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- EMDB-26679: Subtomogram averaged map of hACE2 dimers on the surface of extrac... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-26679
タイトルSubtomogram averaged map of hACE2 dimers on the surface of extracellular vesicles
マップデータFinal subtomogram averaged map of hACE2 on the surface of extracellular vesicles.
試料
  • 複合体: Dimeric complex consisting of full-length membrane-bound human ACE2 with a LgBiT tag.
    • タンパク質・ペプチド: hACE2-LgBiT
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 19.0 Å
データ登録者Marcink TC / Kicmal T / Armbruster E / Zhang Z / Zipursky G / Idris M / Khao J / McGill G / Gallagher T / Porotto M ...Marcink TC / Kicmal T / Armbruster E / Zhang Z / Zipursky G / Idris M / Khao J / McGill G / Gallagher T / Porotto M / des Georges A / Moscona A
資金援助 米国, 3件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)AI152275 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)AI114736 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)AI160961 米国
引用ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022
タイトル: Intermediates in SARS-CoV-2 spike-mediated cell entry.
著者: Tara C Marcink / Thomas Kicmal / Emily Armbruster / Zhening Zhang / Gillian Zipursky / Kate L Golub / Mohab Idris / Jonathan Khao / Jennifer Drew-Bear / Gael McGill / Tom Gallagher / Matteo ...著者: Tara C Marcink / Thomas Kicmal / Emily Armbruster / Zhening Zhang / Gillian Zipursky / Kate L Golub / Mohab Idris / Jonathan Khao / Jennifer Drew-Bear / Gael McGill / Tom Gallagher / Matteo Porotto / Amédée des Georges / Anne Moscona /
要旨: SARS-CoV-2 cell entry is completed after viral spike (S) protein-mediated membrane fusion between viral and host cell membranes. Stable prefusion and postfusion S structures have been resolved by ...SARS-CoV-2 cell entry is completed after viral spike (S) protein-mediated membrane fusion between viral and host cell membranes. Stable prefusion and postfusion S structures have been resolved by cryo-electron microscopy and cryo-electron tomography, but the refolding intermediates on the fusion pathway are transient and have not been examined. We used an antiviral lipopeptide entry inhibitor to arrest S protein refolding and thereby capture intermediates as S proteins interact with hACE2 and fusion-activating proteases on cell-derived target membranes. Cryo-electron tomography imaged both extended and partially folded intermediate states of S2, as well as a novel late-stage conformation on the pathway to membrane fusion. The intermediates now identified in this dynamic S protein-directed fusion provide mechanistic insights that may guide the design of CoV entry inhibitors.
履歴
登録2022年4月18日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年8月31日-
マップ公開2022年8月31日-
更新2022年9月14日-
現状2022年9月14日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_26679.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_26679.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Final subtomogram averaged map of hACE2 on the surface of extracellular vesicles.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
3.24 Å/pix.
x 96 pix.
= 311.04 Å		3.24 Å/pix.
x 96 pix.
= 311.04 Å		3.24 Å/pix.
x 96 pix.
= 311.04 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 3.24 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 1.0
最小 - 最大-4.4522505 - 6.2868614
平均 (標準偏差)0.29135135 (±0.8647251)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ969696
Spacing969696
セルA=B=C: 311.04 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Dimeric complex consisting of full-length membrane-bound human AC...

全体名称: Dimeric complex consisting of full-length membrane-bound human ACE2 with a LgBiT tag.
要素
  • 複合体: Dimeric complex consisting of full-length membrane-bound human ACE2 with a LgBiT tag.
    • タンパク質・ペプチド: hACE2-LgBiT

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超分子 #1: Dimeric complex consisting of full-length membrane-bound human AC...

超分子名称: Dimeric complex consisting of full-length membrane-bound human ACE2 with a LgBiT tag.
タイプ: complex / キメラ: Yes / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK293T / 組換プラスミド: pcDNA3.1

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分子 #1: hACE2-LgBiT

分子名称: hACE2-LgBiT / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MSSSSWLLLS LVAVTAAQST IEEQAKTFLD KFNHEAEDLF YQSSLASWNY NTNITEENVQ NMNNAGDKWS AFLKEQSTLA QMYPLQEIQN LTVKLQLQAL QQNGSSVLSE DKSKRLNTIL NTMSTIYSTG KVCNPDNPQE CLLLEPGLNE IMANSLDYNE RLWAWESWRS ...文字列:
MSSSSWLLLS LVAVTAAQST IEEQAKTFLD KFNHEAEDLF YQSSLASWNY NTNITEENVQ NMNNAGDKWS AFLKEQSTLA QMYPLQEIQN LTVKLQLQAL QQNGSSVLSE DKSKRLNTIL NTMSTIYSTG KVCNPDNPQE CLLLEPGLNE IMANSLDYNE RLWAWESWRS EVGKQLRPLY EEYVVLKNEM ARANHYEDYG DYWRGDYEVN GVDGYDYSRG QLIEDVEHTF EEIKPLYEHL HAYVRAKLMN AYPSYISPIG CLPAHLLGDM WGRFWTNLYS LTVPFGQKPN IDVTDAMVDQ AWDAQRIFKE AEKFFVSVGL PNMTQGFWEN SMLTDPGNVQ KAVCHPTAWD LGKGDFRILM CTKVTMDDFL TAHHEMGHIQ YDMAYAAQPF LLRNGANEGF HEAVGEIMSL SAATPKHLKS IGLLSPDFQE DNETEINFLL KQALTIVGTL PFTYMLEKWR WMVFKGEIPK DQWMKKWWEM KREIVGVVEP VPHDETYCDP ASLFHVSNDY SFIRYYTRTL YQFQFQEALC QAAKHEGPLH KCDISNSTEA GQKLFNMLRL GKSEPWTLAL ENVVGAKNMN VRPLLNYFEP LFTWLKDQNK NSFVGWSTDW SPYADQSIKV RISLKSALGD KAYEWNDNEM YLFRSSVAYA MRQYFLKVKN QMILFGEEDV RVANLKPRIS FNFFVTAPKN VSDIIPRTEV EKAIRMSRSR INDAFRLNDN SLEFLGIQPT LGPPNQPPVS IWLIVFGVVM GVIVVGIVIL IFTGIRDRKK KNKARSGENP YASIDISKGE NNPGFQNTDD VQTSF

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
グリッドモデル: PELCO Ultrathin Carbon with Lacey Carbon / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 3.0 nm
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum SE / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 2.7 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 8.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 4.0 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 19.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Dynamo (ver. 1.1.514) / 使用したサブトモグラム数: 315
抽出トモグラム数: 1 / 使用した粒子像数: 1
CTF補正ソフトウェア - 名称: Warp (ver. 1.0.9)
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE

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原子モデル構築 1

精密化プロトコル: AB INITIO MODEL

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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