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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-34905 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the human post-catalytic TSEN/pre-tRNA complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | pre-tRNA splicing / TSEN / pre-tRNA / RNA BINDING PROTEIN/RNA / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 tRNA-intron endonuclease complex / ATP-dependent polyribonucleotide 5'-hydroxyl-kinase activity / tRNA-type intron splice site recognition and cleavage / polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase / tRNA-intron lyase / tRNA-intron endonuclease activity / ATP-dependent polydeoxyribonucleotide 5'-hydroxyl-kinase activity / polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase activity / mRNA cleavage factor complex / tRNA splicing, via endonucleolytic cleavage and ligation ...tRNA-intron endonuclease complex / ATP-dependent polyribonucleotide 5'-hydroxyl-kinase activity / tRNA-type intron splice site recognition and cleavage / polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase / tRNA-intron lyase / tRNA-intron endonuclease activity / ATP-dependent polydeoxyribonucleotide 5'-hydroxyl-kinase activity / polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase activity / mRNA cleavage factor complex / tRNA splicing, via endonucleolytic cleavage and ligation / global gene silencing by mRNA cleavage / cerebellar cortex development / Processing of Intronless Pre-mRNAs / RISC complex assembly / mRNA 3'-end processing / mRNA 3'-end processing / tRNA processing in the nucleus / RNA Polymerase II Transcription Termination / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / mRNA processing / nucleic acid binding / lyase activity / centrosome / nucleolus / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhang X / Yang F / Zhan X / Shi Y | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2023 タイトル: Structural basis of pre-tRNA intron removal by human tRNA splicing endonuclease. 著者: Xiaofeng Zhang / Fenghua Yang / Xiechao Zhan / Tong Bian / Zhihan Xing / Yichen Lu / Yigong Shi / 要旨: Removal of the intron from precursor-tRNA (pre-tRNA) is essential in all three kingdoms of life. In humans, this process is mediated by the tRNA splicing endonuclease (TSEN) comprising four subunits: ...Removal of the intron from precursor-tRNA (pre-tRNA) is essential in all three kingdoms of life. In humans, this process is mediated by the tRNA splicing endonuclease (TSEN) comprising four subunits: TSEN2, TSEN15, TSEN34, and TSEN54. Here, we report the cryo-EM structures of human TSEN bound to full-length pre-tRNA in the pre-catalytic and post-catalytic states at average resolutions of 2.94 and 2.88 Å, respectively. Human TSEN features an extended surface groove that holds the L-shaped pre-tRNA. The mature domain of pre-tRNA is recognized by conserved structural elements of TSEN34, TSEN54, and TSEN2. Such recognition orients the anticodon stem of pre-tRNA and places the 3'-splice site and 5'-splice site into the catalytic centers of TSEN34 and TSEN2, respectively. The bulk of the intron sequences makes no direct interaction with TSEN, explaining why pre-tRNAs of varying introns can be accommodated and cleaved. Our structures reveal the molecular ruler mechanism of pre-tRNA cleavage by TSEN. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_34905.map.gz | 79.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-34905-v30.xml emd-34905.xml | 21 KB 21 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_34905.png | 57.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-34905.cif.gz | 7.1 KB | ||
その他 | emd_34905_half_map_1.map.gz emd_34905_half_map_2.map.gz | 77.6 MB 77.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34905 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34905 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_34905_validation.pdf.gz | 839 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_34905_full_validation.pdf.gz | 838.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_34905_validation.xml.gz | 13 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_34905_validation.cif.gz | 15.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34905 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34905 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8hmzMC 8hmyC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_34905.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.087 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_34905_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_34905_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : The human pre-catalytic TSEN/pre-tRNA complex
全体 | 名称: The human pre-catalytic TSEN/pre-tRNA complex |
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要素 |
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-超分子 #1: The human pre-catalytic TSEN/pre-tRNA complex
超分子 | 名称: The human pre-catalytic TSEN/pre-tRNA complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen2
分子 | 名称: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: tRNA-intron lyase |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 55.459012 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MAEAVFHAPK RKRRVYETYE SPLPIPFGQD HGPLKEFKIF RAEMINNNVI VRNAEDIEQL YGKGYFGKG ILSRSRPSFT ISDPKLVAKW KDMKTNMPII TSKRYQHSVE WAAELMRRQG QDESTVRRIL KDYTKPLEHP P VKRNEEAQ ...文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MAEAVFHAPK RKRRVYETYE SPLPIPFGQD HGPLKEFKIF RAEMINNNVI VRNAEDIEQL YGKGYFGKG ILSRSRPSFT ISDPKLVAKW KDMKTNMPII TSKRYQHSVE WAAELMRRQG QDESTVRRIL KDYTKPLEHP P VKRNEEAQ VHDKLNSGMV SNMEGTAGGE RPSVVNGDSG KSGGVGDPRE PLGCLQEGSG CHPTTESFEK SVREDASPLP HV CCCKQDA LILQRGLHHE DGSQHIGLLH PGDRGPDHEY VLVEEAECAM SEREAAPNEE LVQRNRLICR RNPYRIFEYL QLS LEEAFF LVYALGCLSI YYEKEPLTIV KLWKAFTVVQ PTFRTTYMAY HYFRSKGWVP KVGLKYGTDL LLYRKGPPFY HASY SVIIE LVDDHFEGSL RRPLSWKSLA ALSRVSVNVS KELMLCYLIK PSTMTDKEME SPECMKRIKV QEVILSRWVS SRERS DQDD L UniProtKB: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen2 |
-分子 #2: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen34
分子 | 名称: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen34 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: tRNA-intron lyase |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 35.827004 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MLVVEVANGR SLVWGAEAVQ ALRERLGVGG RTVGALPRGP RQNSRLGLPL LLMPEEARLL AEIGAVTLV SAPRPDSRHH SLALTSFKRQ QEESFQEQSA LAAEARETRR QELLEKITEG QAAKKQKLEQ ASGASSSQEA G SSQAAKED ...文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MLVVEVANGR SLVWGAEAVQ ALRERLGVGG RTVGALPRGP RQNSRLGLPL LLMPEEARLL AEIGAVTLV SAPRPDSRHH SLALTSFKRQ QEESFQEQSA LAAEARETRR QELLEKITEG QAAKKQKLEQ ASGASSSQEA G SSQAAKED ETSDGQASGE QEEAGPSSSQ AGPSNGVAPL PRSALLVQLA TARPRPVKAR PLDWRVQSKD WPHAGRPAHE LR YSIYRDL WERGFFLSAA GKFGGDFLVY PGDPLRFHAH YIAQCWAPED TIPLQDLVAA GRLGTSVRKT LLLCSPQPDG KVV YTSLQW ASLQ UniProtKB: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen34 |
-分子 #3: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen54
