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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-16126 | |||||||||
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タイトル | SsoCsm | |||||||||
マップデータ | combined EM map | |||||||||
試料 |
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キーワード | Sulfolobus / Type III CRISPR / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Saccharolobus solfataricus (古細菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Spagnolo L / White MF | |||||||||
資金援助 | 英国, European Union, 2件
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引用 | ジャーナル: Curr Res Struct Biol / 年: 2023 タイトル: Structure of the type III-D CRISPR effector. 著者: Giuseppe Cannone / Dmytro Kompaniiets / Shirley Graham / Malcolm F White / Laura Spagnolo / 要旨: CRISPR-Cas is a prokaryotic adaptive immune system, classified into six different types, each characterised by a signature protein. Type III systems, classified based on the presence of a Cas10 ...CRISPR-Cas is a prokaryotic adaptive immune system, classified into six different types, each characterised by a signature protein. Type III systems, classified based on the presence of a Cas10 subunit, are rather diverse multi-subunit assemblies with a range of enzymatic activities and downstream ancillary effectors. The broad array of current biotechnological CRISPR applications is mainly based on proteins classified as Type II, however recent developments established the feasibility and efficacy of multi-protein Type III CRISPR-Cas effector complexes as RNA-targeting tools in eukaryotes. The crenarchaeon has two type III system subtypes (III-B and III-D). Here, we report the cryo-EM structure of the Csm Type III-D complex from (SsoCsm), which uses CRISPR RNA to bind target RNA molecules, activating the Cas10 subunit for antiviral defence. The structure reveals the complex organisation, subunit/subunit connectivity and protein/guide RNA interactions of the SsoCsm complex, one of the largest CRISPR effectors known. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_16126.map.gz | 58.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-16126-v30.xml emd-16126.xml | 19.3 KB 19.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_16126.png | 66.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-16126.cif.gz | 6.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16126 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16126 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_16126_validation.pdf.gz | 480.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_16126_full_validation.pdf.gz | 480.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_16126_validation.xml.gz | 6.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_16126_validation.cif.gz | 7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16126 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16126 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8bmwMC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_16126.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | combined EM map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.046 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : SsoCsm
+超分子 #1: SsoCsm
+分子 #1: CRISPR-associated small subunit protein (Type III-D)
+分子 #2: CRISPR-associated Cas7 paralog (Type III-D)
+分子 #3: CRISPR-associated Cas7 paralog (Type III-D)
+分子 #4: CRISPR-associated Cas7 paralog (Type III-D)
+分子 #6: CRISPR-associated Cas7 paralog (Type III-D)
+分子 #7: CRISPR-associated Cas7 paralog (Type III-D)
+分子 #8: CRISPR-associated protein Cas10 (Type III-D)
+分子 #9: CRISPR-associated protein Cas5 (Type III-D)
+分子 #5: RNA (48-MER)
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 BASE (4k x 4k) 平均電子線量: 34.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 0.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 192787 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |