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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-20341 | |||||||||
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タイトル | The Nexin-dynein Regulatory Complex (N-DRC) from the cryo-electron tomography and subtomographic average of isolated Chlamydomonas SNAP-DRC4 axonemes, labeled with streptavidin-nanogold | |||||||||
マップデータ | N-DRC structure from SNAP-DRC4 Chlamydomonas | |||||||||
試料 |
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生物種 | Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 35.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Gui L / Song K / Tritschler D / Bower R / Yan S / Dai A / Augspurger K / Sakizadeh J / Grzemska M / Ni T ...Gui L / Song K / Tritschler D / Bower R / Yan S / Dai A / Augspurger K / Sakizadeh J / Grzemska M / Ni T / Porter ME / Nicastro D | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2019 タイトル: Scaffold subunits support associated subunit assembly in the ciliary nexin-dynein regulatory complex. 著者: Long Gui / Kangkang Song / Douglas Tritschler / Raqual Bower / Si Yan / Aguang Dai / Katherine Augspurger / Jason Sakizadeh / Magdalena Grzemska / Thomas Ni / Mary E Porter / Daniela Nicastro / 要旨: The nexin-dynein regulatory complex (N-DRC) in motile cilia and flagella functions as a linker between neighboring doublet microtubules, acts to stabilize the axonemal core structure, and serves as a ...The nexin-dynein regulatory complex (N-DRC) in motile cilia and flagella functions as a linker between neighboring doublet microtubules, acts to stabilize the axonemal core structure, and serves as a central hub for the regulation of ciliary motility. Although the N-DRC has been studied extensively using genetic, biochemical, and structural approaches, the precise arrangement of the 11 (or more) N-DRC subunits remains unknown. Here, using cryo-electron tomography, we have compared the structure of wild-type flagella to that of strains with specific DRC subunit deletions or rescued strains with tagged DRC subunits. Our results show that DRC7 is a central linker subunit that helps connect the N-DRC to the outer dynein arms. DRC11 is required for the assembly of DRC8, and DRC8/11 form a subcomplex in the proximal lobe of the linker domain that is required to form stable contacts to the neighboring B-tubule. Gold labeling of tagged subunits determines the precise locations of the previously ambiguous N terminus of DRC4 and C terminus of DRC5. DRC4 is now shown to contribute to the core scaffold of the N-DRC. Our results reveal the overall architecture of N-DRC, with the 3 subunits DRC1/2/4 forming a core complex that serves as the scaffold for the assembly of the "functional subunits," namely DRC3/5-8/11. These findings shed light on N-DRC assembly and its role in regulating flagellar beating. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_20341.map.gz | 462.2 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-20341-v30.xml emd-20341.xml | 10 KB 10 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_20341.png | 80.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20341 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20341 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_20341_validation.pdf.gz | 78.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_20341_full_validation.pdf.gz | 77.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_20341_validation.xml.gz | 495 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20341 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20341 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_20341.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 548.8 KB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | N-DRC structure from SNAP-DRC4 Chlamydomonas | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 10.77356 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : The nexin-dynein regulatory complex averaged from Chlamydomonas S...
全体 | 名称: The nexin-dynein regulatory complex averaged from Chlamydomonas SNAP-DRC4 axoneme, labeled with streptavidin-nanogold |
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要素 |
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-超分子 #1: The nexin-dynein regulatory complex averaged from Chlamydomonas S...
超分子 | 名称: The nexin-dynein regulatory complex averaged from Chlamydomonas SNAP-DRC4 axoneme, labeled with streptavidin-nanogold タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Axonemes from the N-terminal SNAP tagged DRC4 rescued Chlamydomonas pf2-4 strain, labeled with streptavidin-nanogold |
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由来(天然) | 生物種: Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス) 株: pf2-4 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | 詳細: unspecified |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F30 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 1000 (2k x 2k) 平均電子線量: 1.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 35.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 973 |
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抽出 | トモグラム数: 9 / 使用した粒子像数: 973 |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER |