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タイトルStructure of the Lipid Nanodisc-reconstituted Vacuolar ATPase Proton Channel: DEFINITION OF THE INTERACTION OF ROTOR AND STATOR AND IMPLICATIONS FOR ENZYME REGULATION BY REVERSIBLE DISSOCIATION.
ジャーナル・号・ページJ Biol Chem, Vol. 292, Issue 5, Page 1749-1761, Year 2017
掲載日2017年2月3日
著者Nicholas J Stam / Stephan Wilkens /
PubMed 要旨Eukaryotic vacuolar H-ATPase (V-ATPase) is a multisubunit enzyme complex that acidifies subcellular organelles and the extracellular space. V-ATPase consists of soluble V-ATPase and membrane-integral ...Eukaryotic vacuolar H-ATPase (V-ATPase) is a multisubunit enzyme complex that acidifies subcellular organelles and the extracellular space. V-ATPase consists of soluble V-ATPase and membrane-integral V proton channel sectors. To investigate the mechanism of V-ATPase regulation by reversible disassembly, we recently determined a cryo-EM reconstruction of yeast V The structure indicated that, when V is released from V, the N-terminal cytoplasmic domain of subunit a (a) changes conformation to bind rotor subunit d However, insufficient resolution precluded a precise definition of the a-d interface. Here we reconstituted V into lipid nanodiscs for single-particle EM. 3D reconstructions calculated at ∼15-Å resolution revealed two sites of contact between a and d that are mediated by highly conserved charged residues. Alanine mutagenesis of some of these residues disrupted the a-d interaction, as shown by isothermal titration calorimetry and gel filtration of recombinant subunits. A recent cryo-EM study of holo V-ATPase revealed three major conformations corresponding to three rotational states of the central rotor of the enzyme. Comparison of the three V-ATPase conformations with the structure of nanodisc-bound V revealed that V is halted in rotational state 3. Combined with our prior work that showed autoinhibited V-ATPase to be arrested in state 2, we propose a model in which the conformational mismatch between free V and V functions to prevent unintended reassembly of holo V-ATPase when activity is not needed.
リンクJ Biol Chem / PubMed:27965356 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度16.3 - 20.3 Å
構造データ

EMDB-6335:
Three-Dimensional Reconstruction of Lipid Nanodisc Reconstituted Yeast V-ATPase Membrane Sector
手法: EM (単粒子) / 解像度: 16.3 Å

EMDB-6336:
Three-Dimensional Reconstruction of Calmodulin-Bound Lipid Nanodisc Reconstituted Yeast V-ATPase Membrane Sector
手法: EM (単粒子) / 解像度: 20.3 Å

由来
  • Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
  • synthetic construct (人工物)
  • Homo sapiens (ヒト)

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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