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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Structure of Walker B mutated MCM8/9 heterohexamer complex with ADP | |||||||||
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![]() | Helicase DNA Replication DNA repair / DNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() MutLbeta complex binding / MutSbeta complex binding / recombinational interstrand cross-link repair / MCM8-MCM9 complex / male gamete generation / mismatch repair involved in maintenance of fidelity involved in DNA-dependent DNA replication / CDC6 association with the ORC:origin complex / MutSalpha complex binding / E2F-enabled inhibition of pre-replication complex formation / female gamete generation ...MutLbeta complex binding / MutSbeta complex binding / recombinational interstrand cross-link repair / MCM8-MCM9 complex / male gamete generation / mismatch repair involved in maintenance of fidelity involved in DNA-dependent DNA replication / CDC6 association with the ORC:origin complex / MutSalpha complex binding / E2F-enabled inhibition of pre-replication complex formation / female gamete generation / Unwinding of DNA / MCM complex / Activation of the pre-replicative complex / Activation of ATR in response to replication stress / DNA duplex unwinding / protein localization to chromatin / DNA helicase activity / helicase activity / Orc1 removal from chromatin / double-strand break repair via homologous recombination / chromosome / single-stranded DNA binding / DNA helicase / protein stabilization / chromatin binding / DNA damage response / protein-containing complex binding / enzyme binding / ATP hydrolysis activity / nucleoplasm / ATP binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å | |||||||||
![]() | Li C / Gao Y | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Activity, substrate preference and structure of the HsMCM8/9 helicase. 著者: David R McKinzey / Chuxuan Li / Yang Gao / Michael A Trakselis / ![]() 要旨: The minichromosomal maintenance proteins, MCM8 and MCM9, are more recent evolutionary additions to the MCM family, only cooccurring in selected higher eukaryotes. Mutations in these genes are ...The minichromosomal maintenance proteins, MCM8 and MCM9, are more recent evolutionary additions to the MCM family, only cooccurring in selected higher eukaryotes. Mutations in these genes are directly linked to ovarian insufficiency, infertility, and several cancers. MCM8/9 appears to have ancillary roles in fork progression and recombination of broken replication forks. However, the biochemical activity, specificities and structures have not been adequately illustrated, making mechanistic determination difficult. Here, we show that human MCM8/9 (HsMCM8/9) is an ATP dependent DNA helicase that unwinds fork DNA substrates with a 3'-5' polarity. High affinity ssDNA binding occurs in the presence of nucleoside triphosphates, while ATP hydrolysis weakens the interaction with DNA. The cryo-EM structure of the HsMCM8/9 heterohexamer was solved at 4.3 Å revealing a trimer of heterodimer configuration with two types of interfacial AAA+ nucleotide binding sites that become more organized upon binding ADP. Local refinements of the N or C-terminal domains (NTD or CTD) improved the resolution to 3.9 or 4.1 Å, respectively, and shows a large displacement in the CTD. Changes in AAA+ CTD upon nucleotide binding and a large swing between the NTD and CTD likely implies that MCM8/9 utilizes a sequential subunit translocation mechanism for DNA unwinding. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 117.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 17 KB 17 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 183 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 115.8 MB 115.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 846.8 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 846.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 14 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 16.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 8s91MC ![]() 8s92C ![]() 8s94C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.11 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_40234_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_40234_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Structure of Walker B mutated MCM8/9 heterohexamer complex with ADP
全体 | 名称: Structure of Walker B mutated MCM8/9 heterohexamer complex with ADP |
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要素 |
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-超分子 #1: Structure of Walker B mutated MCM8/9 heterohexamer complex with ADP
超分子 | 名称: Structure of Walker B mutated MCM8/9 heterohexamer complex with ADP タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 500 KDa |
-分子 #1: DNA helicase MCM8
分子 | 名称: DNA helicase MCM8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 93.817703 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MNGEYRGRGF GRGRFQSWKR GRGGGNFSGK WREREHRPDL SKTTGKRTSE QTPQFLLSTK TPQSMQSTLD RFIPYKGWKL YFSEVYSDS SPLIEKIQAF EKFFTRHIDL YDKDEIERKG SILVDFKELT EGGEVTNLIP DIATELRDAP EKTLACMGLA I HQVLTKDL ...文字列: MNGEYRGRGF GRGRFQSWKR GRGGGNFSGK WREREHRPDL SKTTGKRTSE QTPQFLLSTK TPQSMQSTLD RFIPYKGWKL YFSEVYSDS SPLIEKIQAF EKFFTRHIDL YDKDEIERKG SILVDFKELT EGGEVTNLIP DIATELRDAP EKTLACMGLA I HQVLTKDL ERHAAELQAQ EGLSNDGETM VNVPHIHARV YNYEPLTQLK NVRANYYGKY IALRGTVVRV SNIKPLCTKM AF LCAACGE IQSFPLPDGK YSLPTKCPVP VCRGRSFTAL RSSPLTVTMD WQSIKIQELM SDDQREAGRI PRTIECELVH DLV DSCVPG DTVTITGIVK VSNAEEGSRN KNDKCMFLLY IEANSISNSK GQKTKSSEDG CKHGMLMEFS LKDLYAIQEI QAEE NLFKL IVNSLCPVIF GHELVKAGLA LALFGGSQKY ADDKNRIPIR GDPHILVVGD PGLGKSQMLQ AACNVAPRGV YVCGN TTTT SGLTVTLSKD SSSGDFALEA GALVLGDQGI CGIDQFDKMG NQHQALLEAM EQQSISLAKA GVVCSLPART SIIAAA NPV GGHYNKAKTV SENLKMGSAL LSRFDLVFIL LDTPNEHHDH LLSEHVIAIR AGKQRTISSA TVARMNSQDS NTSVLEV VS EKPLSERLKV VPGETIDPIP HQLLRKYIGY ARQYVYPRLS TEAARVLQDF YLELRKQSQR LNSSPITTRQ LESLIRLT E ARARLELREE ATKEDAEDIV EIMKYSMLGT YSDEFGNLDF ERSQHGSGMS NRSTAKRFIS ALNNVAERTY NNIFQFHQL RQIAKELNIQ VADFENFIGS LNDQGYLLKK GPKVYQLQTM UniProtKB: DNA helicase MCM8 |
-分子 #2: DNA helicase MCM9
分子 | 名称: DNA helicase MCM9 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 127.485594 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MNSDQVTLVG QVFESYVSEY HKNDILLILK ERDEDAHYPV VVNAMTLFET NMEIGEYFNM FPSEVLTIFD SALRRSALTI LQSLSQPEA VSMKQNLHAR ISGLPVCPEL VREHIPKTKD VGHFLSVTGT VIRTSLVKVL EFERDYMCNK CKHVFVIKAD F EQYYTFCR ...文字列: MNSDQVTLVG QVFESYVSEY HKNDILLILK ERDEDAHYPV VVNAMTLFET NMEIGEYFNM FPSEVLTIFD SALRRSALTI LQSLSQPEA VSMKQNLHAR ISGLPVCPEL VREHIPKTKD VGHFLSVTGT VIRTSLVKVL EFERDYMCNK CKHVFVIKAD F EQYYTFCR PSSCPSLESC DSSKFTCLSG LSSSPTRCRD YQEIKIQEQV QRLSVGSIPR SMKVILEDDL VDSCKSGDDL TI YGIVMQR WKPFQQDVRC EVEIVLKANY IQVNNEQSSG IIMDEEVQKE FEDFWEYYKS DPFAGRNVIL ASLCPQVFGM YLV KLAVAM VLAGGIQRTD ATGTRVRGES HLLLVGDPGT GKSQFLKYAA KITPRSVLTT GIGSTSAGLT VTAVKDSGEW NLEA GALVL ADAGLCCIDQ FNSLKEHDRT SIHEAMEQQT ISVAKAGLVC KLNTRTTILA ATNPKGQYDP QESVSVNIAL GSPLL SRFD LILVLLDTKN EDWDRIISSF ILENKGYPSK SEKLWSMEKM KTYFCLIRNL QPTLSDVGNQ VLLRYYQMQR QSDCRN AAR TTIRLLESLI RLAEAHARLM FRDTVTLEDA ITVVSVMESS MQGGALLGGV NALHTSFPEN PGEQYQRQCE LILEKLE LQ SLLSEELRRL ERLQNQSVHQ SQPRVLEVET TPGSLRNGPG EESNFRTSSQ QEINYSTHIF SPGGSPEGSP VLDPPPHL E PNRSTSRKHS AQHKNNRDDS LDWFDFMATH QSEPKNTVVV SPHPKTSGEN MASKISNSTS QGKEKSEPGQ RSKVDIGLL PSPGETGVPW RADNVESNKK KRLALDSEAA VSADKPDSVL THHVPRNLQK LCKERAQKLC RNSTRVPAQC TVPSHPQSTP VHSPDRMLD SPKRKRPKSL AQVEEPAIEN VKPPGSPVAK LAKFTFKQKS KLIHSFEDHS HVSPGATKIA VHSPKISQRR T RRDAALPV KRPGKLTSTP GNQISSQPQG ETKEVSQQPP EKHGPREKVM CAPEKRIIQP ELELGNETGC AHLTCEGDKK EE VSGSNKS GKVHACTLAR LANFCFTPPS ESKSKSPPPE RKNRGERGPS SPPTTTAPMR VSKRKSFQLR GSTEKLIVSK ESL FTLPEL GDEAFDCDWD EEMRKKS UniProtKB: DNA helicase MCM9 |
-分子 #3: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 6 / 式: ADP |
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分子量 | 理論値: 427.201 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-ADP: |
-分子 #4: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 6 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 49.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 227818 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |