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- EMDB-11046: In situ cryo-electron tomography reveals layered organization of ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-11046
タイトルIn situ cryo-electron tomography reveals layered organization of pre-ribosome maturation in nucleoli. Large Subunit Pre-Ribosome, Class 1
マップデータChlamydomonas reinhardtii large subunit pre-ribosome, Class 1
試料
  • 複合体: nucleolar small subunit processome, class 1
生物種Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 25.3 Å
データ登録者Erdmann PS / Klumpe S / Hou Z / Beck F / Wilfling F / Plitzko JM / Baumeister W
資金援助 ドイツ, 1件
OrganizationGrant number
Alexander von Humboldt Foundation ドイツ
引用ジャーナル: Nat Commun / : 2021
タイトル: In situ cryo-electron tomography reveals gradient organization of ribosome biogenesis in intact nucleoli.
著者: Philipp S Erdmann / Zhen Hou / Sven Klumpe / Sagar Khavnekar / Florian Beck / Florian Wilfling / Jürgen M Plitzko / Wolfgang Baumeister /
要旨: Ribosomes comprise a large (LSU) and a small subunit (SSU) which are synthesized independently in the nucleolus before being exported into the cytoplasm, where they assemble into functional ribosomes. ...Ribosomes comprise a large (LSU) and a small subunit (SSU) which are synthesized independently in the nucleolus before being exported into the cytoplasm, where they assemble into functional ribosomes. Individual maturation steps have been analyzed in detail using biochemical methods, light microscopy and conventional electron microscopy (EM). In recent years, single particle analysis (SPA) has yielded molecular resolution structures of several pre-ribosomal intermediates. It falls short, however, of revealing the spatiotemporal sequence of ribosome biogenesis in the cellular context. Here, we present our study on native nucleoli in Chlamydomonas reinhardtii, in which we follow the formation of LSU and SSU precursors by in situ cryo-electron tomography (cryo-ET) and subtomogram averaging (STA). By combining both positional and molecular data, we reveal gradients of ribosome maturation within the granular component (GC), offering a new perspective on how the liquid-liquid-phase separation of the nucleolus supports ribosome biogenesis.
履歴
登録2020年5月16日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年5月26日-
マップ公開2021年5月26日-
更新2021年10月13日-
現状2021年10月13日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.26
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(半径に従い着色)
  • 表面レベル: 0.26
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_11046.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Chlamydomonas reinhardtii large subunit pre-ribosome, Class 1
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
3.42 Å/pix.
x 200 pix.
= 684. Å
3.42 Å/pix.
x 200 pix.
= 684. Å
3.42 Å/pix.
x 200 pix.
= 684. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 3.42 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.26 / ムービー #1: 0.26
最小 - 最大-0.18108782 - 0.59711856
平均 (標準偏差)-0.0020462084 (±0.059173446)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 684.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z3.423.423.42
M x/y/z200200200
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z684.000684.000684.000
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS200200200
D min/max/mean-0.1810.597-0.002

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_11046_msk_1.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : nucleolar small subunit processome, class 1

全体名称: nucleolar small subunit processome, class 1
要素
  • 複合体: nucleolar small subunit processome, class 1

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超分子 #1: nucleolar small subunit processome, class 1

超分子名称: nucleolar small subunit processome, class 1 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス)
細胞中の位置: nuclear

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
凍結凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細in situ focus ion beam milled cells

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 1.5 e/Å2
詳細: mixture of dose-symmetric, and bidirectional tilting schemes
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 25.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / 使用したサブトモグラム数: 2011
抽出トモグラム数: 88 / 使用した粒子像数: 5405 / 手法: template matching
ソフトウェア: (名称: RELION (ver. 2.1), RELION (ver. 3.0))
CTF補正ソフトウェア - 名称: CTFFIND (ver. 4)
最終 3次元分類ソフトウェア: (名称: RELION (ver. 2.1), RELION (ver. 3.0))
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
ソフトウェア: (名称: RELION (ver. 2.1), RELION (ver. 3.0))
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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