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万見
- EMDB-13738: Horse spleen apoferritin -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-13738
タイトルHorse spleen apoferritin
マップデータhorse spleen apo-ferritin
試料
  • 複合体: apoferritin
  • タンパク質・ペプチド: Apoferritin (equine spleen)
キーワードiron binding / iron release / iron regulation / METAL TRANSPORT
生物種Equus caballus (ウマ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.54 Å
データ登録者Koning RI / Renault L
資金援助 オランダ, 1件
OrganizationGrant number国
Not funded オランダ
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022
タイトル: Automated vitrification of cryo-EM samples with controllable sample thickness using suction and real-time optical inspection.
著者: Roman I Koning / Hildo Vader / Martijn van Nugteren / Peter A Grocutt / Wen Yang / Ludovic L R Renault / Abraham J Koster / Arnold C F Kamp / Michael Schwertner /
要旨: The speed and efficiency of data collection and image processing in cryo-electron microscopy have increased over the last decade. However, cryo specimen preparation techniques have lagged and faster, ...The speed and efficiency of data collection and image processing in cryo-electron microscopy have increased over the last decade. However, cryo specimen preparation techniques have lagged and faster, more reproducible specimen preparation devices are needed. Here, we present a vitrification device with highly automated sample handling, requiring only limited user interaction. Moreover, the device allows inspection of thin films using light microscopy, since the excess liquid is removed through suction by tubes, not blotting paper. In combination with dew-point control, this enables thin film preparation in a controlled and reproducible manner. The advantage is that the quality of the prepared cryo specimen is characterized before electron microscopy data acquisition. The practicality and performance of the device are illustrated with experimental results obtained by vitrification of protein suspensions, lipid vesicles, bacterial and human cells, followed by imaged using single particle analysis, cryo-electron tomography, and cryo correlated light and electron microscopy.
履歴
登録2021年10月13日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年4月13日-
マップ公開2022年4月13日-
更新2023年12月13日-
現状2023年12月13日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_13738.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_13738.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈horse spleen apo-ferritin
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.86 Å/pix.
x 300 pix.
= 258. Å		0.86 Å/pix.
x 300 pix.
= 258. Å		0.86 Å/pix.
x 300 pix.
= 258. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.86 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.02
最小 - 最大-0.048751656 - 0.100325
平均 (標準偏差)0.0002564622 (±0.0047383956)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ300300300
Spacing300300300
セルA=B=C: 258.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : apoferritin

全体名称: apoferritin
要素
  • 複合体: apoferritin
  • タンパク質・ペプチド: Apoferritin (equine spleen)

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超分子 #1: apoferritin

超分子名称: apoferritin / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 詳細: Horse spleen apoferritin
由来(天然)生物種: Equus caballus (ウマ) / 器官: Spleen
分子量理論値: 504 MDa

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分子 #1: Apoferritin (equine spleen)

分子名称: Apoferritin (equine spleen) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO
配列文字列:
SSQIRQNYST EVEAAVNRLV NLYLRASYTY LSLGFYFDRD DVALEGVCHF FRELAEEKRE GAERLLKMQN QRGGRALFQD LQKPSQDEWG TTLDAMKAAI VLEKSLNQAL LDLHALGSAQ ADPHLCDFLE SHFLDEEVKL IKKMGDHLTN IQRLVGSQAG LGEYLFERLT LKHD

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
グリッドモデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 120 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.018000000000000002 kPa
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / チャンバー内温度: 294 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER
詳細: Prototype of Linkam Plunger Sample applied by dipping grid in dispersion and excess solution removed by suction..

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3348 / 平均電子線量: 65.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.6 µm / 倍率（公称値）: 105000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 689633
初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.54 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 91000
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: RELION

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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