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タイトルStructural basis for DNA proofreading.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 14, Issue 1, Page 8501, Year 2023
掲載日2023年12月27日
著者Gina Buchel / Ashok R Nayak / Karl Herbine / Azadeh Sarfallah / Viktoriia O Sokolova / Angelica Zamudio-Ochoa / Dmitry Temiakov /
PubMed 要旨DNA polymerase (DNAP) can correct errors in DNA during replication by proofreading, a process critical for cell viability. However, the mechanism by which an erroneously incorporated base ...DNA polymerase (DNAP) can correct errors in DNA during replication by proofreading, a process critical for cell viability. However, the mechanism by which an erroneously incorporated base translocates from the polymerase to the exonuclease site and the corrected DNA terminus returns has remained elusive. Here, we present an ensemble of nine high-resolution structures representing human mitochondrial DNA polymerase Gamma, Polγ, captured during consecutive proofreading steps. The structures reveal key events, including mismatched base recognition, its dissociation from the polymerase site, forward translocation of DNAP, alterations in DNA trajectory, repositioning and refolding of elements for primer separation, DNAP backtracking, and displacement of the mismatched base into the exonuclease site. Altogether, our findings suggest a conserved 'bolt-action' mechanism of proofreading based on iterative cycles of DNAP translocation without dissociation from the DNA, facilitating primer transfer between catalytic sites. Functional assays and mutagenesis corroborate this mechanism, connecting pathogenic mutations to crucial structural elements in proofreading steps.
リンクNat Commun / PubMed:38151585 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.58 - 3.08 Å
構造データ

EMDB-29745, PDB-8g5i:
Cryo-EM structure of the Mismatch Sensing Complex (I) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.75 Å

EMDB-29746, PDB-8g5j:
Cryo-EM structure of the Mismatch Uncoupling Complex (II) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.63 Å

EMDB-29747, PDB-8g5k:
Cryo-EM structure of the Wedge Alignment Complex (VIII) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.9 Å

EMDB-29748, PDB-8g5l:
Cryo-EM structure of the Primer Separation Complex (IX) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.0 Å

EMDB-29749, PDB-8g5m:
Cryo-EM structure of the Mismatch Locking Complex (III) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.58 Å

EMDB-29750, PDB-8g5n:
Cryo-EM structure of the Guide loop Engagement Complex (VI) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.73 Å

EMDB-29751, PDB-8g5o:
Cryo-EM structure of the Guide loop Engagement Complex (IV) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.61 Å

EMDB-29752, PDB-8g5p:
Cryo-EM structure of the Guide loop Engagement Complex (V) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.78 Å

EMDB-41091, PDB-8t7e:
Cryo-EM structure of the Backtracking Initiation Complex (VII) of Human Mitochondrial DNA Polymerase Gamma
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.08 Å

由来
  • homo sapiens (ヒト)
  • synthetic construct (人工物)
  • synthetic rna (人工物)
キーワードREPLICATION/DNA / Mitochondrial DNA Polymerase / DNA Proofreading / Mismatch Sensing / REPLICATION (DNA複製) / REPLICATION-DNA complex / PolG / Wedge alignment / Primer Separation / REPLICATION/DNA/RNA / Mismatch Locking / REPLICATION-DNA-RNA complex / Guide loop Engagement / Transferase/DNA / Backtracking (バックトラッキング) / Mismatch repair (DNAミスマッチ修復) / Transferase-DNA complex

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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