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タイトルDirect observation of backtracking by influenza A and B polymerases upon consecutive incorporation of the nucleoside analog T1106.
ジャーナル・号・ページCell Rep, Vol. 42, Issue 1, Page 111901, Year 2023
掲載日2023年1月31日
著者Tomas Kouba / Anna Dubankova / Petra Drncova / Elisa Donati / Pietro Vidossich / Valentina Speranzini / Alex Pflug / Johanna Huchting / Chris Meier / Marco De Vivo / Stephen Cusack /
PubMed 要旨The antiviral pseudo-base T705 and its de-fluoro analog T1106 mimic adenine or guanine and can be competitively incorporated into nascent RNA by viral RNA-dependent RNA polymerases. Although ...The antiviral pseudo-base T705 and its de-fluoro analog T1106 mimic adenine or guanine and can be competitively incorporated into nascent RNA by viral RNA-dependent RNA polymerases. Although dispersed, single pseudo-base incorporation is mutagenic, consecutive incorporation causes polymerase stalling and chain termination. Using a template encoding single and then consecutive T1106 incorporation four nucleotides later, we obtained a cryogenic electron microscopy structure of stalled influenza A/H7N9 polymerase. This shows that the entire product-template duplex backtracks by 5 nt, bringing the singly incorporated T1106 to the +1 position, where it forms an unexpected T1106:U wobble base pair. Similar structures show that influenza B polymerase also backtracks after consecutive T1106 incorporation, regardless of whether prior single incorporation has occurred. These results give insight into the unusual mechanism of chain termination by pyrazinecarboxamide base analogs. Consecutive incorporation destabilizes the proximal end of the product-template duplex, promoting irreversible backtracking to a more energetically favorable overall configuration.
リンクCell Rep / PubMed:36596301
手法EM (単粒子)
解像度2.34 - 3.12 Å
構造データ

EMDB-14144, PDB-7qtl:
Influenza A/H7N9 polymerase elongation complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.48 Å

EMDB-14222, PDB-7r0e:
Early transcription elongation state of influenza A/H7N9 polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the +1 position
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.51 Å

EMDB-14240, PDB-7r1f:
Early transcription elongation state of influenza B polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.58 Å

EMDB-14857, PDB-7zpl:
Symmetric dimer of influenza A/H7N9 polymerase bound to 5' vRNA hook
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.12 Å

EMDB-14858, PDB-7zpm:
Influenza A/H7N9 polymerase apo-protein dimer complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.81 Å

EMDB-15984, PDB-8bdr:
Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the U +1 position
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.7 Å

EMDB-15996, PDB-8be0:
Early transcription elongation state of influenza B/Mem polymerase backtracked due to double incoproation of nucleotide analogue T1106 and with singly incoporated T1106 at the C +1 position
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.34 Å

EMDB-16006, PDB-8bek:
Early transcription elongation state of influenza A/H7N9 backtracked polymerase with singly incoporated T1106 at the U +1 position
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.86 Å

EMDB-16013, PDB-8bf5:
Early transcription elongation state of influenza A/H7N9 polymerase stalled with incoming GTP analogue
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.96 Å

化合物

ChemComp-2TM:
5'-O-[(S)-hydroxy{[(S)-hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl]methyl}phosphoryl]cytidine / 5′-シチジルオキシホスホニルメチルホスホニルオキシホスホン酸

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-GTA:
P1-7-METHYLGUANOSINE-P3-ADENOSINE-5',5'-TRIPHOSPHATE / 7-メチルグアノシン-7-イウム5′-三りん酸Oγ-(5′-アデノシル)

ChemComp-HOH:
WATER

ChemComp-G2P:
PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER / GMPCPP / GMP-CPP, エネルギー貯蔵分子類似体*YM

由来
  • influenza a virus (a/zhejiang/dtid-zju01/2013(h7n9)) (A型インフルエンザウイルス)
  • influenza a virus (A型インフルエンザウイルス)
  • influenza b virus (b/memphis/13/2003) (B型インフルエンザウイルス)
  • influenza b virus (B型インフルエンザウイルス)
  • influenza b virus (b/acre/117700/2012) (B型インフルエンザウイルス)
  • influenza b virus (b/kaliningrad/rii06/2012) (B型インフルエンザウイルス)
キーワードVIRAL PROTEIN / Influenza / viral RNA-dependent RNA polymerase; cap-dependent transcription / viral RNA-dependent RNA polymerase; antiviral drug; nucleoside analogue; T705 (favipiravir); T1106; cap-dependent transcription; backtracking; / H7N9 / viral RNA-dependent RNA polymerase / viral RNA-dependent RNA polymerase; / nucleoside analogue

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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