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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-16265 | |||||||||
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タイトル | Hfq-Crc-estA translation repression complex | |||||||||
マップデータ | Consensus map | |||||||||
試料 |
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キーワード | co-transcriptional RNA folding / Crc / metabolic regulation / ribonucleoprotein assembly / RNA chaperone Hfq / translational regulation / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 exodeoxyribonuclease III / double-stranded DNA 3'-5' DNA exonuclease activity / DNA repair / regulation of DNA-templated transcription / RNA binding / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Dendooven T / Luisi BF | |||||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2023 タイトル: Translational regulation by Hfq-Crc assemblies emerges from polymorphic ribonucleoprotein folding. 著者: Tom Dendooven / Elisabeth Sonnleitner / Udo Bläsi / Ben F Luisi / 要旨: The widely occurring bacterial RNA chaperone Hfq is a key factor in the post-transcriptional control of hundreds of genes in Pseudomonas aeruginosa. How this broadly acting protein can contribute to ...The widely occurring bacterial RNA chaperone Hfq is a key factor in the post-transcriptional control of hundreds of genes in Pseudomonas aeruginosa. How this broadly acting protein can contribute to the regulatory requirements of many different genes remains puzzling. Here, we describe cryo-EM structures of higher order assemblies formed by Hfq and its partner protein Crc on control regions of different P. aeruginosa target mRNAs. Our results show that these assemblies have mRNA-specific quaternary architectures resulting from the combination of multivalent protein-protein interfaces and recognition of patterns in the RNA sequence. The structural polymorphism of these ribonucleoprotein assemblies enables selective translational repression of many different target mRNAs. This system elucidates how highly complex regulatory pathways can evolve with a minimal economy of proteinogenic components in combination with RNA sequence and fold. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_16265.map.gz | 7.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-16265-v30.xml emd-16265.xml | 20.2 KB 20.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_16265.png | 69.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-16265.cif.gz | 7.7 KB | ||
その他 | emd_16265_additional_1.map.gz emd_16265_half_map_1.map.gz emd_16265_half_map_2.map.gz | 4.8 MB 95.6 MB 95.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16265 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16265 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_16265_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_16265_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_16265_validation.xml.gz | 13.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_16265_validation.cif.gz | 15.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16265 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16265 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_16265.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Consensus map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.83 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Locally refined map
ファイル | emd_16265_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Locally refined map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 1
ファイル | emd_16265_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 2
ファイル | emd_16265_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Complex of the RNA chaperone Hfq with helper protein Crc assemble...
全体 | 名称: Complex of the RNA chaperone Hfq with helper protein Crc assembled on a fragment of estA mRNA |
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要素 |
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-超分子 #1: Complex of the RNA chaperone Hfq with helper protein Crc assemble...
超分子 | 名称: Complex of the RNA chaperone Hfq with helper protein Crc assembled on a fragment of estA mRNA タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1, #3, #2 |
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分子量 | 理論値: 260 KDa |
-超分子 #2: RNA-binding protein Hfq and Catabolite repression control protein
超分子 | 名称: RNA-binding protein Hfq and Catabolite repression control protein タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2 |
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由来(天然) | 生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) |
-超分子 #3: estA mRNA
超分子 | 名称: estA mRNA / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3 |
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由来(天然) | 生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) |
-分子 #1: RNA-binding protein Hfq
分子 | 名称: RNA-binding protein Hfq / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 18 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) |
分子量 | 理論値: 9.114487 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSKGHSLQDP YLNTLRKERV PVSIYLVNGI KLQGQIESFD QFVILLKNTV SQMVYKHAIS TVVPSRPVRL PSGDQPAEPG NA UniProtKB: RNA-binding protein Hfq |
-分子 #2: Catabolite repression control protein
分子 | 名称: Catabolite repression control protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO / EC番号: exodeoxyribonuclease III |
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由来(天然) | 生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) |
分子量 | 理論値: 30.101869 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: GPAMRIISVN VNGIQAAAER GLLSWLQAQN ADVICLQDTR ASAFDLDDPS FQLDGYFLYA CDAELPEQGG VALYSRLQPK AVISGLGFE TADRYGRYLQ ADFDKVSIAT LLLPSGQSGD ESLNQKFKFM DDFTHYLSKQ RRKRREYIYC GSLYVAHQKM D VKNWRECQ ...文字列: GPAMRIISVN VNGIQAAAER GLLSWLQAQN ADVICLQDTR ASAFDLDDPS FQLDGYFLYA CDAELPEQGG VALYSRLQPK AVISGLGFE TADRYGRYLQ ADFDKVSIAT LLLPSGQSGD ESLNQKFKFM DDFTHYLSKQ RRKRREYIYC GSLYVAHQKM D VKNWRECQ QMPGFLAPER AWLDEVFGNL GYADALREVS REGDQFSWWP DSEQAEMLNL GWRFDYQVLT PGLRRFVRNA KL PRQPRFS QHAPLIVDYD WQLSI UniProtKB: Catabolite repression control protein |
-分子 #3: estA mRNA
分子 | 名称: estA mRNA / タイプ: rna / ID: 3 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) |
分子量 | 理論値: 37.997801 KDa |
配列 | 文字列: GCUGAGGAGG CUUUACGACG GGCCCCGAGG CGCAUGCCGA CGACACGGCG GCCCGACAAU AAAAACAAAU CAUGGAGUAA GAGAAUGAU CAGAAUGGCG CUCAAGCCAC UGGUAGCG |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.6 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 46800 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.15) |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.15) |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-8bvj: |