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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23755 | |||||||||||||||
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タイトル | CryoEM map of the structure of the S. cerevisiae origin recognition complex bound to the replication initiator Cdc6 and the ARS1 origin DNA. | |||||||||||||||
マップデータ | ||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | replication initiation / REPLICATION | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 MCM complex loading / CDC6 association with the ORC:origin complex / Cul8-RING ubiquitin ligase complex / maintenance of rDNA / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / nuclear origin of replication recognition complex / Activation of the pre-replicative complex / nucleosome organization / nuclear pre-replicative complex ...MCM complex loading / CDC6 association with the ORC:origin complex / Cul8-RING ubiquitin ligase complex / maintenance of rDNA / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / nuclear origin of replication recognition complex / Activation of the pre-replicative complex / nucleosome organization / nuclear pre-replicative complex / Activation of ATR in response to replication stress / DNA replication preinitiation complex / cyclin-dependent protein serine/threonine kinase inhibitor activity / mitotic DNA replication checkpoint signaling / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / silent mating-type cassette heterochromatin formation / CDK-mediated phosphorylation and removal of Cdc6 / Orc1 removal from chromatin / regulation of DNA replication / DNA replication origin binding / nucleosome binding / DNA replication initiation / subtelomeric heterochromatin formation / G1/S transition of mitotic cell cycle / chromosome / chromosome, telomeric region / cell division / GTPase activity / chromatin binding / GTP binding / ATP hydrolysis activity / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Feng X / Li H | |||||||||||||||
資金援助 | 米国, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: The structure of ORC-Cdc6 on an origin DNA reveals the mechanism of ORC activation by the replication initiator Cdc6. 著者: Xiang Feng / Yasunori Noguchi / Marta Barbon / Bruce Stillman / Christian Speck / Huilin Li / 要旨: The Origin Recognition Complex (ORC) binds to sites in chromosomes to specify the location of origins of DNA replication. The S. cerevisiae ORC binds to specific DNA sequences throughout the cell ...The Origin Recognition Complex (ORC) binds to sites in chromosomes to specify the location of origins of DNA replication. The S. cerevisiae ORC binds to specific DNA sequences throughout the cell cycle but becomes active only when it binds to the replication initiator Cdc6. It has been unclear at the molecular level how Cdc6 activates ORC, converting it to an active recruiter of the Mcm2-7 hexamer, the core of the replicative helicase. Here we report the cryo-EM structure at 3.3 Å resolution of the yeast ORC-Cdc6 bound to an 85-bp ARS1 origin DNA. The structure reveals that Cdc6 contributes to origin DNA recognition via its winged helix domain (WHD) and its initiator-specific motif. Cdc6 binding rearranges a short α-helix in the Orc1 AAA+ domain and the Orc2 WHD, leading to the activation of the Cdc6 ATPase and the formation of the three sites for the recruitment of Mcm2-7, none of which are present in ORC alone. The results illuminate the molecular mechanism of a critical biochemical step in the licensing of eukaryotic replication origins. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_23755.map.gz | 12.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-23755-v30.xml emd-23755.xml | 30.9 KB 30.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_23755_fsc.xml | 10 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_23755.png | 95.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-23755.cif.gz | 9.5 KB | ||
その他 | emd_23755_half_map_1.map.gz emd_23755_half_map_2.map.gz | 65.4 MB 65.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23755 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23755 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_23755_validation.pdf.gz | 916.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_23755_full_validation.pdf.gz | 916.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_23755_validation.xml.gz | 17.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_23755_validation.cif.gz | 22.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23755 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23755 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_23755.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.828 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_23755_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_23755_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Complex of origin replication complex with Cdc6 and ARS1 origin DNA
+超分子 #1: Complex of origin replication complex with Cdc6 and ARS1 origin DNA
+分子 #1: Origin recognition complex subunit 1
+分子 #2: Origin recognition complex subunit 2
+分子 #3: Origin recognition complex subunit 3
+分子 #4: Origin recognition complex subunit 4
+分子 #5: Origin recognition complex subunit 5
+分子 #6: Origin recognition complex subunit 6
+分子 #9: Cell division control protein 6
+分子 #7: DNA (85-MER)
+分子 #8: DNA (85-MER)
+分子 #10: MAGNESIUM ION
+分子 #11: PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 76.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: OTHER / 温度因子: 118.5 / 当てはまり具合の基準: correlation coefficient |
得られたモデル | PDB-7mca: |