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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-17190 | ||||||||||||
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タイトル | The H/ACA RNP lobe of human telomerase with the dyskerin thumb loop in a semi-closed conformation | ||||||||||||
マップデータ | Final post-processed sharpened map | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | telomerase / H/ACA / pseudouridylation / ribonucleoprotein / RNA BINDING PROTEIN | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 telomere formation via telomerase / box H/ACA scaRNP complex / box H/ACA telomerase RNP complex / telomerase RNA localization to Cajal body / protein localization to Cajal body / snoRNA guided rRNA pseudouridine synthesis / box H/ACA snoRNP complex / rRNA pseudouridine synthesis / box H/ACA sno(s)RNA 3'-end processing / snRNA pseudouridine synthesis ...telomere formation via telomerase / box H/ACA scaRNP complex / box H/ACA telomerase RNP complex / telomerase RNA localization to Cajal body / protein localization to Cajal body / snoRNA guided rRNA pseudouridine synthesis / box H/ACA snoRNP complex / rRNA pseudouridine synthesis / box H/ACA sno(s)RNA 3'-end processing / snRNA pseudouridine synthesis / 異性化酵素; 分子内転位酵素; ムターゼ; その他の基を移すもの / enzyme-directed rRNA pseudouridine synthesis / telomerase RNA stabilization / pseudouridine synthesis / Cajal body organization / mRNA pseudouridine synthesis / box H/ACA snoRNA binding / telomerase activity / regulation of telomerase RNA localization to Cajal body / pseudouridine synthase activity / scaRNA localization to Cajal body / positive regulation of establishment of protein localization to telomere / positive regulation of protein localization to Cajal body / positive regulation of telomerase RNA localization to Cajal body / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / telomerase RNA binding / telomerase holoenzyme complex / rRNA modification in the nucleus and cytosol / positive regulation of double-strand break repair / positive regulation of double-strand break repair via nonhomologous end joining / : / Association of TriC/CCT with target proteins during biosynthesis / telomere maintenance via telomerase / Telomere Extension By Telomerase / RNA folding / positive regulation of double-strand break repair via homologous recombination / Cajal body / RNA processing / positive regulation of telomere maintenance via telomerase / positive regulation of DNA repair / fibrillar center / rRNA processing / site of double-strand break / protein-folding chaperone binding / histone binding / chromosome, telomeric region / nuclear body / DNA repair / ubiquitin protein ligase binding / protein-containing complex binding / nucleolus / RNA binding / nucleoplasm / identical protein binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.7 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Ghanim GE / Sekne Z / van Roon AMM / Balch S / Nguyen THD | ||||||||||||
資金援助 | 英国, 米国, European Union, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: 2.7 Å cryo-EM structure of human telomerase H/ACA ribonucleoprotein. 著者: George E Ghanim / Zala Sekne / Sebastian Balch / Anne-Marie M van Roon / Thi Hoang Duong Nguyen / 要旨: Telomerase is a ribonucleoprotein (RNP) enzyme that extends telomeric repeats at eukaryotic chromosome ends to counterbalance telomere loss caused by incomplete genome replication. Human telomerase ...Telomerase is a ribonucleoprotein (RNP) enzyme that extends telomeric repeats at eukaryotic chromosome ends to counterbalance telomere loss caused by incomplete genome replication. Human telomerase is comprised of two distinct functional lobes tethered by telomerase RNA (hTR): a catalytic core, responsible for DNA extension; and a Hinge and ACA (H/ACA) box RNP, responsible for telomerase biogenesis. H/ACA RNPs also have a general role in pseudouridylation of spliceosomal and ribosomal RNAs, which is critical for the biogenesis of the spliceosome and ribosome. Much of our structural understanding of eukaryotic H/ACA RNPs comes from structures of the human telomerase H/ACA RNP. Here we report a 2.7 Å cryo-electron microscopy structure of the telomerase H/ACA RNP. The significant improvement in resolution over previous 3.3 Å to 8.2 Å structures allows us to uncover new molecular interactions within the H/ACA RNP. Many disease mutations are mapped to these interaction sites. The structure also reveals unprecedented insights into a region critical for pseudouridylation in canonical H/ACA RNPs. Together, our work advances understanding of telomerase-related disease mutations and the mechanism of pseudouridylation by eukaryotic H/ACA RNPs. