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Structure paper

タイトルVHUT-cryo-FIB, a method to fabricate frozen hydrated lamellae from tissue specimens for in situ cryo-electron tomography.
ジャーナル・号・ページJ Struct Biol, Vol. 213, Issue 3, Page 107763, Year 2021
掲載日2021年6月24日
著者Jianguo Zhang / Danyang Zhang / Lei Sun / Gang Ji / Xiaojun Huang / Tongxin Niu / Jiashu Xu / Chengying Ma / Yun Zhu / Ning Gao / Wei Xu / Fei Sun /
PubMed 要旨Cryo-electron tomography (cryo-ET) provides a promising approach to study intact structures of macromolecules in situ, but the efficient preparation of high-quality cryosections represents a ...Cryo-electron tomography (cryo-ET) provides a promising approach to study intact structures of macromolecules in situ, but the efficient preparation of high-quality cryosections represents a bottleneck. Although cryo-focused ion beam (cryo-FIB) milling has emerged for large and flat cryo-lamella preparation, its application to tissue specimens remains challenging. Here, we report an integrated workflow, VHUT-cryo-FIB, for efficiently preparing frozen hydrated tissue lamella that can be readily used in subsequent cryo-ET studies. The workflow includes vibratome slicing, high-pressure freezing, ultramicrotome cryo-trimming and cryo-FIB milling. Two strategies were developed for loading cryo-lamella via a side-entry cryo-holder or an FEI AutoGrid. The workflow was validated by using various tissue specimens, including rat skeletal muscle, rat liver and spinach leaf specimens, and in situ structures of ribosomes were obtained at nanometer resolution from the spinach and liver samples.
リンクJ Struct Biol / PubMed:34174447
手法EM (トモグラフィー) / EM (サブトモグラム平均)
解像度34.0 Å
構造データ

EMDB-0732:
Cryo electron tomogram of cryo-lamella of rat skeleton muscle
手法: EM (トモグラフィー)

EMDB-0733:
Cryo electron tomogram of cryo-lamella of spinach leaf
手法: EM (トモグラフィー)

EMDB-0734:
Spinach 80S ribosome
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 34.0 Å

由来
  • Mus musculus (ハツカネズミ)
  • Spinacia oleracea (ホウレンソウ)
  • Spinacia olerac (ホウレンソウ)

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

EMDB/PDB/SASBDBから引用されている文献のデータベース

  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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