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万見- EMDB-0874: The cryo-EM structure of E. coli CueR transcription activation complex -
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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0874 | |||||||||
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タイトル | The cryo-EM structure of E. coli CueR transcription activation complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | RNA polymerase / CueR / transcription activation / TRANSCRIPTION / TRANSCRIPTION (DNA to RNA) | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 sigma factor antagonist complex / DNA-binding transcription activator activity / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly ...sigma factor antagonist complex / DNA-binding transcription activator activity / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / cis-regulatory region sequence-specific DNA binding / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / protein-DNA complex / transcription antitermination / DNA-templated transcription initiation / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / transcription cis-regulatory region binding / copper ion binding / DNA-binding transcription factor activity / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA-templated transcription / positive regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / identical protein binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) / Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.69 Å | |||||||||
データ登録者 | Fang CL / Zhang Y | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Chem Biol / 年: 2021 タイトル: CueR activates transcription through a DNA distortion mechanism. 著者: Chengli Fang / Steven J Philips / Xiaoxian Wu / Kui Chen / Jing Shi / Liqiang Shen / Juncao Xu / Yu Feng / Thomas V O'Halloran / Yu Zhang / 要旨: The MerR-family transcription factors (TFs) are a large group of bacterial proteins responding to cellular metal ions and multiple antibiotics by binding within central RNA polymerase-binding regions ...The MerR-family transcription factors (TFs) are a large group of bacterial proteins responding to cellular metal ions and multiple antibiotics by binding within central RNA polymerase-binding regions of a promoter. While most TFs alter transcription through protein-protein interactions, MerR TFs are capable of reshaping promoter DNA. To address the question of which mechanism prevails, we determined two cryo-EM structures of transcription activation complexes (TAC) comprising Escherichia coli CueR (a prototype MerR TF), RNAP holoenzyme and promoter DNA. The structures reveal that this TF promotes productive promoter-polymerase association without canonical protein-protein contacts seen between other activator proteins and RNAP. Instead, CueR realigns the key promoter elements in the transcription activation complex by clamp-like protein-DNA interactions: these induce four distinct kinks that ultimately position the -10 element for formation of the transcription bubble. These structural and biochemical results provide strong support for the DNA distortion paradigm of allosteric transcriptional control by MerR TFs. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0874.map.gz | 8.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-0874-v30.xml emd-0874.xml | 30.9 KB 30.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_0874_fsc.xml | 10.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_0874.png | 79.1 KB | ||
マスクデータ | emd_0874_msk_1.map | 103 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-0874.cif.gz | 9.5 KB | ||
その他 | emd_0874_half_map_1.map.gz emd_0874_half_map_2.map.gz | 80.8 MB 80.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0874 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0874 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_0874_validation.pdf.gz | 829.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_0874_full_validation.pdf.gz | 828.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_0874_validation.xml.gz | 17.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_0874_validation.cif.gz | 23.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0874 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0874 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0874.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.307 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_0874_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_0874_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_0874_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Escherichia coli CueR transcription activation complex
+超分子 #1: Escherichia coli CueR transcription activation complex
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: RNA polymerase sigma factor RpoD
+分子 #9: HTH-type transcriptional regulator CueR
+分子 #6: DNA (50-MER)
+分子 #7: DNA (50-MER)
+分子 #8: RNA (5'-R(*CP*UP*CP*GP*A)-3')
+分子 #10: ZINC ION
+分子 #11: MAGNESIUM ION
+分子 #12: SILVER ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 15 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: C-flat-1.2/1.3 4C / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - Film thickness: 120 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 120 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 282.65 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2278 / 平均露光時間: 12.0 sec. / 平均電子線量: 56.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |