+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-24284 | ||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Azoarcus group I intron, symmetry-expanded monomer from a synthetic trimeric construct | ||||||||||||||||||
マップデータ | Azoarcus group I intron, symmetry-expanded monomer from a synthetic trimeric construct | ||||||||||||||||||
試料 |
| ||||||||||||||||||
生物種 | Azoarcus olearius (バクテリア) | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.9 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Thelot F / Liu D / Liao M / Yin P | ||||||||||||||||||
資金援助 | 米国, 5件
| ||||||||||||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Methods / 年: 2022 タイトル: Sub-3-Å cryo-EM structure of RNA enabled by engineered homomeric self-assembly. 著者: Di Liu / François A Thélot / Joseph A Piccirilli / Maofu Liao / Peng Yin / 要旨: High-resolution structural studies are essential for understanding the folding and function of diverse RNAs. Herein, we present a nanoarchitectural engineering strategy for efficient structural ...High-resolution structural studies are essential for understanding the folding and function of diverse RNAs. Herein, we present a nanoarchitectural engineering strategy for efficient structural determination of RNA-only structures using single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM). This strategy-ROCK (RNA oligomerization-enabled cryo-EM via installing kissing loops)-involves installing kissing-loop sequences onto the functionally nonessential stems of RNAs for homomeric self-assembly into closed rings with multiplied molecular weights and mitigated structural flexibility. ROCK enables cryo-EM reconstruction of the Tetrahymena group I intron at 2.98-Å resolution overall (2.85 Å for the core), allowing de novo model building of the complete RNA, including the previously unknown peripheral domains. ROCK is further applied to two smaller RNAs-the Azoarcus group I intron and the FMN riboswitch, revealing the conformational change of the former and the bound ligand in the latter. ROCK holds promise to greatly facilitate the use of cryo-EM in RNA structural studies. | ||||||||||||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_24284.map.gz | 5.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-24284-v30.xml emd-24284.xml | 11.1 KB 11.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_24284.png | 64.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24284 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24284 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_24284_validation.pdf.gz | 326 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_24284_full_validation.pdf.gz | 325.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_24284_validation.xml.gz | 4.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_24284_validation.cif.gz | 4.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24284 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24284 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_24284.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 5.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Azoarcus group I intron, symmetry-expanded monomer from a synthetic trimeric construct | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.23 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Azoarcus group I intron, symmetry-expanded monomer from a synthet...
全体 | 名称: Azoarcus group I intron, symmetry-expanded monomer from a synthetic trimeric construct |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Azoarcus group I intron, symmetry-expanded monomer from a synthet...
超分子 | 名称: Azoarcus group I intron, symmetry-expanded monomer from a synthetic trimeric construct タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Azoarcus olearius (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 80 KDa |
-分子 #1: Azoarcus group I intron
分子 | 名称: Azoarcus group I intron / タイプ: rna / ID: 1 |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Azoarcus olearius (バクテリア) |
配列 | 文字列: GGCCGUGUGC CUUGCGCCGG GAAACCACGC AAGGGAUGGU GUCAAAUUCG GCGAAACCUA AGCGCGGAUG GUUCGCGUAU GGCAACGCCG AGCCAAGCUU CGCAGCCUUC GGGCUGCGAU GAAGGUGUAG AGACUAGACG GCACCCACCU AAGGCGCACC GAACCAUCCG ...文字列: GGCCGUGUGC CUUGCGCCGG GAAACCACGC AAGGGAUGGU GUCAAAUUCG GCGAAACCUA AGCGCGGAUG GUUCGCGUAU GGCAACGCCG AGCCAAGCUU CGCAGCCUUC GGGCUGCGAU GAAGGUGUAG AGACUAGACG GCACCCACCU AAGGCGCACC GAACCAUCCG GUGCGCUAUG GUGAAGGCAU AGUCCAGGGA GUGGCGAAAG CCACACAAAC CAG |
-分子 #2: Ligated exon mimic of the Azoarcus Group I intron
分子 | 名称: Ligated exon mimic of the Azoarcus Group I intron / タイプ: other / ID: 2 / 分類: polydeoxyribonucleotide/polyribonucleotide hybrid |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Azoarcus olearius (バクテリア) |
配列 | 文字列: CATACGGCC |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
緩衝液 | pH: 8 構成要素:
| |||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 52.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / Cs: 2.0 mm / 倍率(公称値): 31000 |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 486860 |
---|---|
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |