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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2444 | |||||||||
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タイトル | Cryo-electron tomography of the human nuclear pore complex | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of the human nuclear pore complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | nuclear pore complex | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / 解像度: 35.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Bui KH / von Appen A / DiGuilio AL / Ori A / Sparks L / Mackmull MT / Bock T / Hagen W / Andres-Pons A / Glavy JS / Beck M | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2013 タイトル: Integrated structural analysis of the human nuclear pore complex scaffold. 著者: Khanh Huy Bui / Alexander von Appen / Amanda L DiGuilio / Alessandro Ori / Lenore Sparks / Marie-Therese Mackmull / Thomas Bock / Wim Hagen / Amparo Andrés-Pons / Joseph S Glavy / Martin Beck / 要旨: The nuclear pore complex (NPC) is a fundamental component of all eukaryotic cells that facilitates nucleocytoplasmic exchange of macromolecules. It is assembled from multiple copies of about 30 ...The nuclear pore complex (NPC) is a fundamental component of all eukaryotic cells that facilitates nucleocytoplasmic exchange of macromolecules. It is assembled from multiple copies of about 30 nucleoporins. Due to its size and complex composition, determining the structure of the NPC is an enormous challenge, and the overall architecture of the NPC scaffold remains elusive. In this study, we have used an integrated approach based on electron tomography, single-particle electron microscopy, and crosslinking mass spectrometry to determine the structure of a major scaffold motif of the human NPC, the Nup107 subcomplex, in both isolation and integrated into the NPC. We show that 32 copies of the Nup107 subcomplex assemble into two reticulated rings, one each at the cytoplasmic and nuclear face of the NPC. This arrangement may explain how changes of the diameter are realized that would accommodate transport of huge cargoes. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2444.map.gz | 6.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2444-v30.xml emd-2444.xml | 10.3 KB 10.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_2444.png | 254.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2444 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2444 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2444_validation.pdf.gz | 243.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2444_full_validation.pdf.gz | 242.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2444_validation.xml.gz | 6.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2444 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2444 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2444.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 17.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of the human nuclear pore complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 8.6 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Human Nuclear Pore Complex
全体 | 名称: Human Nuclear Pore Complex |
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要素 |
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-超分子 #1000: Human Nuclear Pore Complex
超分子 | 名称: Human Nuclear Pore Complex / タイプ: sample / ID: 1000 詳細: The sample is purified human nuclear envelope containing nuclear pore complex. Number unique components: 1 |
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分子量 | 手法: Absolute Quantitative Mass Spectrometry |
-分子 #1: Nuclear Pore Complex
分子 | 名称: Nuclear Pore Complex / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human / Organelle: Nucleus / 細胞中の位置: Nuclear pore complex |
分子量 | 実験値: 120 MDa / 理論値: 120 MDa |
-実験情報
-構造解析
解析 | サブトモグラム平均法 |
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試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 20mM Tris, 0.2-0.4% Trehalose |
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グリッド | 詳細: 200 mesh Quantifoil Copper Holey Carbon Grid R2/1 |
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: HOMEMADE PLUNGER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF2002 エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV |
日付 | 2012年9月20日 |
撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GATAN MULTISCAN / 平均電子線量: 100 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 34883 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 19500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER Tilt series - Axis1 - Min angle: -60 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 60 ° |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | The subtomograms were picked manually and further processed iterative symmetry independent averaging. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 35.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: IMOD, TOM, AV3 詳細: Local Resolution. Cytoplasmic Ring 32 Angstrom. Spoke Ring 34 Angstrom. Nuclear Ring 35 Angstrom. 使用したサブトモグラム数: 10000 |