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万見- EMDB-1888: Thermus thermophilus V-type (A-type) ATPase at 16 Angstroms resolution -
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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1888 | |||||||||
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タイトル | Thermus thermophilus V-type (A-type) ATPase at 16 Angstroms resolution | |||||||||
マップデータ | Thermus thermophilus V-type (A-type) ATPase | |||||||||
試料 |
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キーワード | Vacuolar type ATPase / V-ATPase / A-ATPase / Thermus thermophilus / ATP synthase / membrane protein | |||||||||
生物種 | Thermus thermophilus (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 16.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Lau WCY / Rubinstein JL | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2010 タイトル: Structure of intact Thermus thermophilus V-ATPase by cryo-EM reveals organization of the membrane-bound V(O) motor. 著者: Wilson C Y Lau / John L Rubinstein / 要旨: The eubacterium Thermus thermophilus uses a macromolecular assembly closely related to eukaryotic V-ATPase to produce its supply of ATP. This simplified V-ATPase offers several advantages over ...The eubacterium Thermus thermophilus uses a macromolecular assembly closely related to eukaryotic V-ATPase to produce its supply of ATP. This simplified V-ATPase offers several advantages over eukaryotic V-ATPases for structural analysis and investigation of the mechanism of the enzyme. Here we report the structure of the complex at approximately 16 A resolution as determined by single particle electron cryomicroscopy (cryo-EM). The resolution of the map and our use of cryo-EM, rather than negative stain EM, reveals detailed information about the internal organization of the assembly. We could separate the map into segments corresponding to subunits A and B, the threefold pseudosymmetric C-subunit, a central rotor consisting of subunits D and F, the L-ring, the stator subcomplex consisting of subunits I, E, and G, and a micelle of bound detergent. The architecture of the V(O) region shows a remarkably small area of contact between the I-subunit and the ring of L-subunits and is consistent with a two half-channel model for proton translocation. The arrangement of structural elements in V(O) gives insight into the mechanism of torque generation from proton translocation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1888.map.gz | 7.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1888-v30.xml emd-1888.xml | 8.2 KB 8.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1888.jpg | 91.3 KB | ||
その他 | Supplementary_Map_Information.txt emd_1888_additional_1.map.gz emd_1888_additional_10.map.gz emd_1888_additional_11.map.gz emd_1888_additional_2.map.gz emd_1888_additional_3.map.gz emd_1888_additional_4.map.gz emd_1888_additional_5.map.gz emd_1888_additional_6.map.gz emd_1888_additional_7.map.gz emd_1888_additional_8.map.gz emd_1888_additional_9.map.gz | 904 B 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB 7.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1888 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1888 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1888_validation.pdf.gz | 214.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1888_full_validation.pdf.gz | 213.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1888_validation.xml.gz | 5.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1888 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1888 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1888.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 7.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Thermus thermophilus V-type (A-type) ATPase | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
+添付マップデータ: emd 1888 additional 1.map
+添付マップデータ: emd 1888 additional 10.map
+添付マップデータ: emd 1888 additional 11.map
+添付マップデータ: emd 1888 additional 2.map
+添付マップデータ: emd 1888 additional 3.map
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+添付マップデータ: emd 1888 additional 6.map
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+添付マップデータ: emd 1888 additional 8.map
+添付マップデータ: emd 1888 additional 9.map
+その他
-試料の構成要素
-全体 : V/A-ATPase from Thermus thermophilus solubilized with the deterge...
全体 | 名称: V/A-ATPase from Thermus thermophilus solubilized with the detergent dodecyl maltoside. |
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要素 |
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-超分子 #1000: V/A-ATPase from Thermus thermophilus solubilized with the deterge...
超分子 | 名称: V/A-ATPase from Thermus thermophilus solubilized with the detergent dodecyl maltoside. タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Hetero 26mer / Number unique components: 9 |
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分子量 | 理論値: 600 KDa |
-超分子 #1: V-ATPase
超分子 | 名称: V-ATPase / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / Name.synonym: ATPase / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Thermus thermophilus (バクテリア) / 細胞中の位置: Plasma membrane |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2.0 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 50mM Tris-HCl 150mM NaCL 5mM MgCl2 O.02% DDM |
グリッド | 詳細: Quantifoil 2/2 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK III / 詳細: Vitrification instrument: Vitrobot Mark III / 手法: Blot approx. 20 seconds. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 7.0 µm / 平均電子線量: 25 e/Å2 / 詳細: Images averaged 2x2 / ビット/ピクセル: 8 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 50000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Gatan 626 / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Particle images were manually selected with Ximdisp. |
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CTF補正 | 詳細: MRC |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 16.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Rotan, Frealign / 使用した粒子像数: 19825 |