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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1413 | |||||||||
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タイトル | Structural aspects of RbfA action during small ribosomal subunit assembly. | |||||||||
マップデータ | Cryo-EM map of Thermus thermophilus 30S subunit and RbfA complex. | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 maturation of SSU-rRNA / small ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / response to antibiotic / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Thermus thermophilus HB8 (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 12.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Datta PP / Wilson DN / Kawazoe M / Swami NK / Kaminishi T / Sharma MR / Booth TM / Takemoto C / Fucini P / Yokoyama S / Agrawal RK | |||||||||
引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2007 タイトル: Structural aspects of RbfA action during small ribosomal subunit assembly. 著者: Partha P Datta / Daniel N Wilson / Masahito Kawazoe / Neil K Swami / Tatsuya Kaminishi / Manjuli R Sharma / Timothy M Booth / Chie Takemoto / Paola Fucini / Shigeyuki Yokoyama / Rajendra K Agrawal / 要旨: Ribosome binding factor A (RbfA) is a bacterial cold shock response protein, required for an efficient processing of the 5' end of the 16S ribosomal RNA (rRNA) during assembly of the small (30S) ...Ribosome binding factor A (RbfA) is a bacterial cold shock response protein, required for an efficient processing of the 5' end of the 16S ribosomal RNA (rRNA) during assembly of the small (30S) ribosomal subunit. Here we present a crystal structure of Thermus thermophilus (Tth) RbfA and a three-dimensional cryo-electron microscopic (EM) map of the Tth 30S*RbfA complex. RbfA binds to the 30S subunit in a position overlapping the binding sites of the A and P site tRNAs, and RbfA's functionally important C terminus extends toward the 5' end of the 16S rRNA. In the presence of RbfA, a portion of the 16S rRNA encompassing helix 44, which is known to be directly involved in mRNA decoding and tRNA binding, is displaced. These results shed light on the role played by RbfA during maturation of the 30S subunit, and also indicate how RbfA provides cells with a translational advantage under conditions of cold shock. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1413.map.gz | 1.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1413-v30.xml emd-1413.xml | 10.8 KB 10.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1413.gif | 68.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1413 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1413 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1413_validation.pdf.gz | 294.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1413_full_validation.pdf.gz | 293.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1413_validation.xml.gz | 5.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1413 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1413 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1413.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Cryo-EM map of Thermus thermophilus 30S subunit and RbfA complex. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.76 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Complex of ribosomal subunit 30S and RbfA
全体 | 名称: Complex of ribosomal subunit 30S and RbfA |
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要素 |
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-超分子 #1000: Complex of ribosomal subunit 30S and RbfA
超分子 | 名称: Complex of ribosomal subunit 30S and RbfA / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 910.9 KDa |
-超分子 #1: 30S small ribosomal subunit
超分子 | 名称: 30S small ribosomal subunit / タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: 30S / 詳細: Thermus thermophilus / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: SSU 30S |
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由来(天然) | 生物種: Thermus thermophilus HB8 (バクテリア) |
分子量 | 実験値: 900 KDa |
-分子 #1: Ribosome binding factor A
分子 | 名称: Ribosome binding factor A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: RbfA / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Thermus thermophilus HB8 (バクテリア) / 株: HB8 |
分子量 | 実験値: 10.9 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.8 詳細: 20mM Hepes-KOH (pH7.8), 10mM Mg(OAc)2, 200 mM NH4Cl, 65 mM KCL. |
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グリッド | 詳細: Quantifoil 300 mesh Copper grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER 詳細: Vitrification instrument: Wadworth Center own cryo-plunger fabricated on-site 手法: 5ul of specimen was applied to the grid, then blotted using Whatman number 1 filter paper for 2 to 4 seconds, then plunged. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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温度 | 平均: 93 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lends astigmatism corrected at 210x magnification |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 14 µm / 実像数: 131 / 平均電子線量: 20 e/Å2 / ビット/ピクセル: 12 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 50760 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.7 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Oxford cryo-transfer holder / 試料ホルダーモデル: OTHER |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 12.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER / 使用した粒子像数: 61207 |
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-原子モデル構築 1
ソフトウェア | 名称: O |
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詳細 | Protocol: Rigid Body. The domains were fitted independently using the program O |
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
得られたモデル | PDB-2r1c: PDB-2r1g: |