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- EMDB-12984: Cryo-EM structure of the hub of the 28 triskelia mini clathrin co... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-12984
タイトルCryo-EM structure of the hub of the 28 triskelia mini clathrin coat complex, class 15
マップデータ
試料
  • 複合体: Beta2 appendage domain of AP2 bound to terminal domains beneath the hub of the 28 triskelia mini clathrin coat complex, class 15
    • 複合体: Clathrin heavy chain
      • タンパク質・ペプチド: Clathrin heavy chain
    • 複合体: AP-2 complex subunit beta
      • タンパク質・ペプチド: AP-2 complex subunit beta
キーワードClathrin / clathrin adaptor / AP2 / endocytosis
機能・相同性
機能・相同性情報


clathrin coat of trans-Golgi network vesicle / clathrin light chain binding / clathrin complex / Nef Mediated CD8 Down-regulation / clathrin adaptor complex / WNT5A-dependent internalization of FZD2, FZD5 and ROR2 / Trafficking of GluR2-containing AMPA receptors / WNT5A-dependent internalization of FZD4 / AP-2 adaptor complex / clathrin coat of coated pit ...clathrin coat of trans-Golgi network vesicle / clathrin light chain binding / clathrin complex / Nef Mediated CD8 Down-regulation / clathrin adaptor complex / WNT5A-dependent internalization of FZD2, FZD5 and ROR2 / Trafficking of GluR2-containing AMPA receptors / WNT5A-dependent internalization of FZD4 / AP-2 adaptor complex / clathrin coat of coated pit / postsynaptic neurotransmitter receptor internalization / clathrin coat assembly / Retrograde neurotrophin signalling / clathrin-coated endocytic vesicle / LDL clearance / clathrin-dependent endocytosis / coronary vasculature development / signal sequence binding / Nef Mediated CD4 Down-regulation / endolysosome membrane / aorta development / ventricular septum development / clathrin binding / Recycling pathway of L1 / synaptic vesicle endocytosis / EPH-ephrin mediated repulsion of cells / vesicle-mediated transport / MHC class II antigen presentation / VLDLR internalisation and degradation / receptor-mediated endocytosis / kidney development / intracellular protein transport / clathrin-coated endocytic vesicle membrane / cytoplasmic side of plasma membrane / spindle / endocytic vesicle membrane / Cargo recognition for clathrin-mediated endocytosis / presynapse / Clathrin-mediated endocytosis / mitotic cell cycle / postsynapse / Potential therapeutics for SARS / glutamatergic synapse / structural molecule activity / extracellular exosome / membrane / plasma membrane / cytosol
類似検索 - 分子機能
Clathrin, heavy chain, linker, core motif / Clathrin heavy chain, N-terminal / Clathrin, heavy chain / Clathrin, heavy chain, propeller repeat / Clathrin propeller repeat / Clathrin, heavy-chain linker / Clathrin-H-link / Region in Clathrin and VPS / Clathrin heavy chain repeat homology / Clathrin, heavy chain/VPS, 7-fold repeat ...Clathrin, heavy chain, linker, core motif / Clathrin heavy chain, N-terminal / Clathrin, heavy chain / Clathrin, heavy chain, propeller repeat / Clathrin propeller repeat / Clathrin, heavy-chain linker / Clathrin-H-link / Region in Clathrin and VPS / Clathrin heavy chain repeat homology / Clathrin, heavy chain/VPS, 7-fold repeat / Clathrin heavy-chain (CHCR) repeat profile. / Clathrin adaptor, beta-adaptin, appendage, Ig-like subdomain / Beta-adaptin appendage, C-terminal subdomain / AP-1/2/4 complex subunit beta / Beta2-adaptin appendage, C-terminal sub-domain / Beta2-adaptin appendage, C-terminal sub-domain / AP complex subunit beta / Coatomer/calthrin adaptor appendage, C-terminal subdomain / Clathrin adaptor, alpha/beta/gamma-adaptin, appendage, Ig-like subdomain / Adaptin C-terminal domain / Adaptin C-terminal domain / Clathrin/coatomer adaptor, adaptin-like, N-terminal / Adaptin N terminal region / Clathrin adaptor, appendage, Ig-like subdomain superfamily / TBP domain superfamily / Armadillo/beta-catenin-like repeats / Armadillo / Armadillo-like helical / Tetratricopeptide-like helical domain superfamily / Armadillo-type fold
類似検索 - ドメイン・相同性
Clathrin heavy chain / AP-2 complex subunit beta
類似検索 - 構成要素
生物種Sus scrofa (ブタ) / Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.5 Å
データ登録者Smith SM / Smith CJ
資金援助 英国, 1件
OrganizationGrant number国
Biotechnology and Biological Sciences Research Council (BBSRC)BB/N008391/1 英国
引用ジャーナル: EMBO J / 年: 2021
タイトル: Multi-modal adaptor-clathrin contacts drive coated vesicle assembly.
著者: Sarah M Smith / Gabrielle Larocque / Katherine M Wood / Kyle L Morris / Alan M Roseman / Richard B Sessions / Stephen J Royle / Corinne J Smith /
要旨: Clathrin-coated pits are formed by the recognition of membrane and cargo by the AP2 complex and the subsequent recruitment of clathrin triskelia. A role for AP2 in coated-pit assembly beyond initial ...Clathrin-coated pits are formed by the recognition of membrane and cargo by the AP2 complex and the subsequent recruitment of clathrin triskelia. A role for AP2 in coated-pit assembly beyond initial clathrin recruitment has not been explored. Clathrin binds the β2 subunit of AP2, and several binding sites have been identified, but our structural knowledge of these interactions is incomplete and their functional importance during endocytosis is unclear. Here, we analysed the cryo-EM structure of clathrin cages assembled in the presence of β2 hinge-appendage (β2HA). We find that the β2-appendage binds in at least two positions in the cage, demonstrating that multi-modal binding is a fundamental property of clathrin-AP2 interactions. In one position, β2-appendage cross-links two adjacent terminal domains from different triskelia. Functional analysis of β2HA-clathrin interactions reveals that endocytosis requires two clathrin interaction sites: a clathrin-box motif on the hinge and the "sandwich site" on the appendage. We propose that β2-appendage binding to more than one triskelion is a key feature of the system and likely explains why assembly is driven by AP2.
履歴
登録2021年5月21日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年8月11日-
マップ公開2021年8月11日-
更新2024年7月10日-
現状2024年7月10日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0149
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0149
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-7om8
  • 表面レベル: 0.016
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-7om8
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_12984.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_12984.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 163.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.78 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.0149 / ムービー #1: 0.0149
最小 - 最大-0.053792544 - 0.12319828
平均 (標準偏差)0.00018319282 (±0.003739683)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ350350350
Spacing350350350
セルA=B=C: 973.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z2.782.782.78
M x/y/z350350350
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z973.000973.000973.000
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS350350350
D min/max/mean-0.0540.1230.000

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_12984_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_12984_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_12984_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Beta2 appendage domain of AP2 bound to terminal domains beneath t...

全体名称: Beta2 appendage domain of AP2 bound to terminal domains beneath the hub of the 28 triskelia mini clathrin coat complex, class 15
要素
  • 複合体: Beta2 appendage domain of AP2 bound to terminal domains beneath the hub of the 28 triskelia mini clathrin coat complex, class 15
    • 複合体: Clathrin heavy chain
      • タンパク質・ペプチド: Clathrin heavy chain
    • 複合体: AP-2 complex subunit beta
      • タンパク質・ペプチド: AP-2 complex subunit beta

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超分子 #1: Beta2 appendage domain of AP2 bound to terminal domains beneath t...

超分子名称: Beta2 appendage domain of AP2 bound to terminal domains beneath the hub of the 28 triskelia mini clathrin coat complex, class 15
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all

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超分子 #2: Clathrin heavy chain

超分子名称: Clathrin heavy chain / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Sus scrofa (ブタ)

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超分子 #3: AP-2 complex subunit beta

超分子名称: AP-2 complex subunit beta / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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分子 #1: Clathrin heavy chain

分子名称: Clathrin heavy chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Sus scrofa (ブタ)
分子量理論値: 33.535574 KDa
配列文字列: MAQILPIRFQ EHLQLQNLGI NPANIGFSTL TMESDKFICI REKVGEQAQV VIIDMNDPSN PIRRPISADS AIMNPASKVI ALKAGKTLQ IFNIEMKSKM KAHTMTDDVT FWKWISLNTV ALVTDNAVYH WSMEGESQPV KMFDRHSSLA GCQIINYRTD A KQKWLLLT ...文字列:
MAQILPIRFQ EHLQLQNLGI NPANIGFSTL TMESDKFICI REKVGEQAQV VIIDMNDPSN PIRRPISADS AIMNPASKVI ALKAGKTLQ IFNIEMKSKM KAHTMTDDVT FWKWISLNTV ALVTDNAVYH WSMEGESQPV KMFDRHSSLA GCQIINYRTD A KQKWLLLT GISAQQNRVV GAMQLYSVDR KVSQPIEGHA ASFAQFKMEG NAEESTLFCF AVRGQAGGKL HIIEVGTPPT GN QPFPKKA VDVFFPPEAQ NDFPVAMQIS EKHDVVFLIT KYGYIHLYDL ETGTCIYMNR IS

UniProtKB: Clathrin heavy chain

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分子 #2: AP-2 complex subunit beta

分子名称: AP-2 complex subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 26.429457 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: GGYVAPKAVW LPAVKAKGLE ISGTFTHRQG HIYMEMNFTN KALQHMTDFA IQFNKNSFGV IPSTPLAIHT PLMPNQSIDV SLPLNTLGP VMKMEPLNNL QVAVKNNIDV FYFSCLIPLN VLFVEDGKME RQVFLATWKD IPNENELQFQ IKECHLNADT V SSKLQNNN ...文字列:
GGYVAPKAVW LPAVKAKGLE ISGTFTHRQG HIYMEMNFTN KALQHMTDFA IQFNKNSFGV IPSTPLAIHT PLMPNQSIDV SLPLNTLGP VMKMEPLNNL QVAVKNNIDV FYFSCLIPLN VLFVEDGKME RQVFLATWKD IPNENELQFQ IKECHLNADT V SSKLQNNN VYTIAKRNVE GQDMLYQSLK LTNGIWILAE LRIQPGNPNY TLSLKCRAPE VSQYIYQVYD SILKN

UniProtKB: AP-2 complex subunit beta

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 6.4
凍結凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: LEICA EM GP
詳細: 3 uL of sample applied to a grid and blotted for 4.5 s before plunging.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
平均電子線量: 64.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.1 µm / 倍率（公称値）: 59000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: OTHER
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 11676
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

詳細This structural model has been updated to include only clathrin terminal domain beta propeller residues that are close to the interface with the beta2 appendage domain.
得られたモデル

PDB-7om8:
Beta2 appendage domain of AP2 bound to terminal domains beneath the hub of the 28 triskelia mini clathrin coat complex, class 15

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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