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_17190.map.gz | 78.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-17190-v30.xml emd-17190.xml | 29.6 KB 29.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_17190_fsc.xml | 9.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_17190.png | 46.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-17190.cif.gz | 8.3 KB | ||
その他 | emd_17190_additional_1.map.gz emd_17190_half_map_1.map.gz emd_17190_half_map_2.map.gz | 65.9 MB 65.9 MB 65.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17190 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17190 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_17190_validation.pdf.gz | 982.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_17190_full_validation.pdf.gz | 981.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_17190_validation.xml.gz | 18 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_17190_validation.cif.gz | 22.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17190 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17190 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8oueMC 8oufC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_17190.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Final post-processed sharpened map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.059 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Final unsharpened map
ファイル | emd_17190_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Final unsharpened map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half-map1 resulting from gold standard refinement in RELION
ファイル | emd_17190_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half-map1 resulting from gold standard refinement in RELION | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half-map2 resulting from gold standard refinement in RELION
ファイル | emd_17190_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half-map2 resulting from gold standard refinement in RELION | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Human telomerase H/ACA RNP lobe
全体 | 名称: Human telomerase H/ACA RNP lobe |
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要素 |
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-超分子 #1: Human telomerase H/ACA RNP lobe
超分子 | 名称: Human telomerase H/ACA RNP lobe / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all 詳細: The hTR H/ACA motif, which adopts a double-hairpin structure hinged by the H-box and flanked by the ACA box, scaffolds the assembly of two copies each of dyskerin, NHP2, NOP10 and GAR1, one ...詳細: The hTR H/ACA motif, which adopts a double-hairpin structure hinged by the H-box and flanked by the ACA box, scaffolds the assembly of two copies each of dyskerin, NHP2, NOP10 and GAR1, one on each hairpin. TCAB1 binds the CAB box. |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 415 KDa |
-超分子 #2: Telomerase H/ACA RNP lobe
超分子 | 名称: Telomerase H/ACA RNP lobe / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#5 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-超分子 #3: Human telomerase RNA
超分子 | 名称: Human telomerase RNA / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #6 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit DKC1
分子 | 名称: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit DKC1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO EC番号: 異性化酵素; 分子内転位酵素; ムターゼ; その他の基を移すもの |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 器官: Kidney |
分子量 | 理論値: 57.779211 KDa |
配列 | 文字列: MADAEVIILP KKHKKKKERK SLPEEDVAEI QHAEEFLIKP ESKVAKLDTS QWPLLLKNFD KLNVRTTHYT PLACGSNPLK REIGDYIRT GFINLDKPSN PSSHEVVAWI RRILRVEKTG HSGTLDPKVT GCLIVCIERA TRLVKSQQSA GKEYVGIVRL H NAIEGGTQ ...文字列: MADAEVIILP KKHKKKKERK SLPEEDVAEI QHAEEFLIKP ESKVAKLDTS QWPLLLKNFD KLNVRTTHYT PLACGSNPLK REIGDYIRT GFINLDKPSN PSSHEVVAWI RRILRVEKTG HSGTLDPKVT GCLIVCIERA TRLVKSQQSA GKEYVGIVRL H NAIEGGTQ LSRALETLTG ALFQRPPLIA AVKRQLRVRT IYESKMIEYD PERRLGIFWV SCEAGTYIRT LCVHLGLLLG VG GQMQELR RVRSGVMSEK DHMVTMHDVL DAQWLYDNHK DESYLRRVVY PLEKLLTSHK RLVMKDSAVN AICYGAKIML PGV LRYEDG IEVNQEIVVI TTKGEAICMA IALMTTAVIS TCDHGIVAKI KRVIMERDTY PRKWGLGPKA SQKKLMIKQG LLDK HGKPT DSTPATWKQE YVDYSESAKK EVVAEVVKAP QVVAEAAKTA KRKRESESES DETPPAAPQL IKKEKKKSKK DKKAK AGLE SGAEPGDGDS DTTKKKKKKK KAKEVELVSE UniProtKB: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit DKC1 |
-分子 #2: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 1
分子 | 名称: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 器官: Kidney |
分子量 | 理論値: 22.387963 KDa |
配列 | 文字列: MSFRGGGRGG FNRGGGGGGF NRGGSSNHFR GGGGGGGGGN FRGGGRGGFG RGGGRGGFNK GQDQGPPERV VLLGEFLHPC EDDIVCKCT TDENKVPYFN APVYLENKEQ IGKVDEIFGQ LRDFYFSVKL SENMKASSFK KLQKFYIDPY KLLPLQRFLP R PPGEKGPP ...文字列: MSFRGGGRGG FNRGGGGGGF NRGGSSNHFR GGGGGGGGGN FRGGGRGGFG RGGGRGGFNK GQDQGPPERV VLLGEFLHPC EDDIVCKCT TDENKVPYFN APVYLENKEQ IGKVDEIFGQ LRDFYFSVKL SENMKASSFK KLQKFYIDPY KLLPLQRFLP R PPGEKGPP RGGGRGGRGG GRGGGGRGGG RGGGFRGGRG GGGGGFRGGR GGGFRGRGH UniProtKB: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 1 |
-分子 #3: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 2
分子 | 名称: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 器官: Kidney |
分子量 | 理論値: 17.22607 KDa |
配列 | 文字列: MTKIKADPDG PEAQAEACSG ERTYQELLVN QNPIAQPLAS RRLTRKLYKC IKKAVKQKQI RRGVKEVQKF VNKGEKGIMV LAGDTLPIE VYCHLPVMCE DRNLPYVYIP SKTDLGAAAG SKRPTCVIMV KPHEEYQEAY DECLEEVQSL PLPL UniProtKB: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 2 |
-分子 #4: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 3
分子 | 名称: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 器官: Kidney |
分子量 | 理論値: 7.719989 KDa |
配列 | 文字列: MFLQYYLNEQ GDRVYTLKKF DPMGQQTCSA HPARFSPDDK YSRHRITIKK RFKVLMTQQP RPVL UniProtKB: H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 3 |
-分子 #5: Telomerase Cajal body protein 1
分子 | 名称: Telomerase Cajal body protein 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 器官: Kidney |
分子量 | 理論値: 59.35707 KDa |
配列 | 文字列: MKTLETQPLA PDCCPSDQDP APAHPSPHAS PMNKNADSEL MPPPPERGDP PRLSPDPVAG SAVSQELREG DPVSLSTPLE TEFGSPSEL SPRIEEQELS ENTSLPAEEA NGSLSEEEAN GPELGSGKAM EDTSGEPAAE DEGDTAWNYS FSQLPRFLSG S WSEFSTQP ...文字列: MKTLETQPLA PDCCPSDQDP APAHPSPHAS PMNKNADSEL MPPPPERGDP PRLSPDPVAG SAVSQELREG DPVSLSTPLE TEFGSPSEL SPRIEEQELS ENTSLPAEEA NGSLSEEEAN GPELGSGKAM EDTSGEPAAE DEGDTAWNYS FSQLPRFLSG S WSEFSTQP ENFLKGCKWA PDGSCILTNS ADNILRIYNL PPELYHEGEQ VEYAEMVPVL RMVEGDTIYD YCWYSLMSSA QP DTSYVAS SSRENPIHIW DAFTGELRAS FRAYNHLDEL TAAHSLCFSP DGSQLFCGFN RTVRVFSTAR PGRDCEVRAT FAK KQGQSG IISCIAFSPA QPLYACGSYG RSLGLYAWDD GSPLALLGGH QGGITHLCFH PDGNRFFSGA RKDAELLCWD LRQS GYPLW SLGREVTTNQ RIYFDLDPTG QFLVSGSTSG AVSVWDTDGP GNDGKPEPVL SFLPQKDCTN GVSLHPSLPL LATAS GQRV FPEPTESGDE GEELGLPLLS TRHVHLECRL QLWWCGGAPD SSIPDDHQGE KGQGGTEGGV GELI UniProtKB: Telomerase Cajal body protein 1 |
-分子 #6: Human telomerase RNA
分子 | 名称: Human telomerase RNA / タイプ: rna / ID: 6 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 器官: Kidney |
分子量 | 理論値: 145.477797 KDa |
配列 | 文字列: GGGUUGCGGA GGGUGGGCCU GGGAGGGGUG GUGGCCAUUU UUUGUCUAAC CCUAACUGAG AAGGGCGUAG GCGCCGUGCU UUUGCUCCC CGCGCGCUGU UUUUCUCGCU GACUUUCAGC GGGCGGAAAA GCCUCGGCCU GCCGCCUUCC ACCGUUCAUU C UAGAGCAA ...文字列: GGGUUGCGGA GGGUGGGCCU GGGAGGGGUG GUGGCCAUUU UUUGUCUAAC CCUAACUGAG AAGGGCGUAG GCGCCGUGCU UUUGCUCCC CGCGCGCUGU UUUUCUCGCU GACUUUCAGC GGGCGGAAAA GCCUCGGCCU GCCGCCUUCC ACCGUUCAUU C UAGAGCAA ACAAAAAAUG UCAGCUGCUG GCCCGUUCGC CCCUCCCGGG GACCUGCGGC GGGUCGCCUG CCCAGCCCCC GA ACCCCGC CUGGAGGCCG CGGUCGGCCC GGGGCUUCUC CGGAGGCACC CACUGCCACC GCGAAGAGUU GGGCUCUGUC AGC CGCGGG UCUCUCGGGG GCGAGGGCGA GGUUCAGGCC UUUCAGGCCG CAGGAAGAGG AACGGAGCGA GUCCCCGCGC GCGG CGCGA UUCCCUGAGC UGUGGGACGU GCACCCAGGA CUCGGCUCAC ACAUGC GENBANK: GENBANK: U85256.1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: C-flat / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 5 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 12 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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温度 | 最低: 78.0 K |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 41053 / 平均露光時間: 3.0 sec. / 平均電子線量: 48.0 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode and fractionated into 48 movie frames |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 倍率(補正後): 45872 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |