+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-34993 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Gi bound Orphan GPR20 complex with Fab046 in ligand-free state | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | orphan receptor / GPCR / GPR20 / Gi-coupled / GPR20-Gi-Fab046 / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of Rho protein signal transduction / T cell migration / D2 dopamine receptor binding / Adenylate cyclase inhibitory pathway / positive regulation of protein localization to cell cortex / regulation of cAMP-mediated signaling / G protein-coupled serotonin receptor binding / cellular response to forskolin / regulation of mitotic spindle organization / adenylate cyclase-inhibiting G protein-coupled receptor signaling pathway ...positive regulation of Rho protein signal transduction / T cell migration / D2 dopamine receptor binding / Adenylate cyclase inhibitory pathway / positive regulation of protein localization to cell cortex / regulation of cAMP-mediated signaling / G protein-coupled serotonin receptor binding / cellular response to forskolin / regulation of mitotic spindle organization / adenylate cyclase-inhibiting G protein-coupled receptor signaling pathway / Regulation of insulin secretion / G protein-coupled receptor binding / G protein-coupled receptor activity / electron transport chain / G-protein beta/gamma-subunit complex binding / Olfactory Signaling Pathway / adenylate cyclase-modulating G protein-coupled receptor signaling pathway / Activation of the phototransduction cascade / G beta:gamma signalling through PLC beta / Presynaptic function of Kainate receptors / Thromboxane signalling through TP receptor / G protein-coupled acetylcholine receptor signaling pathway / G-protein activation / Activation of G protein gated Potassium channels / Inhibition of voltage gated Ca2+ channels via Gbeta/gamma subunits / Prostacyclin signalling through prostacyclin receptor / response to peptide hormone / Glucagon signaling in metabolic regulation / G beta:gamma signalling through CDC42 / G beta:gamma signalling through BTK / ADP signalling through P2Y purinoceptor 12 / Sensory perception of sweet, bitter, and umami (glutamate) taste / Synthesis, secretion, and inactivation of Glucagon-like Peptide-1 (GLP-1) / photoreceptor disc membrane / Glucagon-type ligand receptors / Adrenaline,noradrenaline inhibits insulin secretion / Vasopressin regulates renal water homeostasis via Aquaporins / G alpha (z) signalling events / Glucagon-like Peptide-1 (GLP1) regulates insulin secretion / cellular response to catecholamine stimulus / ADORA2B mediated anti-inflammatory cytokines production / sensory perception of taste / ADP signalling through P2Y purinoceptor 1 / G beta:gamma signalling through PI3Kgamma / adenylate cyclase-activating dopamine receptor signaling pathway / Cooperation of PDCL (PhLP1) and TRiC/CCT in G-protein beta folding / GPER1 signaling / GDP binding / cellular response to prostaglandin E stimulus / Inactivation, recovery and regulation of the phototransduction cascade / G-protein beta-subunit binding / heterotrimeric G-protein complex / G alpha (12/13) signalling events / extracellular vesicle / signaling receptor complex adaptor activity / Thrombin signalling through proteinase activated receptors (PARs) / GTPase binding / retina development in camera-type eye / Ca2+ pathway / cell cortex / phospholipase C-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / midbody / G alpha (i) signalling events / fibroblast proliferation / G alpha (s) signalling events / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / G alpha (q) signalling events / Ras protein signal transduction / cell population proliferation / Extra-nuclear estrogen signaling / periplasmic space / electron transfer activity / receptor complex / iron ion binding / G protein-coupled receptor signaling pathway / lysosomal membrane / cell division / GTPase activity / centrosome / heme binding / synapse / protein-containing complex binding / GTP binding / nucleolus / magnesium ion binding / signal transduction / extracellular exosome / nucleoplasm / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / Rattus (ネズミ) / Vicugna pacos (アルパカ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.22 Å | |||||||||
データ登録者 | Lin X / Jiang S / Xu F | |||||||||
資金援助 | 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell Discov / 年: 2023 タイトル: The activation mechanism and antibody binding mode for orphan GPR20. 著者: Xi Lin / Shan Jiang / Yiran Wu / Xiaohu Wei / Gye-Won Han / Lijie Wu / Junlin Liu / Bo Chen / Zhibin Zhang / Suwen Zhao / Vadim Cherezov / Fei Xu / 要旨: GPR20 is a class-A orphan G protein-coupled receptor (GPCR) and a potential therapeutic target for gastrointestinal stromal tumors (GIST) owing to its differentially high expression. An antibody-drug ...GPR20 is a class-A orphan G protein-coupled receptor (GPCR) and a potential therapeutic target for gastrointestinal stromal tumors (GIST) owing to its differentially high expression. An antibody-drug conjugate (ADC) containing a GPR20-binding antibody (Ab046) was recently developed in clinical trials for GIST treatment. GPR20 constitutively activates Gi proteins in the absence of any known ligand, but it remains obscure how this high basal activity is achieved. Here we report three cryo-EM structures of human GPR20 complexes including Gi-coupled GPR20 in the absence or presence of the Fab fragment of Ab046 and Gi-free GPR20. Remarkably, the structures demonstrate a uniquely folded N-terminal helix capping onto the transmembrane domain and our mutagenesis study suggests a key role of this cap region in stimulating the basal activity of GPR20. We also uncover the molecular interactions between GPR20 and Ab046, which may enable the design of tool antibodies with enhanced affinity or new functionality for GPR20. Furthermore, we report the orthosteric pocket occupied by an unassigned density which might be essential for exploring opportunities for deorphanization. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_34993.map.gz | 85.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-34993-v30.xml emd-34993.xml | 21.1 KB 21.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_34993.png | 76.5 KB | ||
マスクデータ | emd_34993_msk_1.map | 91.1 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-34993.cif.gz | 6.7 KB | ||
その他 | emd_34993_half_map_1.map.gz emd_34993_half_map_2.map.gz | 84.5 MB 84.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34993 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34993 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_34993_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_34993_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_34993_validation.xml.gz | 13 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_34993_validation.cif.gz | 15.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34993 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34993 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_34993.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.832 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_34993_msk_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_34993_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_34993_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : The complex of Gi bound Orphan GPR20 with Fab046
全体 | 名称: The complex of Gi bound Orphan GPR20 with Fab046 |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: The complex of Gi bound Orphan GPR20 with Fab046
超分子 | 名称: The complex of Gi bound Orphan GPR20 with Fab046 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: light chain of Fab046
分子 | 名称: light chain of Fab046 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Rattus (ネズミ) |
分子量 | 理論値: 25.637654 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: METDRLLLWV LLLWVPGSTG DTVLTQSPAL AVSLGQRVTI SCRASKSVST YIHWYQQRSG QQPKLLIYSA SNLESGVPSR FSGSGSGTD FTLTIDPVEP DDIANYYCQQ INELPYTFGA GTKLELKRAD AAPTVSIFPP STERLATGGA SVVCLMNNFY P RDISVKWK ...文字列: METDRLLLWV LLLWVPGSTG DTVLTQSPAL AVSLGQRVTI SCRASKSVST YIHWYQQRSG QQPKLLIYSA SNLESGVPSR FSGSGSGTD FTLTIDPVEP DDIANYYCQQ INELPYTFGA GTKLELKRAD AAPTVSIFPP STERLATGGA SVVCLMNNFY P RDISVKWK IDGTERRDGV LDSVTDQDSK DSTYSMSSTL SLTKADYESH NLYTCEVVHK TSSSPVVKSF NRNEC |
-分子 #2: Guanine nucleotide-binding protein G(i) subunit alpha-1
分子 | 名称: Guanine nucleotide-binding protein G(i) subunit alpha-1 タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 40.472082 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MGCTLSAEDK AAVERSKMID RNLREDGEKA AREVKLLLLG AGESGKNTIV KQMKIIHEAG YSEEECKQYK AVVYSNTIQS IIAIIRAMG RLKIDFGDSA RADDARQLFV LAGAAEEGFM TAELAGVIKR LWKDSGVQAC FNRSREYQLN DSAAYYLNDL D RIAQPNYI ...文字列: MGCTLSAEDK AAVERSKMID RNLREDGEKA AREVKLLLLG AGESGKNTIV KQMKIIHEAG YSEEECKQYK AVVYSNTIQS IIAIIRAMG RLKIDFGDSA RADDARQLFV LAGAAEEGFM TAELAGVIKR LWKDSGVQAC FNRSREYQLN DSAAYYLNDL D RIAQPNYI PTQQDVLRTR VKTTGIVETH FTFKDLHFKM FDVGAQRSER KKWIHCFEGV TAIIFCVALS DYDLVLAEDE EM NRMHESM KLFDSICNNK WFTDTSIILF LNKKDLFEEK IKKSPLTICY PEYAGSNTYE EAAAYIQCQF EDLNKRKDTK EIY THFTCS TDTKNVQFVF DAVTDVIIKN NLKDCGLF UniProtKB: Guanine nucleotide-binding protein G(i) subunit alpha-1 |
-分子 #3: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
分子 | 名称: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1 タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 37.41693 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MSELDQLRQE AEQLKNQIRD ARKACADATL SQITNNIDPV GRIQMRTRRT LRGHLAKIYA MHWGTDSRLL VSASQDGKLI IWDSYTTNK VHAIPLRSSW VMTCAYAPSG NYVACGGLDN ICSIYNLKTR EGNVRVSREL AGHTGYLSCC RFLDDNQIVT S SGDTTCAL ...文字列: MSELDQLRQE AEQLKNQIRD ARKACADATL SQITNNIDPV GRIQMRTRRT LRGHLAKIYA MHWGTDSRLL VSASQDGKLI IWDSYTTNK VHAIPLRSSW VMTCAYAPSG NYVACGGLDN ICSIYNLKTR EGNVRVSREL AGHTGYLSCC RFLDDNQIVT S SGDTTCAL WDIETGQQTT TFTGHTGDVM SLSLAPDTRL FVSGACDASA KLWDVREGMC RQTFTGHESD INAICFFPNG NA FATGSDD ATCRLFDLRA DQELMTYSHD NIICGITSVS FSKSGRLLLA GYDDFNCNVW DALKADRAGV LAGHDNRVSC LGV TDDGMA VATGSWDSFL KIWN UniProtKB: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1 |
-分子 #4: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2
分子 | 名称: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2 タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 7.861143 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MASNNTASIA QARKLVEQLK MEANIDRIKV SKAAADLMAY CEAHAKEDPL LTPVPASENP FREKKFFCAI L UniProtKB: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2 |
-分子 #5: heavy chain of Fab046
分子 | 名称: heavy chain of Fab046 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Rattus (ネズミ) |
分子量 | 理論値: 25.406607 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MEWNWVFLFL LSVTAEVHSQ VQLQQSGAEL AKPGSSVKIS CKASGYTFTS YYISWIKQTT GQGLKYIGFI NPGSGHTNYN EKFKGKATL TVDKSSSTAF MQLSSLTPDD SAIYYCARGA GGFLRIITKF DYWGQGVMVT VSSAQTTAPS VYPLAPGCGD T TSSTVTLG ...文字列: MEWNWVFLFL LSVTAEVHSQ VQLQQSGAEL AKPGSSVKIS CKASGYTFTS YYISWIKQTT GQGLKYIGFI NPGSGHTNYN EKFKGKATL TVDKSSSTAF MQLSSLTPDD SAIYYCARGA GGFLRIITKF DYWGQGVMVT VSSAQTTAPS VYPLAPGCGD T TSSTVTLG CLVKGYFPEP VTVTWNSGAL SSDVHTFPAV LQSGLYTLTS SVTSSTWPSQ TVTCNVAHPA SSTKVDKKV |
-分子 #6: Soluble cytochrome b562,G-protein coupled receptor 20
分子 | 名称: Soluble cytochrome b562,G-protein coupled receptor 20 タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 56.04198 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MKTIIALSYI FCLVFADYKD DDDAGRAADL EDNWETLNDN LKVIEKADNA AQVKDALTKM RAAALDAQKA TPPKLEDKSP DSPEMKDFR HGFDILVGQI DDALKLANEG KVKEAQAAAE QLKTTRNAYI QKYLMPSVSP AGPSAGAVPN ATAVTTVRTN A SGLEVPLF ...文字列: MKTIIALSYI FCLVFADYKD DDDAGRAADL EDNWETLNDN LKVIEKADNA AQVKDALTKM RAAALDAQKA TPPKLEDKSP DSPEMKDFR HGFDILVGQI DDALKLANEG KVKEAQAAAE QLKTTRNAYI QKYLMPSVSP AGPSAGAVPN ATAVTTVRTN A SGLEVPLF HLFARLDEEL HGTFPGLWLA LMAVHGAIFL AGLVLNGLAL YVFCCRTRAK TPSVIYTINL VVTDLLVGLS LP TRFAVYY GARGCLRCAF PHVLGYFLNM HCSILFLTCI CVDRYLAIVR PEGSRRCRQP ACARAVCAFV WLAAGAVTLS VLG VTGSRP CCRVFALTVL EFLLPLLVIS VFTGRIMCAL SRPGLLHQGR QRRVRAMQLL LTVLIIFLVC FTPFHARQVA VALW PDMPH HTSLVVYHVA VTLSSLNSCM DPIVYCFVTS GFQATVRGLF GQHGEREPSS GDVVSMHRSS KGSGRHHILS AGPHA LTQA LANGPEAEFL EVLFQGPHHH HHHHHHH UniProtKB: Soluble cytochrome b562, G-protein coupled receptor 20 |
-分子 #7: scFv16
分子 | 名称: scFv16 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Vicugna pacos (アルパカ) |
分子量 | 理論値: 31.870629 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MLLVNQSHQG FNKEHTSKMV SAIVLYVLLA AAAHSAFADV QLVESGGGLV QPGGSRKLSC SASGFAFSSF GMHWVRQAPE KGLEWVAYI SSGSGTIYYA DTVKGRFTIS RDDPKNTLFL QMTSLRSEDT AMYYCVRSIY YYGSSPFDFW GQGTTLTVSS G GGGSGGGG ...文字列: MLLVNQSHQG FNKEHTSKMV SAIVLYVLLA AAAHSAFADV QLVESGGGLV QPGGSRKLSC SASGFAFSSF GMHWVRQAPE KGLEWVAYI SSGSGTIYYA DTVKGRFTIS RDDPKNTLFL QMTSLRSEDT AMYYCVRSIY YYGSSPFDFW GQGTTLTVSS G GGGSGGGG SGGGGSDIVM TQATSSVPVT PGESVSISCR SSKSLLHSNG NTYLYWFLQR PGQSPQLLIY RMSNLASGVP DR FSGSGSG TAFTLTISRL EAEDVGVYYC MQHLEYPLTF GAGTKLELKA AAHHHHHHHH |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
---|---|
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: OTHER |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
---|---|
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.22 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 164932 |
初期 角度割当 | タイプ: OTHER |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER |