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タイトルStructural basis for Rep-mediated adeno-associated virus packaging.
ジャーナル・号・ページCell Rep, Vol. 45, Issue 3, Page 117044, Year 2026
掲載日2026年3月5日
著者Victoria Xu / Aiysha McInnes / Matthew Wake / Marta Acebrón-García-de-Eulate / Joseph D Barritt / Doryen Bubeck / Sarah L Rouse /
PubMed 要旨Adeno-associated viruses (AAVs) are parvoviruses utilized as gene therapy vectors. However, the AAV packaging mechanism is unresolved at the molecular level, creating a bottleneck for vector ...Adeno-associated viruses (AAVs) are parvoviruses utilized as gene therapy vectors. However, the AAV packaging mechanism is unresolved at the molecular level, creating a bottleneck for vector manufacturing, safety, and efficacy. Here, cryo-EM structures of the Rep helicase packaging motor in complex with the packaging marker DNA (ITR) and the Rep-AAV8 capsid complex are presented. Rep-ITR complexes reveal dynamic oligomeric states on the DNA, elucidating the strand separation mechanism coupled to its ATPase cycle. We observe Rep preferentially bound to empty capsids, with a binding interface likely conserved across the virus family. This complex also unveils a cryptic capsid ATP-binding site which, alongside Rep binding, triggers structural rearrangements priming the capsid for packaging. Collectively, these findings advance the understanding of Rep-mediated packaging, with significant implications for parvovirus virology and viral vector design.
リンクCell Rep / PubMed:41790558
手法EM (単粒子)
解像度1.88 - 3.08 Å
構造データ

EMDB-54050, PDB-9rm5:
Hexameric AAV2 Rep40-ssDNA (ITR) complex in presence of ATPyS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.44 Å

EMDB-54181: Consensus map of heptameric Rep40-dsDNA (ITR) in presence of ATPyS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.75 Å

EMDB-54182: Focused map of 3 subunits of Rep40 +dsDNA (ITR) in complex with ATPgS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.63 Å

EMDB-54183: Focused map of 4 subunits of heptameric Rep40-dsDNA (ITR) in complex with ATPgS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.96 Å

EMDB-54184, PDB-9rqt:
Heptameric AAV2 Rep40-dsDNA (ITR) complex in presence of ATPgS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.88 Å

EMDB-54195, PDB-9rrs:
AAV8 capsid in complex with Rep40 and ADP
手法: EM (単粒子) / 解像度: 1.88 Å

EMDB-54328, PDB-9rwg:
Pentameric AAV2 Rep40 in complex with AAV8
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.19 Å

EMDB-54403: Consensus map of Hexameric AAV2 Rep40-dsDNA (ITR) duplex complex in presence of ATPyS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.07 Å

EMDB-54416, PDB-9s0n:
Hexameric AAV2 Rep40-dsDNA (ITR) melting complex in presence of ATPyS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.08 Å

EMDB-54429, PDB-9s10:
Hexameric AAV2 Rep40-dsDNA (ITR) duplex complex in presence of ATPyS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.07 Å

化合物

ChemComp-AGS:
PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATP-gamma-S, エネルギー貯蔵分子類似体*YM

ChemComp-MG:
Unknown entry

ChemComp-ADP:
ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-HOH:
WATER

由来
  • adeno-associated virus 2 (アデノ随伴ウイルス)
  • dna molecule (その他)
  • adeno-associated virus 8 (アデノ随伴ウイルス)
キーワードDNA BINDING PROTEIN / Helicase / Adeno-associated Virus / AAA+ ATPase / VIRUS / AAV

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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