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タイトルStructure reveals why genome folding is necessary for site-specific integration of foreign DNA into CRISPR arrays.
ジャーナル・号・ページNat Struct Mol Biol, Vol. 30, Issue 11, Page 1675-1685, Year 2023
掲載日2023年9月14日
著者Andrew Santiago-Frangos / William S Henriques / Tanner Wiegand / Colin C Gauvin / Murat Buyukyoruk / Ava B Graham / Royce A Wilkinson / Lenny Triem / Kasahun Neselu / Edward T Eng / Gabriel C Lander / Blake Wiedenheft /
PubMed 要旨Bacteria and archaea acquire resistance to viruses and plasmids by integrating fragments of foreign DNA into the first repeat of a CRISPR array. However, the mechanism of site-specific integration ...Bacteria and archaea acquire resistance to viruses and plasmids by integrating fragments of foreign DNA into the first repeat of a CRISPR array. However, the mechanism of site-specific integration remains poorly understood. Here, we determine a 560-kDa integration complex structure that explains how Pseudomonas aeruginosa Cas (Cas1-Cas2/3) and non-Cas proteins (for example, integration host factor) fold 150 base pairs of host DNA into a U-shaped bend and a loop that protrude from Cas1-2/3 at right angles. The U-shaped bend traps foreign DNA on one face of the Cas1-2/3 integrase, while the loop places the first CRISPR repeat in the Cas1 active site. Both Cas3 proteins rotate 100 degrees to expose DNA-binding sites on either side of the Cas2 homodimer, which each bind an inverted repeat motif in the leader. Leader sequence motifs direct Cas1-2/3-mediated integration to diverse repeat sequences that have a 5'-GT. Collectively, this work reveals new DNA-binding surfaces on Cas2 that are critical for DNA folding and site-specific delivery of foreign DNA.
リンクNat Struct Mol Biol / PubMed:37710013 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.48 Å
構造データ

EMDB-29280, PDB-8flj:
Cas1-Cas2/3 integrase and IHF bound to CRISPR leader, repeat and foreign DNA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.48 Å

由来
  • pseudomonas aeruginosa pa14 (緑膿菌)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードRECOMBINATION (遺伝的組換え) / DNA BINDING PROTEIN (DNA結合タンパク質) / HYDROLASE/DNA / DNA integration / maintenance of CRISPR repeat elements / IHF-DNA complex / Enzymes altering nucleic acid conformation / Site specific endodeoxyribonucleases: cleavage is not sequence specific / Nucleotidyltransferases / GO:0008301 / HYDROLASE-DNA complex

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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