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タイトルrRNA methylation by Spb1 regulates the GTPase activity of Nog2 during 60S ribosomal subunit assembly.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 14, Issue 1, Page 1207, Year 2023
掲載日2023年3月2日
著者Kamil Sekulski / Victor Emmanuel Cruz / Christine S Weirich / Jan P Erzberger /
PubMed 要旨Biogenesis of the large ribosomal (60S) subunit involves the assembly of three rRNAs and 46 proteins, a process requiring approximately 70 ribosome biogenesis factors (RBFs) that bind and release the ...Biogenesis of the large ribosomal (60S) subunit involves the assembly of three rRNAs and 46 proteins, a process requiring approximately 70 ribosome biogenesis factors (RBFs) that bind and release the pre-60S at specific steps along the assembly pathway. The methyltransferase Spb1 and the K-loop GTPase Nog2 are essential RBFs that engage the rRNA A-loop during sequential steps in 60S maturation. Spb1 methylates the A-loop nucleotide G2922 and a catalytically deficient mutant strain (spb1) has a severe 60S biogenesis defect. However, the assembly function of this modification is currently unknown. Here, we present cryo-EM reconstructions that reveal that unmethylated G2922 leads to the premature activation of Nog2 GTPase activity and capture a Nog2-GDP-AlF transition state structure that implicates the direct involvement of unmodified G2922 in Nog2 GTPase activation. Genetic suppressors and in vivo imaging indicate that premature GTP hydrolysis prevents the efficient binding of Nog2 to early nucleoplasmic 60S intermediates. We propose that G2922 methylation levels regulate Nog2 recruitment to the pre-60S near the nucleolar/nucleoplasmic phase boundary, forming a kinetic checkpoint to regulate 60S production. Our approach and findings provide a template to study the GTPase cycles and regulatory factor interactions of the other K-loop GTPases involved in ribosome assembly.
リンクNat Commun / PubMed:36864048 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.34 - 2.9 Å
構造データ

EMDB-26651, PDB-7uoo:
Nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing pre-rotation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.34 Å

EMDB-26686, PDB-7uqb:
Nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing pre-rotation state from a SPB1-D52A strain with AlF4
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.43 Å

EMDB-26689: Locally refined 5S rRNP map from the nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing pre-rotation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.63 Å

EMDB-26703, PDB-7uqz:
Nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing pre-rotation state from a SPB1 D52A strain
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.44 Å

EMDB-26799, PDB-7uui:
Nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing post-rotation state from a SPB1 D52A strain
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.9 Å

EMDB-26941, PDB-7v08:
Nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing pre-rotation state from a Spb1 D52A suppressor 3 strain
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.36 Å

化合物

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-B3P:
2-[3-(2-HYDROXY-1,1-DIHYDROXYMETHYL-ETHYLAMINO)-PROPYLAMINO]-2-HYDROXYMETHYL-PROPANE-1,3-DIOL / 2,2′-(トリメチレンビスイミノ)ビス[2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオ-ル] / pH緩衝剤*YM

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-GDP:
GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / GDP / GDP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-GTP:
GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / GTP / GTP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-K:
Unknown entry / カリウムカチオン

ChemComp-HOH:
WATER

ChemComp-ALF:
TETRAFLUOROALUMINATE ION / テトラフルオロアルミナ-ト

由来
  • saccharomyces cerevisiae by4741 (パン酵母)
キーワードRIBOSOME / ribosome biogenesis / K-loop GTPase / GTPase / GTPase transition state / GDP aluminum fluoride / 5S rRNP

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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