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- EMDB-26247: In situ architecture of VPS13C -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-26247
タイトルIn situ architecture of VPS13C
マップデータ
試料
  • 細胞: full-length human VPS13C bridging the two adjacent membranes
キーワードLipid transfer / LIPID TRANSPORT
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 47.0 Å
データ登録者Cai S / De Camilli P
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute on Drug Abuse (NIH/NIDA)DA018343 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)5R01AI152421 米国
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2022
タイトル: In situ architecture of the lipid transport protein VPS13C at ER-lysosome membrane contacts.
著者: Shujun Cai / Yumei Wu / Andrés Guillén-Samander / William Hancock-Cerutti / Jun Liu / Pietro De Camilli /
要旨: VPS13 is a eukaryotic lipid transport protein localized at membrane contact sites. Previous studies suggested that it may transfer lipids between adjacent bilayers by a bridge-like mechanism. Direct ...VPS13 is a eukaryotic lipid transport protein localized at membrane contact sites. Previous studies suggested that it may transfer lipids between adjacent bilayers by a bridge-like mechanism. Direct evidence for this hypothesis from a full-length structure and from electron microscopy (EM) studies in situ is still missing, however. Here, we have capitalized on AlphaFold predictions to complement the structural information already available about VPS13 and to generate a full-length model of human VPS13C, the Parkinson's disease-linked VPS13 paralog localized at contacts between the endoplasmic reticulum (ER) and endo/lysosomes. Such a model predicts an ∼30-nm rod with a hydrophobic groove that extends throughout its length. We further investigated whether such a structure can be observed in situ at ER-endo/lysosome contacts. To this aim, we combined genetic approaches with cryo-focused ion beam (cryo-FIB) milling and cryo-electron tomography (cryo-ET) to examine HeLa cells overexpressing this protein (either full length or with an internal truncation) along with VAP, its anchoring binding partner at the ER. Using these methods, we identified rod-like densities that span the space separating the two adjacent membranes and that match the predicted structures of either full-length VPS13C or its shorter truncated mutant, thus providing in situ evidence for a bridge model of VPS13 in lipid transport.
履歴
登録2022年2月17日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年4月13日-
マップ公開2022年4月13日-
更新2024年1月17日-
現状2024年1月17日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_26247.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_26247.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 13.536 Å
密度
表面レベルBy EMDB: 0.3
最小 - 最大-0.5152203 - 2.0491447
平均 (標準偏差)0.00045576657 (±0.084811926)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ646464
Spacing646464
セルA=B=C: 866.304 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: #1

ファイルemd_26247_additional_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: #2

ファイルemd_26247_additional_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : full-length human VPS13C bridging the two adjacent membranes

全体名称: full-length human VPS13C bridging the two adjacent membranes
要素
  • 細胞: full-length human VPS13C bridging the two adjacent membranes

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超分子 #1: full-length human VPS13C bridging the two adjacent membranes

超分子名称: full-length human VPS13C bridging the two adjacent membranes
タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0
詳細: Subtomogram-average density maps showing a full-length VPS13C rod bridging the two adjacent membranes. C100 symmetry was applied to enhance signal to noise ratio.
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態cell

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
凍結凍結剤: ETHANE-PROPANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 2.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: -0.006 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: -0.001 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 47.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: PROTOMO / 使用したサブトモグラム数: 570
抽出トモグラム数: 20 / 使用した粒子像数: 570
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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