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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-29840 | |||||||||
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タイトル | Lower preconoidal ring from Toxoplasma gondii tachyzoites with Formin1 conditionally depleted | |||||||||
マップデータ | Refined subtomogram average of the lower preconoidal ring from Toxoplasma gondii tachyzoites with Formin1 conditionally depleted | |||||||||
試料 |
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キーワード | Parasite / preconoidal rings / apicomplexa / CELL INVASION | |||||||||
生物種 | Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 44.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Martinez M / Mageswaran SK / Chang Y-W | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Origin and arrangement of actin filaments for gliding motility in apicomplexan parasites revealed by cryo-electron tomography. 著者: Matthew Martinez / Shrawan Kumar Mageswaran / Amandine Guérin / William David Chen / Cameron Parker Thompson / Sabine Chavin / Dominique Soldati-Favre / Boris Striepen / Yi-Wei Chang / 要旨: The phylum Apicomplexa comprises important eukaryotic parasites that invade host tissues and cells using a unique mechanism of gliding motility. Gliding is powered by actomyosin motors that ...The phylum Apicomplexa comprises important eukaryotic parasites that invade host tissues and cells using a unique mechanism of gliding motility. Gliding is powered by actomyosin motors that translocate host-attached surface adhesins along the parasite cell body. Actin filaments (F-actin) generated by Formin1 play a central role in this critical parasitic activity. However, their subcellular origin, path and ultrastructural arrangement are poorly understood. Here we used cryo-electron tomography to image motile Cryptosporidium parvum sporozoites and reveal the cellular architecture of F-actin at nanometer-scale resolution. We demonstrate that F-actin nucleates at the apically positioned preconoidal rings and is channeled into the pellicular space between the parasite plasma membrane and the inner membrane complex in a conoid extrusion-dependent manner. Within the pellicular space, filaments on the inner membrane complex surface appear to guide the apico-basal flux of F-actin. F-actin concordantly accumulates at the basal end of the parasite. Finally, analyzing a Formin1-depleted Toxoplasma gondii mutant pinpoints the upper preconoidal ring as the conserved nucleation hub for F-actin in Cryptosporidium and Toxoplasma. Together, we provide an ultrastructural model for the life cycle of F-actin for apicomplexan gliding motility. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_29840.map.gz | 28.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-29840-v30.xml emd-29840.xml | 15.7 KB 15.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_29840_fsc.xml | 7.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_29840.png | 125.3 KB | ||
マスクデータ | emd_29840_msk_1.map | 30.5 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_29840_half_map_1.map.gz emd_29840_half_map_2.map.gz | 28.3 MB 28.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29840 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29840 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_29840_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_29840_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_29840_validation.xml.gz | 12.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_29840_validation.cif.gz | 17.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29840 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29840 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_29840.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Refined subtomogram average of the lower preconoidal ring from Toxoplasma gondii tachyzoites with Formin1 conditionally depleted | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.65 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_29840_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_29840_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_29840_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Preconoidal rings
全体 | 名称: Preconoidal rings |
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要素 |
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-超分子 #1: Preconoidal rings
超分子 | 名称: Preconoidal rings / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: In situ structure of the lower preconoidal ring with Formin1 conditionally depleted |
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由来(天然) | 生物種: Toxoplasma gondii (トキソプラズマ) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 99 % / チャンバー内温度: 310 K / 装置: LEICA EM GP 詳細: Isolated tachyzoites were resuspended in media, and 4 uL was applied to the carbon side of the grid and front blotted for 4s. |
詳細 | Toxoplasma gondii expressing Formin1 fused to a c-terminal mAID tag were pre-treated with 500 uM Auxin (IAA) 48 hours prior to mechanical isolation from HFF cells. Sample was averaged from within frozen-hydrated Toxoplasma gondii tachyzoites |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均露光時間: 0.4 sec. / 平均電子線量: 2.3 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 33000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |