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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-16330 | |||||||||
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タイトル | Botulinum neurotoxin serotype X in complex with NTNH/X | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Botulinum neurotoxin / botulism / TOXIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 bontoxilysin / host cell presynaptic membrane / host cell cytoplasmic vesicle / host cell cytosol / protein transmembrane transporter activity / metalloendopeptidase activity / toxin activity / host cell plasma membrane / proteolysis / zinc ion binding ...bontoxilysin / host cell presynaptic membrane / host cell cytoplasmic vesicle / host cell cytosol / protein transmembrane transporter activity / metalloendopeptidase activity / toxin activity / host cell plasma membrane / proteolysis / zinc ion binding / extracellular region / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Clostridium botulinum (ボツリヌス菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.12 Å | |||||||||
データ登録者 | Martinez-Carranza M / Skerlova J / Stenmark P | |||||||||
資金援助 | European Union, 1件
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引用 | ジャーナル: bioRxiv / 年: 2023 タイトル: Structure and activity of botulinum neurotoxin X. 著者: Markel Martínez-Carranza / Jana Škerlová / Pyung-Gang Lee / Jie Zhang / Dave Burgin / Mark Elliott / Jules Philippe / Sarah Donald / Fraser Hornby / Linda Henriksson / Geoffrey Masuyer / ...著者: Markel Martínez-Carranza / Jana Škerlová / Pyung-Gang Lee / Jie Zhang / Dave Burgin / Mark Elliott / Jules Philippe / Sarah Donald / Fraser Hornby / Linda Henriksson / Geoffrey Masuyer / Matthew Beard / Min Dong / Pål Stenmark 要旨: Botulinum neurotoxins (BoNTs) are the most potent toxins known and are used to treat an increasing number of medical disorders. All BoNTs are naturally co-expressed with a protective partner protein ...Botulinum neurotoxins (BoNTs) are the most potent toxins known and are used to treat an increasing number of medical disorders. All BoNTs are naturally co-expressed with a protective partner protein (NTNH) with which they form a 300 kDa complex, to resist acidic and proteolytic attack from the digestive tract. We have previously identified a new botulinum neurotoxin serotype, BoNT/X, that has unique and therapeutically attractive properties. We present the cryo-EM structure of the BoNT/X-NTNH/X complex at 3.1 Å resolution. Unexpectedly, the BoNT/X complex is stable and protease resistant at both neutral and acidic pH and disassembles only in alkaline conditions. Using the stabilizing effect of NTNH, we isolated BoNT/X and showed that it has very low potency both and . Given the high catalytic activity and translocation efficacy of BoNT/X, low activity of the full toxin is likely due to the receptor-binding domain, which presents weak ganglioside binding and exposed hydrophobic surfaces. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_16330.map.gz | 95.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-16330-v30.xml emd-16330.xml | 17.3 KB 17.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_16330_fsc.xml | 10.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_16330.png | 99.5 KB | ||
マスクデータ | emd_16330_msk_1.map | 103 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-16330.cif.gz | 6.9 KB | ||
その他 | emd_16330_half_map_1.map.gz emd_16330_half_map_2.map.gz | 95.7 MB 95.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16330 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16330 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_16330_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_16330_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_16330_validation.xml.gz | 18.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_16330_validation.cif.gz | 23.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16330 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16330 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8bypMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_16330.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.05 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_16330_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_16330_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_16330_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Botulinum neurotoxin serotype X in complex with NTNH/X
全体 | 名称: Botulinum neurotoxin serotype X in complex with NTNH/X |
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要素 |
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-超分子 #1: Botulinum neurotoxin serotype X in complex with NTNH/X
超分子 | 名称: Botulinum neurotoxin serotype X in complex with NTNH/X タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Clostridium botulinum (ボツリヌス菌) |
分子量 | 理論値: 300 KDa |
-分子 #1: NTNH/X
分子 | 名称: NTNH/X / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Clostridium botulinum (ボツリヌス菌) |
分子量 | 理論値: 137.394984 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MDINDKLSID SPIDNKNIIE FITFRTDTSG IQKKIKAYQI AKHIWVVPER YYAEPLNISD EYKIDGGIYN ENYLTTDKER QEYLDAICI LFKRINNVIE GKKLLSLLSS ASPFPFKDDT NKYLLKEALL YVNEENFEFK FFTSNIILFG PGTNISKNQV L PLNGDDAT ...文字列: MDINDKLSID SPIDNKNIIE FITFRTDTSG IQKKIKAYQI AKHIWVVPER YYAEPLNISD EYKIDGGIYN ENYLTTDKER QEYLDAICI LFKRINNVIE GKKLLSLLSS ASPFPFKDDT NKYLLKEALL YVNEENFEFK FFTSNIILFG PGTNISKNQV L PLNGDDAT SGVGSVSEIC YNPFFTKKFG EYSLDPVIGL IECLLKSLYN LYGIKVSDDI KIPYKLQRAL NTDKYSYINL EE ALIFGGN DYKIFTEKPY WLSNDYFLKS LNTFEENKAK YEKDLKNDPN LNNELNQYLQ QKYSFSISKI WSLNLTAFAD IFN INIPTS FLASITFWDR SQYYKINYPN DYNIDGFVNG QWNTNLKNIE KDNNFIIFDK PKQIITYIND IFNLRYTSNL YEDN LDIES NNYYLNFMFE YDKGNNFTIN QYKALLDTLD NDFIDSLPPI QGMNAQNKLT SLPIISKGTD TENINSELLL PIHYL KSQT YNLDMYSSIK FTTNIYEVVS EKNSELVYTF LPHINEIMEN YSINNTIKTE EEFYNWMENL FINYSIDILE KRNSII PGI TAVLPWIGKA LNILNTNNDF EEELQLSGIK GLIKEYENFI IPDMIVPDIP LDNMPRTYDD IDKKLSEIYT KNKFLFL KG YYFIVQEWWT TYYIQFIELK YLCSGAINKQ QQLLITVLEK QLFYFTNNGL FPFDAMERMI NEFNRSIDIF SRISQQAL N NVDIFINECA LFIFNNEVYP LFLNNVENNI NKANDNVLNY INKATSLTEE QIKELTVKYT FSSIAEVEFF NESYFKKIT NMDIKNILTN IKNINNLILS GSQINDDITI FDESGNNLNI KFDPSIRIVD GHTNVAFKLD KSSQYINIPT ENINFSFMES FSIDFWLKI LDSTESTTLL NCIEDDIGWK LSIQNNNLLW EMKDNLGNNF TSLFTFNINN IWHNITLSID RLTNTFNCFL D GKLINTDN ISNIFSLETN TPIEIQSDNG AILLEAFSIL NYPLQQQEVL NRYREAFSNN YTRNYYGDIL KYNENYQLYN KT SPDKEVK KVFTNDKDYI AIEYNQNTNN PTFFSLIQKE QSKIYVEEND EVYICVQGDP LNYITIDNNQ AVLTKDINLA TSF KLKTNL NKPNSLIFSE NSQALRLSNR LNDENYILLD LVSKLDDEPL NIFYWEFI |
-分子 #2: Botulinum neurotoxin type X
分子 | 名称: Botulinum neurotoxin type X / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Clostridium botulinum (ボツリヌス菌) |
分子量 | 理論値: 150.348891 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MKLEINKFNY NDPIDGINVI TMRPPRHSDK INKGKGPFKA FQVIKNIWIV PERYNFTNNT NDLNIPSEPI MEADAIYNPN YLNTPSEKD EFLQGVIKVL ERIKSKPEGE KLLELISSSI PLPLVSNGAL TLSDNETIAY QENNNIVSNL QANLVIYGPG P DIANNATY ...文字列: MKLEINKFNY NDPIDGINVI TMRPPRHSDK INKGKGPFKA FQVIKNIWIV PERYNFTNNT NDLNIPSEPI MEADAIYNPN YLNTPSEKD EFLQGVIKVL ERIKSKPEGE KLLELISSSI PLPLVSNGAL TLSDNETIAY QENNNIVSNL QANLVIYGPG P DIANNATY GLYSTPISNG EGTLSEVSFS PFYLKPFDES YGNYRSLVNI VNKFVKREFA PDPASTLMHE LVHVTHNLYG IS NRNFYYN FDTGKIETSR QQNSLIFEEL LTFGGIDSKA ISSLIIKKII ETAKNNYTTL ISERLNTVTV ENDLLKYIKN KIP VQGRLG NFKLDTAEFE KKLNTILFVL NESNLAQRFS ILVAKHFLKE RPIDPIYVNI LDDNSYSTLE GFNISSQGSN DFQG QLLES SYFEKIESNA LRAFIKICPR NGLLYNAIYR NSKNYLNNID LEDKKTTSKT NVSYPCSLLN GCIEVENKDL FLISN KDSL NDINLSEEKI KPETTVFFKD KLPPQDITLS NYDFTEANSI PSISQQNILE RNEELYEPIR NSLFEIKTIY VDKLTT FHF LEAQNIDESI DSSKIRVELT DSVDEALSNP NKVYSPFKNM SNTINSIETG ITSTYIFYQW LRSIVKDFSD ETGKIDV ID KSSDTLAIVP YIGPLLNIGN DIRHGDFVGA IELAGITALL EYVPEFTIPI LVGLEVIGGE LAREQVEAIV NNALDKRD Q KWAEVYNITK AQWWGTIHLQ INTRLAHTYK ALSRQANAIK MNMEFQLANY KGNIDDKAKI KNAISETEIL LNKSVEQAM KNTEKFMIKL SNSYLTKEMI PKVQDNLKNF DLETKKTLDK FIKEKEDILG TNLSSSLRRK VSIRLNKNIA FDINDIPFSE FDDLINQYK NEIEDYEVLN LGAEDGKIKD LSGTTSDINI GSDIELADGR ENKAIKIKGS ENSTIKIAMN KYLRFSATDN F SISFWIKH PKPTNLLNNG IEYTLVENFN QRGWKISIQD SKLIWYLRDH NNSIKIVTPD YIAFNGWNLI TITNNRSKGS IV YVNGSKI EEKDISSIWN TEVDDPIIFR LKNNRDTQAF TLLDQFSIYR KELNQNEVVK LYNYYFNSNY IRDIWGNPLQ YNK KYYLQT QDKPGKGLIR EYWSSFGYDY VILSDSKTIT FPNNIRYGAL YNGSKVLIKN SKKLDGLVRN KDFIQLEIDG YNMG ISADR FNEDTNYIGT TYGTTHDLTT DFEIIQRQEK YRNYCQLKTP YNIFHKSGLM STETSKPTFH DYRDWVYSSA WYFQN YENL NLRKHTKTNW YFIPKDEGWD ED UniProtKB: Botulinum neurotoxin type X |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 5.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: FLEXIBLE FIT |
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得られたモデル | PDB-8byp: |