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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-24904 | ||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Molecular Organization of the Early Stages of Nucleosome Phase Separation Visualized by Cryo-Electron Tomography | ||||||||||||||||||||||||
マップデータ | Grown spherical tetranucleosome condensate (1) | ||||||||||||||||||||||||
試料 |
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生物種 | Xenopus laevis (アフリカツメガエル) | ||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | ||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Zhang M / Diaz-Celis C / Onoa B / Canari-Chumpitaz C / Requejo KI / Liu J / Vien M / Nogales E / Ren G / Bustamante C | ||||||||||||||||||||||||
資金援助 | 米国, 7件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2022 タイトル: Molecular organization of the early stages of nucleosome phase separation visualized by cryo-electron tomography. 著者: Meng Zhang / César Díaz-Celis / Bibiana Onoa / Cristhian Cañari-Chumpitaz / Katherinne I Requejo / Jianfang Liu / Michael Vien / Eva Nogales / Gang Ren / Carlos Bustamante / 要旨: It has been proposed that the intrinsic property of nucleosome arrays to undergo liquid-liquid phase separation (LLPS) in vitro is responsible for chromatin domain organization in vivo. However, ...It has been proposed that the intrinsic property of nucleosome arrays to undergo liquid-liquid phase separation (LLPS) in vitro is responsible for chromatin domain organization in vivo. However, understanding nucleosomal LLPS has been hindered by the challenge to characterize the structure of the resulting heterogeneous condensates. We used cryo-electron tomography and deep-learning-based 3D reconstruction/segmentation to determine the molecular organization of condensates at various stages of LLPS. We show that nucleosomal LLPS involves a two-step process: a spinodal decomposition process yielding irregular condensates, followed by their unfavorable conversion into more compact, spherical nuclei that grow into larger spherical aggregates through accretion of spinodal materials or by fusion with other spherical condensates. Histone H1 catalyzes more than 10-fold the spinodal-to-spherical conversion. We propose that this transition involves exposure of nucleosome hydrophobic surfaces causing modified inter-nucleosome interactions. These results suggest a physical mechanism by which chromatin may transition from interphase to metaphase structures. #1: ジャーナル: BioRxiv / 年: 2021 タイトル: Molecular Organization of the Early Stages of Nucleosome Phase Separation Visualized by Cryo-Electron Tomography 著者: Zhang M / Diaz-Celis C / Onoa B / Canari-Chumpitaz C / Requejo KI / Liu J / Vien M / Nogales E / Ren G / Bustamante C | ||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_24904.map.gz | 7.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-24904-v30.xml emd-24904.xml | 11.1 KB 11.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_24904.png | 88.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24904 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24904 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_24904_validation.pdf.gz | 271.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_24904_full_validation.pdf.gz | 270.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_24904_validation.xml.gz | 4.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_24904_validation.cif.gz | 5.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24904 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24904 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_24904.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 200 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Grown spherical tetranucleosome condensate (1) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 11.68 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Larger spherical type of tetranucleosome condensates
全体 | 名称: Larger spherical type of tetranucleosome condensates |
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要素 |
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-超分子 #1: Larger spherical type of tetranucleosome condensates
超分子 | 名称: Larger spherical type of tetranucleosome condensates タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Spherical condensates formed at physiological salt condition (20 mM HEPES-KOH pH 7.5; 150 mM NaCl; 5 mM MgCl2; 1 mM DTT) after 10 min incubation. |
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由来(天然) | 生物種: Xenopus laevis (アフリカツメガエル) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % |
切片作成 | その他: NO SECTIONING |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 実像数: 40 / 平均露光時間: 2.5 sec. / 平均電子線量: 7.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 使用した粒子像数: 40 |
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