分子 | 名称: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen54 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 61.03234 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MEPEPEPAAV EVPAGRVLSA RELFAARSRS QKLPQRSHGP KDFLPDGSAA QAERLRRCRE ELWQLLAEQ RVERLGSLVA AEWRPEEGFV ELKSPAGKFW QTMGFSEQGR QRLHPEEALY LLECGSIHLF HQDLPLSIQE A YQLLLTDH ...文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MEPEPEPAAV EVPAGRVLSA RELFAARSRS QKLPQRSHGP KDFLPDGSAA QAERLRRCRE ELWQLLAEQ RVERLGSLVA AEWRPEEGFV ELKSPAGKFW QTMGFSEQGR QRLHPEEALY LLECGSIHLF HQDLPLSIQE A YQLLLTDH TVTFLQYQVF SHLKRLGYVV RRFQPSSVLS PYERQLNLDA SVQHLEDGDG KRKRSSSSPR SINKKAKALD NS LQPKSLA ASSPPPCSQP SQCPEEKPQE SSPMKGPGGP FQLLGSLGPS PGPAREGVGC SWESGRAENG VTGAGKRRWN FEQ ISFPNM ASDSRHTLLR APAPELLPAN VAGRETDAES WCQKLNQRKE KLSRREREHH AEAAQFQEDV NADPEVQRCS SWRE YKELL QRRQVQRSQR RAPHLWGQPV TPLLSPGQAS SPAVVLQHIS VLQTTHLPDG GARLLEKSGG LEIIFDVYQA DAVAT FRKN NPGKPYARMC ISGFDEPVPD LCSLKRLSYQ SGDVPLIFAL VDHGDISFYS FRDFTLPQDV GH UniProtKB: tRNA-splicing endonuclease subunit Sen54 |
-分子 #4: Chromosome 1 open reading frame 19, isoform CRA_a
分子 | 名称: Chromosome 1 open reading frame 19, isoform CRA_a / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 22.796555 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MASSAWSHPQ FEKGGGSGGG SGGSAWSHPQ FEKGSAAAME ERGDSEPTPG CSGLGPGGVR GFGDGGGAPS WAPEDAWMGT HPKYLEMME LDIGDATQVY VAFLVYLDLM ESKSWHEVNC VGLPELQLIC LVGTEIEGEG LQTVVPTPIT ASLSHNRIRE I LKASRKLQ ...文字列: MASSAWSHPQ FEKGGGSGGG SGGSAWSHPQ FEKGSAAAME ERGDSEPTPG CSGLGPGGVR GFGDGGGAPS WAPEDAWMGT HPKYLEMME LDIGDATQVY VAFLVYLDLM ESKSWHEVNC VGLPELQLIC LVGTEIEGEG LQTVVPTPIT ASLSHNRIRE I LKASRKLQ GDPDLPMSFT LAIVESDSTI VYYKLTDGFM LPDPQVSFEN ISLRR UniProtKB: Chromosome 1 open reading frame 19, isoform CRA_a |
-分子 #7: Polyribonucleotide 5'-hydroxyl-kinase Clp1
分子 | 名称: Polyribonucleotide 5'-hydroxyl-kinase Clp1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 詳細: Author stated that for the low map coverage of chain E, this is caused mainly by the weakness of EM density map of chain E. The chain E could be modelled in the low-pass filtered EM map. コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 49.837504 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MGEEANDDKK PTTKFELERE TELRFEVEAS QSVQLELLTG MAEIFGTELT RNKKFTFDAG AKVAVFTWH GCSVQLSGRT EVAYVSKDTP MLLYLNTHTA LEQMRRQAEK EEERGPRVMV VGPTDVGKST VCRLLLNYAV R LGRRPTYV ...文字列: MASDYKDDDD KASDEVDAGT MGEEANDDKK PTTKFELERE TELRFEVEAS QSVQLELLTG MAEIFGTELT RNKKFTFDAG AKVAVFTWH GCSVQLSGRT EVAYVSKDTP MLLYLNTHTA LEQMRRQAEK EEERGPRVMV VGPTDVGKST VCRLLLNYAV R LGRRPTYV ELDVGQGSVS IPGTMGALYI ERPADVEEGF SIQAPLVYHF GSTTPGTNIK LYNKITSRLA DVFNQRCEVN RR ASVSGCV INTCGWVKGS GYQALVHAAS AFEVDVVVVL DQERLYNELK RDLPHFVRTV LLPKSGGVVE RSKDFRRECR DER IREYFY GFRGCFYPHA FNVKFSDVKI YKVGAPTIPD SCLPLGMSQE DNQLKLVPVT PGRDMVHHLL SVSTAEGTEE NLSE TSVAG FIVVTSVDLE HQVFTVLSPA PRPLPKNFLL IMDIRFMDLK UniProtKB: Polyribonucleotide 5'-hydroxyl-kinase Clp1 |
-分子 #5: Pre-tRNA 5' END
分子 | 名称: Pre-tRNA 5' END / タイプ: rna / ID: 5 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 23.327805 KDa |
配列 | 文字列: UAAUACGACU CACUAUAGGG GGCUCUGUGG CGCAAUGGAU AGCGCAUUGG ACUUCUAGUG ACGAAUAGAG C(A23) |
-分子 #6: Pre-tRNA 3' END
分子 | 名称: Pre-tRNA 3' END / タイプ: rna / ID: 6 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 13.488029 KDa |
配列 | 文字列: AUUCAAAGGU UGUGGGUUCG AAUCCCACCA GAGUCGGAUA UC |
-分子 #8: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 6 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.9 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 309195 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |