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Structure paper

タイトルAn ensemble of interconverting conformations of the elemental paused transcription complex creates regulatory options.
ジャーナル・号・ページProc Natl Acad Sci U S A, Vol. 120, Issue 8, Page e2215945120, Year 2023
掲載日2023年2月21日
著者Jin Young Kang / Tatiana V Mishanina / Yu Bao / James Chen / Eliza Llewellyn / James Liu / Seth A Darst / Robert Landick /
PubMed 要旨Transcriptional pausing underpins the regulation of cellular RNA synthesis, but its mechanism remains incompletely understood. Sequence-specific interactions of DNA and RNA with the dynamic, ...Transcriptional pausing underpins the regulation of cellular RNA synthesis, but its mechanism remains incompletely understood. Sequence-specific interactions of DNA and RNA with the dynamic, multidomain RNA polymerase (RNAP) trigger reversible conformational changes at pause sites that temporarily interrupt the nucleotide addition cycle. These interactions initially rearrange the elongation complex (EC) into an elemental paused EC (ePEC). ePECs can form longer-lived PECs by further rearrangements or interactions of diffusible regulators. For both bacterial and mammalian RNAPs, a half-translocated state in which the next DNA template base fails to load into the active site appears central to the ePEC. Some RNAPs also swivel interconnected modules that may stabilize the ePEC. However, it is unclear whether swiveling and half-translocation are requisite features of a single ePEC state or if multiple ePEC states exist. Here, we use cryo-electron microscopy (cryo-EM) analysis of ePECs with different RNA-DNA sequences combined with biochemical probes of ePEC structure to define an interconverting ensemble of ePEC states. ePECs occupy either pre- or half-translocated states but do not always swivel, indicating that difficulty in forming the posttranslocated state at certain RNA-DNA sequences may be the essence of the ePEC. The existence of multiple ePEC conformations has broad implications for transcriptional regulation.
リンクProc Natl Acad Sci U S A / PubMed:36795753 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.2 - 5.5 Å
構造データ

EMDB-28109, PDB-8eg7:
Cryo-EM structure of pre-consensus elemental paused elongation complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-28110, PDB-8eg8:
Cryo-EM structure of consensus elemental paused elongation complex with a folded TL
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-28113, PDB-8egb:
Cryo-EM structure of consensus elemental paused elongation complex with an unfolded TL
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-28143, PDB-8eh8:
Cryo-EM structure of his-elemental paused elongation complex with a folded TL and a rotated RH-FL (1)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.4 Å

EMDB-28144, PDB-8eh9:
Cryo-EM structure of his-elemental paused elongation complex with a folded TL and a rotated RH-FL (2)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

EMDB-28145, PDB-8eha:
Cryo-EM structure of his-elemental paused elongation complex with a folded TL and a rotated RH-FL (out)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.7 Å

EMDB-28146, PDB-8ehf:
Cryo-EM structure of his-elemental paused elongation complex with an unfolded TL (1)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-28148, PDB-8ehi:
Cryo-EM structure of his-elemental paused elongation complex with an unfolded TL (2)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.5 Å

化合物

ChemComp-1N7:
CHAPSO / CHAPSO / 可溶化剤*YM / CHAPS detergent

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-4QM:
(3R,5S,7R,8R,9S,10S,12S,13R,14S,17R)-10,13-dimethyl-17-[(2R)-pentan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthrene-3,7,12-triol / 5β-コラン-3α,7α,12α-トリオ-ル

由来
  • escherichia coli (大腸菌)
キーワードTRANSCRIPTION (転写 (生物学)) / TRANSFERASE/DNA/RNA / RNA polymerase (RNAポリメラーゼ) / cryo-EM structure / elemental pause / Escherichia coli (大腸菌) / TRANSFERASE-DNA-RNA complex / transcriptional regulation / transcriptional pausing

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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