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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-11277 | ||||||||||||||||||
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タイトル | Open-closed state of the Bt1762-Bt1763 levan transport system | ||||||||||||||||||
マップデータ | Map filtered by local resolution using RELION's own implementation | ||||||||||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 | ||||||||||||||||||
生物種 | Bacteroides thetaiotaomicron (strain ATCC 29148 / DSM 2079 / NCTC 10582 / E50 / VPI-5482) (バクテリア) | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.7 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | White JBR / van den Berg B / Ranson NA | ||||||||||||||||||
資金援助 | 英国, スイス, 5件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Insights into SusCD-mediated glycan import by a prominent gut symbiont. 著者: Declan A Gray / Joshua B R White / Abraham O Oluwole / Parthasarathi Rath / Amy J Glenwright / Adam Mazur / Michael Zahn / Arnaud Baslé / Carl Morland / Sasha L Evans / Alan Cartmell / Carol ...著者: Declan A Gray / Joshua B R White / Abraham O Oluwole / Parthasarathi Rath / Amy J Glenwright / Adam Mazur / Michael Zahn / Arnaud Baslé / Carl Morland / Sasha L Evans / Alan Cartmell / Carol V Robinson / Sebastian Hiller / Neil A Ranson / David N Bolam / Bert van den Berg / 要旨: In Bacteroidetes, one of the dominant phyla of the mammalian gut, active uptake of large nutrients across the outer membrane is mediated by SusCD protein complexes via a "pedal bin" transport ...In Bacteroidetes, one of the dominant phyla of the mammalian gut, active uptake of large nutrients across the outer membrane is mediated by SusCD protein complexes via a "pedal bin" transport mechanism. However, many features of SusCD function in glycan uptake remain unclear, including ligand binding, the role of the SusD lid and the size limit for substrate transport. Here we characterise the β2,6 fructo-oligosaccharide (FOS) importing SusCD from Bacteroides thetaiotaomicron (Bt1762-Bt1763) to shed light on SusCD function. Co-crystal structures reveal residues involved in glycan recognition and suggest that the large binding cavity can accommodate several substrate molecules, each up to ~2.5 kDa in size, a finding supported by native mass spectrometry and isothermal titration calorimetry. Mutational studies in vivo provide functional insights into the key structural features of the SusCD apparatus and cryo-EM of the intact dimeric SusCD complex reveals several distinct states of the transporter, directly visualising the dynamics of the pedal bin transport mechanism. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_11277.map.gz | 42.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-11277-v30.xml emd-11277.xml | 20.8 KB 20.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_11277_fsc.xml | 9.5 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_11277.png | 18.5 KB | ||
マスクデータ | emd_11277_msk_1.map | 70.2 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_11277_additional_1.map.gz emd_11277_additional_2.map.gz | 7.1 MB 54.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11277 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11277 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_11277_validation.pdf.gz | 274.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_11277_full_validation.pdf.gz | 273.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_11277_validation.xml.gz | 10.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11277 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11277 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_11277.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 70.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map filtered by local resolution using RELION's own implementation | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_11277_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened post-processed map from RELION
ファイル | emd_11277_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened post-processed map from RELION | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Unsharpened map from 3D auto-refine in RELION
ファイル | emd_11277_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Unsharpened map from 3D auto-refine in RELION | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Dimeric Bt1762-Bt1763 levan transporter complex
全体 | 名称: Dimeric Bt1762-Bt1763 levan transporter complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Dimeric Bt1762-Bt1763 levan transporter complex
超分子 | 名称: Dimeric Bt1762-Bt1763 levan transporter complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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分子量 | 理論値: 360 KDa |
-超分子 #2: SusD homolog
超分子 | 名称: SusD homolog / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron (strain ATCC 29148 / DSM 2079 / NCTC 10582 / E50 / VPI-5482) (バクテリア) |
組換発現 | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron (バクテリア) |
-超分子 #3: SusC homolog
超分子 | 名称: SusC homolog / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2 |
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由来(天然) | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron (strain ATCC 29148 / DSM 2079 / NCTC 10582 / E50 / VPI-5482) (バクテリア) |
-分子 #1: SusD homolog
分子 | 名称: SusD homolog / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron (strain ATCC 29148 / DSM 2079 / NCTC 10582 / E50 / VPI-5482) (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 66.142625 KDa |
組換発現 | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron (バクテリア) |
配列 | 文字列: MKKIIYIATI GITLLTTSCD DFLDRQVPQG IVTGDQIASP EYVDNLVISA YAIWATGDDI NSSFSLWNYD VRSDDCYKGG SGTEDGGVF NALEISKGIN TTDWNINDIW KRLYQCITRA NTALQSLDQM DEKTYPLKNQ RIAEMRFLRG HAHFMLKQLF K KIVIVNDE ...文字列: MKKIIYIATI GITLLTTSCD DFLDRQVPQG IVTGDQIASP EYVDNLVISA YAIWATGDDI NSSFSLWNYD VRSDDCYKGG SGTEDGGVF NALEISKGIN TTDWNINDIW KRLYQCITRA NTALQSLDQM DEKTYPLKNQ RIAEMRFLRG HAHFMLKQLF K KIVIVNDE NMEPDAYNEL SNTTYTNDEQ WQKIADDFQF AYDNLPEVQI EKGRPAQAAA AAYLAKTYLY KAYRQDGADN AL TGINEED LKQVVKYTDP LIMAKGGYGL ETDYSMNFLP QYENGAESVW AIQYSINDGT YNGNLNWGMG LTTPQILGCC DFH KPSQNL VNAFKTDSQG KPLFSTYDNE NYEVATDNVD PRLFHTVGMP GFPYKYNEGY IIQKNDDWSR SKGLYGYYVS LKEN VDPDC DCLKKGSYWA SSLNHIVIRY ADVLLMRAEA LIQLNDGRIT DAISLINEVR SRAAGSTMLI FNYKEDYGVN FKVTP YDLK AYAQDEAMKM LKWERRVEFG MESSRFFDLV RWGEAKDVIN AYYVTEASRC SIYKNAGFTE NKNEYLPVPF EQISAS NGN YTQNFGWAAA AHHHHHH |
-分子 #2: SusC homolog
分子 | 名称: SusC homolog / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron (strain ATCC 29148 / DSM 2079 / NCTC 10582 / E50 / VPI-5482) (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 115.483602 KDa |
配列 | 文字列: MPGIMKNKKL LCSVCFLFAF MSALWGQNIT VKGNVTSKTD GQPIIGASVV ETTATTNGTI TDFDGNFTLS VPVNSTLKIT YIGYKPVTV KAAAIVNVLL EEDTQMVDEV VVTGYTTQRK ADLTGAVSVV KVDEIQKQGE NNPVKALQGR VPGMNITADG N PSGSATVR ...文字列: MPGIMKNKKL LCSVCFLFAF MSALWGQNIT VKGNVTSKTD GQPIIGASVV ETTATTNGTI TDFDGNFTLS VPVNSTLKIT YIGYKPVTV KAAAIVNVLL EEDTQMVDEV VVTGYTTQRK ADLTGAVSVV KVDEIQKQGE NNPVKALQGR VPGMNITADG N PSGSATVR IRGIGTLNNN DPLYIIDGVP TKAGMHELNG NDIESIQVLK DAASASIYGS RAANGVIIIT TKQGKKGQIK IN FDASVSA SMYQSKMNVL NTEQYGRAMW QAYVNDGENP NGNALGYAYN WGYNADGNPV LYGMTLSKYL DSKNTMPVAD TDW FDEITR TGVIQQYNLS VSNGSEKGSS FFSLGYYKNL GVIKDTDFDR FSARMNSDYK LIDDILTIGQ HFTLNRTSEV QAPG GIIET ALDIPSAIPV YASDGSWGGP VGGWPDRRNP RAVLEYNKDN RYTYWRMFGD AYVNLTPFKG FNLRSTFGLD YANKQ ARYF TYPYQEGTQT NNGKSAVEAK QEHWTKWMWN AIATYQLEVG KHRGDVMIGM ELNREDDSHF SGYKEDFSIL TPDYMW PDA GSGTAQAYGA GEGYSLVSFF GKMNYSYADR YLLSLTLRRD GSSRFGKNHR YATFPSVSLG WRITQENFMK ELTWLDD LK LRASWGQTGN QEISNLARYT IYAPNYGTTD SFGGQSYGTA YDITGSNGGG VLPSGFKRNQ IGNDNIKWET TTQTNVGI D FSLFKQSLYG SLEYYYKKAT DILTEMAGVG VLGEGGSRWI NSGAMKNQGF EFNLGYRNKT AFGLTYDLNG NISTYRNEI LELPETVAAN GKFGGNGVKS VVGHTYGAQV GYIADGIFKS QDEVDNHATQ EGAAVGRIRY RDIDHNGVID ERDQNWIYDP TPSFSYGLN IYLEYKNFDL TMFWQGVQGV DIISDVKKKS DFWSASNVGF LNKGTRLLNA WSPTNPNSDI PALTRSDTNN E QRVSTYFV ENGSFLKLRN IQLGYTVPAV ISKKMRMDRL RFYCSAQNLL TIKSKNFTGE DPENPNFSYP IPVNITFGLN IG F |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.02 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 63.84 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |