleavage. Proteomic analyses identified that significantly more peptides from the N-terminal clade and toxin domains were secreted than from the Rhs cage, suggesting toxin delivery often occurs without the cage. We propose the clade domain acts as an internal chaperone to mediate toxin tethering to the T6SS machinery. Conservation of the clade domain in other Gram-negative bacteria suggests this may be a common mechanism for delivery. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_42792.map.gz | 21.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-42792-v30.xml emd-42792.xml | 24.5 KB 24.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_42792_fsc.xml | 8.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_42792.png | 47.9 KB | ||
マスクデータ | emd_42792_msk_1.map | 42.9 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-42792.cif.gz | 7.4 KB | ||
その他 | emd_42792_additional_1.map.gz emd_42792_half_map_1.map.gz emd_42792_half_map_2.map.gz | 19.6 MB 39.8 MB 39.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-42792 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-42792 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_42792_validation.pdf.gz | 805 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_42792_full_validation.pdf.gz | 804.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_42792_validation.xml.gz | 15.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_42792_validation.cif.gz | 19.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-42792 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-42792 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8uy4MC 8uxtC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_42792.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 42.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.94 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_42792_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Difference map generated in Chimera after refinement of...
ファイル | emd_42792_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Difference map generated in Chimera after refinement of A-chain. Used to guide modelling of unsequenced toxin in chains B, C, D, E. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_42792_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_42792_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Recombinant Tse15
全体 | 名称: Recombinant Tse15 |
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要素 |
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-超分子 #1: Recombinant Tse15
超分子 | 名称: Recombinant Tse15 / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baumannii AB307-0294 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 183 KDa |
-分子 #1: Tse15
分子 | 名称: Tse15 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baumannii AB307-0294 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 182.818422 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MAWSHPQFEK SAAKENTQQK EIKRQPAVEL AVFNLNSVTD VADLQMIASQ VQLYLQVCGN TTLEQIKSKA NITTVANIFA LTGSVLDLM LYATDKKTGD AAVQRGALLA ANLIGLFSEP NNEAHARMAL RPMFGLMAEC LYRENGKIKE TDIKRLGLHL N AMIAGDLE ...文字列: MAWSHPQFEK SAAKENTQQK EIKRQPAVEL AVFNLNSVTD VADLQMIASQ VQLYLQVCGN TTLEQIKSKA NITTVANIFA LTGSVLDLM LYATDKKTGD AAVQRGALLA ANLIGLFSEP NNEAHARMAL RPMFGLMAEC LYRENGKIKE TDIKRLGLHL N AMIAGDLE NFLKETQAKL SSLLISATTL GVTILQSMAT PATGINAGIT TAAGASAEKR DPKLKFTNWA VPLIDLLGKP SQ ANLTPKI QPNITSRLQQ EATQAIAALS QTLQQQANAG QKYTLAWLLQ ETLKAIQALE NKGNASVPIN QTGEYERHTK GDT LEFVSL QADALNAPPC EGADSQSGKS ISYSIGAERV QHADFYLPKI GFSFIRQYNS QMDEFDQSMV GARWMMPFSN MIQQ NAQGY LFIDSKGRKH QLPVSIIFET YEVPYEGWII KPLKNGELIL DFGGEWRSHF QSFDGGKNYY LVKKMNETSQ EEILL EYLL LDHIAYLKVI NFKLKQAEYE LKFAFNEQVK IIAVFLDDKA EPLARYEYDT QGNLIKAIDQ NGHTRTYEYN QFHQLT RYT DRTGRGQNIR YESTEAKAKA IEEWADDGSF HTKLKWHPRL RQVAVYDAYD VPTYYYFDLD GFTYRTRLAD GRESWYS RD GKKRITRQID FDGRETQQEY NDQDQLVKIV QPNGGIIRFA YNKQGNLVEI KDPEGSIWKR EYDENRNVSK EINPLGHI T QYKYNNDNQL VEVIDAKGGV KKIQYNELGQ MISYTDCSGK SSTWEYDEDG ALTAEQTANN KVVQYFYSTK GRDKGQLQS IIYPDGLKEY FEHDEEGRLL KHTDTKGLVT EYKYNQVGLL EQRIDANRHS VAYQWDKQGR IQKLINQNQA EYLFGYNPYG YLIREQAFD GEEKHYSYNE NGRLFQIRRP NILTQFDYYA DGQIASKSFT HLHTGQKQTE QFDYNLNSQL SRASNEVSQI D LYRNALGQ LVREHQHYKI PELKPLTAVL HYEYDELGNL IKTIRPDGHT LNHLVYGSGH IYAIGLNNQE VVSFQRDDLH RE TTRLLAN GLMQTKQYND VGLLSSQFIQ PEQETQDYLQ YQAHRKYHYD KNYLLSQVED SRLGKLNYQY DPIGRLIAAQ SLH KTESFN FDPAGNLIDS ESVLSPAQIK NNLIKSYKGK HYQYDVQGNV TEIIQAGKNL KLTWDNQNRL IRSDNNGLVT EYGY DVFGR RLYKKTAKEL TLFGWDGDLM IWESFKSAQT NYTKHYIYEP DSFVPLLQAG YKDFIQLIET PDYQEYQTKP YSIYK DPVW NRNLGKERTA LEQFTFYHCD QVGTPQTMTN IRGECVWEIL QDTWGAVSQI KALNQDNPFE QNNLRFQGQY YDRETE LHY NRYRYYEPHS ARYVSKDPIG LEGGMNTSSY VSDPNQWIDP KGLNSFNYGE MFGIPASAQS GLAYQGQRNY ECYAETG EL CKIKVPPLFD YVACSGGGLG IGVGFVKNQW TGEYYISGSK DSLLIPVAKS VAQNKQFSAK DLAGASCVGG NIHNIPSY T KTTMTMGEIT NEFVSGASVT VGGGAYGAVA NVVVPLVSKS SPVKGTWASE LGVGTPGFNV GVSGTVSVDT ILDAVKPSK KHHHHHH UniProtKB: Tse15 |
-分子 #2: Tse15 toxin peptide (polyUNK)
分子 | 名称: Tse15 toxin peptide (polyUNK) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baumannii AB307-0294 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 2.486056 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) |
-分子 #3: Tse15 toxin peptide (polyUNK)
分子 | 名称: Tse15 toxin peptide (polyUNK) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baumannii AB307-0294 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 954.168 Da |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK) |
-分子 #4: Tse15 toxin peptide (polyUNK)
分子 | 名称: Tse15 toxin peptide (polyUNK) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baumannii AB307-0294 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 3.762629 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK) ...文字列: (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) |
-分子 #5: Tse15 toxin peptide (polyUNK)
分子 | 名称: Tse15 toxin peptide (polyUNK) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baumannii AB307-0294 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 2.060531 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 3 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 50 mM Hepes pH 8.0; 300 mM NaCl |
グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - Film thickness: 50 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 150000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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詳細 | Initial fitting with done using UCSF Chimera using fit map. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
得られたモデル | PDB-8uy4: |